Artigos Internacionais sobre Ozonoterapia

Revista Española de Ozonoterapia vol. 1, nº 1. pp.44-53, 2011 Editado por AEPROMO (Asociación Española de Profesionales Médicos en Ozonoterapia) Creative Commons: reconocimiento.

1-Adjuvant Hyperbaric Oxigen and ozone therapy in the treatment of chonic leg and foot ulcers (pilot clinical study).

2-Hyperbaric oxygen therapy Ozone therapy Leg ulcers Foot ulcers.

3-Abstract This pilot study describes the clinical effects of Adjunctive Hyperbaric Oxygen Therapy (HBOT) and Ozone Therapy in the treatment of chronic ulcers most of which did not respond to standard wound care and conventional methods of therapy and the patients were threatened by amputation. HBO and Ozone Therapy increased the healing rate of these ulcers, and avoided amputation. Adjuvant HBO and Ozone Therapy showed effective adjunctive therapy and we recommend a Randomized Controlled Trial to prove that effect.

4–Introduction Leg ulcers are a common problem thought to affect about 1% of the population at some point in their lives and about 1.5 per 1000 people at any one time. Leg ulcers are more common in women than men, and the prevalence increases with age. Venous disease is present in the majority of cases; peripheral vascular disease may coexist or may be the main cause of an ulcer. Other disease processes may also be involved, such as diabetes or rheumatoid disease. Leg ulceration is chronic, and an ulcer may be present for months or years without healing.

After healing, recurrence rates are high. There are many approaches to management, with large variations in practice at local and international levels. (1) Hyperbaric Medicine is the fascinating use of barometric pressure for delivering increased oxygen dissolved in plasma to body tissues. Hyperbaric oxygen therapy (HBOT) is a form of treatment in which a patient breathes 100% oxygen at higher than normal atmospheric pressure that is greater than 1 atmosphere absolute (ATA).

Therapy is given in special therapeutic chambers, which were earlier used primarily to treat illnesses of deep sea divers. (2, 3, 4) Ozone (O3) is a strong antioxidant. (5) Ozone can exert protective effects by oxidative preconditioning, stimulating and/or preserving the endogenous antioxidant systems and by blocking the xanthine / xanthine oxidase pathway for reactive oxygen species generation, as demonstrated in studies of the damage induced by carbotetrachloride (CCL4) or by hepatic and renal ischemia-reperfusion. (6, 7, 8, 9) Ozone has been used with good results in the treatment of patients with diabetic foot, because of its germicidal properties and its influence on the processes of oxygen metabolism, and other effects. (10)

5-Aim of the Work The present pilot study aims to clinically evaluate the effectiveness of two different modalities of OxyTherapy; Hyperbaric Oxygen and Ozone Therapy in the treatment of chronic ulcers. Patients and Methods Patients: This pilot study represents experience in the management of 15 cases, who had clinically diagnosed leg or foot ulcer, treated throughout the period between 2007 and 2008.

Patients were grouped into three different groups according to the severity of the case and treatment modality; Hyperbaric Oxygen Therapy; 5 patients; Ozone Therapy; 5 patients; and Combined Modality Therapy, 5 patients Methods: Diagnosis/Assessment; medical history, physical examination, ulcer examination, clinical investigations, ankle brachial pressure index (ABPI), investigations to exclude other causes, wound measurement, identifying hard-to-heal ulcers. Management of wounds: the general rules to treat wounds include the accurate diagnosis and classification of the Wound, the vascular Status (ABPI), good control of blood glucose, correction of underlying cause, correction of malnutrition, treatment of Infection, debridement: of necrotic tissue and underlying osteomyelitis, obliteration of dead space as a result of debridement, .off-loading, wound care, and finally adjuvant therapy (11) .

Hyperbaric Oxygen Therapy: Following the protocol adapted by Jain KK (12) , sessions was done in the Multiplace Baramed 6/2/6 Hyperbaric Chambers, ETC Inc., USA. Oxygen was inhaled from a helmet or a mask at a pressure of: 2- 2.5 ATA (atmospheric pressure, equals 10 – 15 meters under Sea Surface).

6-Sessions were initially done on daily basis (6 sessions/ week). Intermittent, each session will be 90- 120 minutes, with rest every 20 sessions. The first clinical evaluation was done after 5 sessions. Ozone Therapy: Following the protocol adapted by Renate Viebahn-Hänsler (2007) (13) , patients to be treated daily with ozone (generated by an ozone generator, Ozonosan Alpha 1, Germany), by rectal insufflation as systemic therapy (with an ozone concentration up to 35 µg), and local treatment by covering the lesion by a plastic bag, filled with ozone at a concentration of 60 µg, decreased up to 20).

The first clinical evaluation was done after 5 sessions. With improvement, the frequency of sessions was decreased gradually. Combined: The combined modality was achieved by systemic HBOT and Local O3 as described above. For local treatment; Standard wound care, topical application of ozonated olive oil and wound dressing. Results Ten patients (66.7%) had type 2 diabetes mellitus of them 8 (53.3%) were IDDM. The mean age was 53.3 ± 9.86 years (37- 68 years). The sex distribution was 10 males (66.7%) and 5 females (33.3%), with a ratio of 2:1. In addition, 10 patients (66.7%) were threatened by amputation. The main data of the studied patients is shown in table 1.

7-Outcome Successful results were achieved in 11 (73.3%) out of the studied 15 patients. The most effective modalities were combined modality 4 out of 5 (80%), the ozone therapy 4 out of 5 (80%), the HBOT 3 out of 5 (60%). Considering the severity of cases, combined modality was the most effective but with more selection of cases which suffered more from ischemia, infection and/or edema. Ozone therapy was very effective, easier to apply with less complication and higher patient compliance. A striking feature was that out of the 10 patients threatened by amputation, seven (70%) patients had their limbs saved. Clinical case treated with HBOT: Male, 38 yrs, smoker not diabetic. complaining of recurrent left leg ulcer since 1 month provoked by Trauma, then infected wound, gradually increase

8-Clinical case treated with ozone therapy: A 65 years male IDDM patient was diagnosed as Rt diabetic foot gangrene; Wagner 4 classification. The main problem was diabetic foot, Infection and neuropathy. He was recommended for Right below knee amputation. He was unfit for HBOT because of his heart problem. He received ozone therapy daily (Topical 80→60 µg/ml) and rectal insufflation 15 – 35 µ/ml 250 – 300 ml for 5 days followed by surgical debridement. Ozone therapy continued 3 sessions / week for seven weeks then twice / week for four weeks and finally once / week for 12 weeks. This was followed by using ozonated olive oil only. The maximum concentration for rectal insufflation was 35 µ/ml and the volume was 300 ml. Topical ozone concentration dropped gradually from 80 µ/ml till 20 µ/ml.

Another case of 68 years male, NIDDM, smoker with severe pains of the left leg and foot. He suffered from intermittent claudications and was unfit for revascularization. There was a pressure ulcer of the left heel and left superficial safenous artery occlusion.

9-Clinical cases treated with combined HBOT and ozone therapy: A 55 years female patient with uncontrolled IDDM and ulcer of the left heel. She was suffering from pains of the left leg and foot. She passed serial debridements and unfit for re-vascularization. She was planned for below knee amputation. There was complete occlusion of tibialis posterior artery and occluded segments of tibialis anterior and superficial safenous arteries.

There was left leg ischemia (ABPI 0.65), severe diabetic foot infection, gangrenous arterial Ulcer of the Heel. The surgical decision was to control diabetes, ischemia, and infection. This to be followed by debridement, grafting (plastic surgery) and proper foot wear. The oxy-therapy protocol was to start with HBOT till control of ischemia and infection by 20 sessions daily; 6 days / week. This is to be followed by topical ozone three sessions / week (60 µg/ml) till wound is clean; then three sessions / week (40→20 µg/ml) to promote healing. The total therapy was 23 sessions HBOT and 37 sessions topical ozone in a four month period.

Discussion HBO promotes wound healing by counteracting tissue hypoxia and is a valuable adjunct in management of ischemic, infected, and non-healing wounds. (12) It is generally accepted that correction of woundhypoxia is required to provide enough O2 that would support growth of regenerating tissues. (14)

Rationale of HBO for ulcers based on the hypoxia theory has been a matter of controversy, between authors who do not recommend the use of HBOT in venous ulcers; reporting that the role of HBOT seems very limited, and that reported successful cases would heal without the need for HBO, (15) or reporting that it is difficult to justify such an expensive, ineffective, complication-prone treatment modality for problem extremity wounds. (16) Several studies reported favorable results in treating venous ulcers with HBO. (17, 18) Specifically, two Double-Blind, Randomized-controlled studies; the first has significantly demonstrated an improvement in venous stasis ulcers that showed no response to standard wound care. (19)

The second concluded that hyperbaric oxygen enhanced the healing of ischemic, non-healing diabetic leg ulcers and may be used as a valuable adjunct to conventional therapy when reconstructive surgery is not possible. (20) On the other hand, authors supporting its use only in extraordinary circumstances as a useful adjunct in the treatment of some life- or limb-threatening situations where it can be cost effective. (21) Also, Jain et al, 2004 reported that HBO will remain an important adjunct to wound healing but its role needs to be redefined. (12)

10-Conclusions Oxy-Therapy is a beneficial adjuvant therapy that: •Accelerates the rate of wound healing, •Preserves a functional extremity, •Reduces the need for Amputation, and •Increases the rate of complete healing of bad ulcers on long-term therapy Ozone Therapy: §Highly effective treatment of bad healing ulcers §Improves some systemic disorders present in those patients §Enhances the sense of wellbeing Hyperbaric Oxygen Therapy: §Valuable for treating Selected cases of diabetic foot complications and impaired wound-healing. (Hypoxic)

Combined Modality §More beneficial in Selected cases (Hypoxia, infection, edema) §Costly Recommendations From this pilot study we conclude that Adjuvant HBO and Ozone Therapy increased healing rates of chronic leg ulcers which did not respond to standard wound care and conventional methods of therapy, even in the presence of significant and severe co morbidities and challenges. We also support many recommendations that the role of HBOT and Ozone Therapy should be redefined by good randomized controlled studies to improve the level of evidence supporting their use in the management of venous ulcers and the cost effectiveness of its use.

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8- Peralta C, Leon OS, Xaus C (1999): Protective effect of ozone treatment on the injury associated with hepatic ischemia-reperfusion: antioxidant-prooxidation balance. Free Radic Res 1999; 31: 191- 196.

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Revista Española de Ozonoterapia, vol. 1, nº 1. pp. 44-53, 2011

 

 

Aspectos prácticos en ozonoterapia:

Comprobación de la concentración de ozono generada /tiempo de vida media del gas en la jeringuilla

A pesar de los avances alcanzados en la aplicación médica del ozono, algunos aspectos relacionados con la manipulación clínica de este gas no han sido esclarecidos o estudiados con profundidad. El presente trabajo aplicó un método espectrofotométrico simple para el control de la concentración del ozono que proviene de un generador médico. Además se estudió el tiempo de vida media del ozono dentro de una jeringa ubicada en diferentes posiciones.

Se demostró como realizando lecturas espectrofotométricas (240 nm) y mediante cálculos matemáticos (que toman en consideración la temperatura y presión ambiental de trabajo) se puede determinar la concentración de ozono que emite el generador de uso clínico, en caso de sospechar que no funciona adecuadamente o que no esté correctamente calibrado. Adicionalmente se demuestra la importancia de usar el gas en los primeros 10 min después de ser generado, en los cuales se pierde el 10% de la dosis inicial. También se comprobó que la posición en que se coloca la jeringuilla, aunque si es aconsejado tenerla con el cono hacia arriba, no es determinante en el manejo del gas.

Practical aspects of ozone therapy: Checking the generated ozone concentration / average lifetime of gas in the syringe.

Despite the current advances in the medical uses of ozone, some aspects of the clinical handling of this gas have not been clarified and studied property. The present work applies a spectrophotometric method for controlling the concentration of the medical ozone generator. In addition we studied the half life time of the ozone inside a syringe located at different positions.

As was demonstrated by performing spectrophotometric measurement (240nm) and by mathematical calculations (taking into account working temperature and pressure) is possible to know the concentration of ozone generated by ozone devices for clinical use. This method is useful in case of doubt about the right functioning of the device or if it suspected a loss of calibration. Additionally, it was demonstrate the importance of using O3 in the first 10 min after being generated, because the loses of the10% of the initial dose. Also it was found that the position, in which the syringe is placed, even if advised to have it with the cone up, is not decisive in handling the gas.

• Introducción Durante experimentos en una instalación para la electrificación, en 1975, el físico holandés Mak Van Marumom, descubrió que al pasar un arco eléctrico a través del aire aparecía una sustancia gaseosa con olor característico, que poseía fuertes propiedades oxidantes. En 1840 el profesor de la universidad de Basilea (Suiza), Cristian Frederick Schonbein relacionó los datos de los cambios con las propiedades del oxígeno y la formación de un gas en particular, al cual llamó ozono (de la palabra griega ozein “oloroso”).
• Schonbein detectó por primera vez la capacidad del ozono para unirse con sustratos biológicos en las posiciones correspondientes a los dobles enlaces. 1 La utilidad de la ozonoterapia en el tratamiento de diversas patologías se ha ido consolidando en el tiempo. A manera de ejemplo, dos estudios recientes de meta-análisis que aportan una fuerte evidencia científica, demuestran que la ozonoterapia en el tratamiento de la hernia discal, es tan eficiente como la cirugía, pero con un índice mucho menor de eventos adversos y también enormes ventajas en cuanto a los costos. 2,3 No obstante los avances alcanzados en está práctica médica, algunos aspectos relacionados con la manipulación clínica de este gas no han sido esclarecidos o estudiados con profundidad. El objetivo del presente trabajo fue aplicar un método espectrofotométrico simple para el control de la concentración del ozono que proviene de un generador médico y estudiar el tiempo de vida media del ozono dentro de una jeringa ubicada en diferentes posiciones.
  

  Materiales y métodos El ozono (mezcla O2/O3) se obtuvo de un generador OzonosanAlpha Plus (Alemania) a partir de oxígeno médico. El generador tiene incorporado un espectrofotómetro interno. Para el cálculo del tiempo de vida media y la comprobación del generador se utilizó un espectrofotómetro externo de simple haz y lámpara de deuterio (LKB, Alemania) ajustado a 254 nm. Medición de la concentración de ozono: Se tomaron muestras de ozono ajustando el equipo a diferentes concentraciones. Las muestras recogidas en una jeringuilla se inyectaron de manera inmediata en una cubeta de cuarzo de 1 cm, se tapó y se leyó la densidad óptica a 254 nm contra blanco aire.

• Los experimentos se repitieron 5 veces por cada concentración analizada. Partiendo de los valores de densidad óptica y el coeficiente de extinción molar del ozono (3000 M-1. cm-1 a 273,15 K y 1,103 •105Pa)4,5 se realizaron los cálculos de la concentración real de ozono. Se calcularon los porcentajes de desviación de las diferentes concentraciones obtenidas con respecto a las que indicaba el control interno del equipo.
• Los cálculos se basaron en la fórmula de Lambert-Beer, donde: C= D.O./ε•L, siendo: D.O., densidad óptica; ε, coeficiente de extinción molar del ozono (3000 M-1. cm-1) y L, paso de luz de la cubeta (1 cm). Se consideraron las modificaciones que ejercen sobre el coeficiente de extinción la temperatura y la presión. C= (D.O./ε•L) • (PNTP/P)• (T/TNTP) , siendo: PNTP, la presión normal (1,103 •105Pa), P la presión a la que se hacen las mediciones; TNTP (Temperatura normal, 273,15 K), y T la temperatura a la cual se realizó el experimento (20 ºC = 273,1 K).

Para los cálculos, se multiplicó la concentración en (mol/L) por el factor de conversión 48.000 mg/mol para obtener la concentración de ozono en μg/mL. Estudio del tiempo de vida media de la mezcla O2/O3 en una jeringuilla: Una jeringuilla plástica cono Luer central reutilizable de 50 mL se cargó con una concentración conocida de O2/O3 (20 μg/mL) y se colocó con el cono hacia arriba o hacia abajo con el auxilio de un soporte universal. A tiempo cero y cada 10 min se vertió en una cubeta de cuarzo de 1 cm, 3 mL del contenido de la jeringuilla y se midió la densidad óptica a 254 nm en el espectrofotómetro contra blanco aire. La cinética se siguió por 30 min. Los experimentos se repitieron 5 veces.

Se calculó la variación de la concentración en el tiempo, el tiempo de vida media y el tiempo en que se degrada el 90% de la concentración inicial. Se registró la temperatura y la presión de trabajo, que durante el tiempo del estudio se mantuvieron constantes. Procesamiento estadístico de los datos: El análisis estadístico se inició con la prueba preliminar OUTLIERS para detectar los valores aberrantes. Se calcularon diferentes parámetros descriptivos para las variables analizadas (media y coeficiente de variación). Después se empleó el método ANOVA (una cola) seguido por la prueba de homogeneidad de varianza (Levene) y la prueba de comparación múltiple (Rangos de Duncan).

El nivel de significación estadístico empleado en todos los casos fue como mínimo de p < 0,05. Para el estudio de la relación existente entre los valores de concentración y densidad óptica se utilizó el análisis de regresión y correlación lineal. Se tomó en cuenta, para validar la aceptabilidad del modelo escogido, los valores obtenidos para la prueba Durbin-Watson en el análisis de residuos. Se reportó el coeficiente de correlación de Pearson. Los datos se procesaron utilizando el paquete estadístico STATISTICA (versión 6) para WINDOWS. Resultados y discusión Los resultados de las mediciones de la densidad óptica de diferentes muestras de ozono y los cálculos de las concentraciones se recogen en la tabla 1. Tabla 1. Concentraciones calculadas de ozono y su variación con respecto al valor teórico.

Como se puede apreciar en la tabla, las variaciones de la concentración que se establecieron en el equipo con respecto a aquellas calculadas mediante el método espectrofotométrico no superan un 10 % (valor medio de la desviación encontrada 3,95 %). Debido a las diferentes fuentes de error del propio método fotométrico, para establecer las concentraciones del ozono, se ha establecido que este tiene una variación de un 10 % con respecto al valor de concentración real. 4

Por lo anterior, una desviación de un 10 % podría ser el límite aceptado para considerar la precisión del equipo. Un problema desde el punto de vista práctico, sería analizar concentraciones de ozono por encima de 40 μg/mL (si el espectrofotómetro no es capaz de detectar una absorbancia mayor de 3), para ello serían necesarias diluciones. Una variante para una dilución gaseosa, sería por ejemplo mezclar 5 mL de oxígeno y 5 mL del ozono, tomando en cuenta el factor de dilución para los cálculos finales.

Aunque los equipos generadores de ozono son calibrados por los fabricantes y deben ser certificados con cierta periodicidad, para garantizar las dosis requeridas en la terapia, 6 el método U.V. propuesto puede servir de apoyo ante cualquier incerteza o para comprobar el funcionamiento en condiciones de presión o temperatura particulares. En general un espectrofotómetro es un equipo común en los laboratorios clínicos de los hospitales. Debe tenerse en consideración que para hacer las mediciones el equipo generador debe estar cerca del espectrofotómetro, de manera que entre la toma del gas y la lectura de la absorbancia trascurra el menor tiempo posible. Es también importante que el espectrofotómetro con que se trabaja esté debidamente calibrado.

En la figura 1, se representa la cinética de degradación del ozono. La concentración de ozono llegó a un 50 % de la concentración inicial a los 32 min en las jeringuillas que se colocaron boca arriba y 30 min en las colocadas boca abajo. La concentración se redujo en un 10 % con respecto a la concentración inicial a los 10 min en las que se colocaron boca arriba y 9 min en las colocadas boca abajo. Tanto para los cálculos de degradación de un 50 % o 10% no se encontraron diferencias significativas (p<0,05)entre las dos variantes de posiciones de las jeringuilla usadas.

Las líneas finas representan las rectas de ajuste lineal. Para las jeringuillas posicionadas boca arriba la ecuación de la recta fue: Porcentaje de degradación = 72,44 • Tiempo – 0,703 (r= – 0,979) y para las colocadas boca abajo: Porcentaje de degradación = 70,02 • Tiempo – 0,663 (r= -0,990). Cada punto representa la media de 5 determinaciones con un coeficiente de variación (representado en las líneas de error) inferior al 5%. La densidad del ozono es de 2,14 kg • m-3 (a 273,1 K y 1,103 •105Pa), 7 siendo más denso que el aire que en igualdad de condiciones tiene una densidad de 1,29 kg • m-3. Lo más frecuente en la práctica médica es trabajar con líquidos inyectables. El trabajo con gases que no son visibles al ojo humano implica el conocimiento de otros aspectos como es el caso de la densidad de los gases.

En la práctica, al ser el ozono más denso que el aire, tiende a ocupar la posición inferior. Por tanto, colocar las jeringas con el cono hacia abajo favorece la pérdida de ozono. En el experimento descrito en la figura 1, podemos observar que probablemente al originar el cono de la jeringuilla una reducción del flujo (por ser este muy estrecho, 1,52 mm), no se aprecian diferencias significativas en cuanto a la pérdida del ozono, con relación a la posición en que se coloque la jeringuilla.

Por otra parte, es de destacar que en unos 10 min la dosis presente en la jeringuilla, en las condiciones ambientales de trabajo, se reduce en un 10 % (quedando un 90 % de la dosis inicial). Lo anterior ratifica el hecho de que el ozono se debe aplicar al paciente en un tiempo muy breve, desde el momento en que es generado. 8,9 El presente trabajo muestra cómo de una manera simple y con el empleo de un método espectrofotométrico, se puede controlar la concentración de ozono que emite el generador de uso clínico, en caso de sospechar que no funciona adecuadamente o que no esté correctamente calibrado.

Adicionalmente se demuestra la importancia de usar el gas en los primeros 10 min después de ser generado y que la posición en que se coloca la jeringuilla, aunque si es aconsejado tenerla con el cono hacia arriba, no es determinante en el manejo del gas. Bibliografía. 1. Schwartz A, Martínez-Sánchez G. Ozone Therapy and Its Scientific Foundation. Revista Española de Ozonoterapia 2012; 2(1): 163-198. 2. De Oliveira Magalhaes FN, Dotta L, Sasse A, Teixera MJ, Fonoff ET. Ozone Therapy as a Treatment for Low Back Pain Secondary to Herniated Disc: A Systematic Review and Metaanalysis of Randomized Controlled Trials. Pain Physician 2012 Mar;15(2):E115-29. 3. Steppan J, Meaders T, Muto M, Murphy K J. A meta-analysis of the effectiveness and safety of ozone treatments for herniated lumbar discs. J VascInterv Radiol 2010; 21: 534-548. 4. Delgado, M. Ozone concentration measurements. State of the art. Revista Espanoloa de Ozonoterapia 2001.

 

5. Kerwin Raknessl, Gilbert Gordonz, Bruno Langlaiss, et al. Guideline for Measurement of Ozone Concentration in the Process Gas From an Ozone Generator. Ozone Science and Engineering 1996;18:209-229. 6. Re L, Malcangi G, Martinez-Sanchez G. Medical ozone is now ready for a scientific challenge: current status and future perspectives. J ExpIntegr Med. 2012; 2(3): 193-196. doi:10.5455/jeim.070612.ir.012 7. Menéndez Cepero, Silvia et al. Ozono Aspectos Básicos y Aplicaciones Clínicas. Centro de Investigaciones del Ozono, La Habana, Cuba. Ed. CENIC ISBN 959-7145-06-5. (2008). 8. Achwartz Adriana, Claudia Nikolaevna Kontorschikova, Oleg Vitorovich Malesnoko, Gregorio Martínez Sánchez, Lamberto Re, Irina Avenerovna Gribkova. “Guía para el uso médico del ozono – Fundamentos terapéuticos e indicaciones”, AEPROMO, 2011, 315 p. + XVIII + 11 p. láminas de color. ISBN: 978-84-615-2244-6 9. AEPROMO, Madrid Declaration on Ozone Therapy, in International Meeting of Ozone Therapy Schools, Madrid, Spain, 2010. [Consultado 17/01/2013] http://www.aepromo.org/declaracion_madrid/Declaracion_madrid.pdf

 

Efectos del aceite ozonizado en la Conjuntivitis Hemorrágica Epidémica

Ozone, conjunctivitis hemorrágica epidémica, conjunctiva, Oleozon, aceites ozonizados.

La Conjuntivitis Hemorrágica Epidémica (CHE) es una inflamación conjuntival de etiología viral, autolimitada que afecta a todas las edades y cursa de forma epidémica. Sus síntomas fundamentales son sensación de cuerpo extraño, lagrimeo, fotosensibilidad, malestar general y dolor. Sus signos críticos son hemorragias subconjuntivales, reacción folicular y adenopatías pre auriculares. También se observa secreción serosa, quémosis, queratitis superficial punteada y ptosis palpebral. Teniendo en cuenta el poder germicida de amplio espectro del OLEOZON (aceite de girasol ozonizado), así como su cierto carácter antiinflamatorio, el objetivo de este trabajo fue evaluar la efectividad de este medicamento en su forma de colirio para el tratamiento de la CHE.

En el Hospital Docente ¨Dr Salvador Allende¨ fueron atendidos 20 pacientes con CHE en Octubre del 2009. De ellos 12 recibieron tratamiento con OLEOZON colirio (1 gota dos veces al día) y 8 conformaron el grupo control los cuales recibieron tratamiento convencional (fomentos fríos, antinflamatorios no esteroideos, yodoxuridina en colirio ó interferón alfa-2b recombinante). Todos los pacientes tratados con OLEOZON tuvieron una rápida evolución hacia la curación. A las 72 h mostraban signos de gran mejoría y a la semana estaban totalmente curados. Ninguno de los pacientes presentó complicaciones. En el grupo control la evolución fue más prolongada, fundamentalmente en los pacientes que presentaron complicaciones (3 con queratitis). El tratamiento de la CHE con OLEOZON colirio brinda resultados muy positivos en esta patologia

Clinical experience in the treatment of Epidemic Hemorrhagic Conjunctivitis with OLEOZON collyrium

Ozone, Epidemic Hemorrhagic Conjunctivitis, conjunctiva, OLEOZON, ozonized oil.

Epidemic Hemorrhagic Conjunctivitis (EHC) is a self-limited, conjunctiva inflammation of viral etiology which affects all ages and takes place in epidemic form. Its main symptoms are sensation of foreign bodies, lacrimation, photosensitivity, general discomfort and pain. Its critical signs are subconjunctival hemorrhages, follicular reaction and pre-auricular adenopathy. Also, serous secretion, chemosis, superficial punctate keratitis and palpebral ptosis are observed. Taking into account the broad spectrum germicide power of OLEOZON (ozonized sunflower oil), as well as its degree of anti-inflammatory character, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of this medication in its collyrium form for the treatment of EHC.

In ¨Dr. Salvador Allende¨ Clinical Hospital, 20 patients were treated with EHC in October, 2009. Twelve of them received treatment with OLEOZON collyrium (one drop twice per day) and 8, making up the control group, received conventional treatment (cold compresses, non steroidal antiinflammatory drugs, yodoxuridine in collyrium or recombinant alfa-2b interferon). All patients treated with OLEOZON underwent a fast evolution toward recovery. In 72 h, they showed signs of great improvement and in 1 week they were totally cured. No patients presented complications. In the control group the evolution was more prolonged, mainly in patients showing complications (3 with keratitis). Treatment of EHC with OLEOZON collyrium provides with very positive results in this disease.

Introducción.

La Conjuntivitis Hemorrágica Epidémica es una enfermedad viral, infecciosa muy contagiosa, que presenta frecuentes brotes epidémicos con rápida diseminación entre los colectivos, con períodos cortos de incubación y con evolución aproximada de 10 días. Se reporta su aparición en 1969 en países como Ghana (con el nombre de Apolo 11), en la India, Inglaterra y países asiáticos. En el hemisferio occidental se presentó por vez primera en 1981, y en Cuba en ese mismo año siendo en esta ocasión el Enterovirus 70 el causante. Los virus Enterovirus 70 y Coxackies A-24 son los responsables de millones de casos ocurridos en estos últimos 20 años.

El Coxackies A24 produce un cuadro clínico de moderado a severo, presentando hemorragia subconjuntival solo el 6%. Presenta una recuperación completa de 1 a 2 semanas, teniendo como complicación mas frecuente una sobre infección por bacterias siendo el Staphyloccocus aureus como agente más implicado. En el Enterovirus 70 el cuadro clínico es más aparatoso, apareciendo la hemorragia subconjuntival en el 28 al 100% de los casos. La complicación que más frecuente se presenta en estos pacientes es la Queratitis subepitelial transitoria por invasión del virus a la córnea, cuya recuperación puede ser de 10 días hasta semanas con un tratamento enérgico adecuado para combatir esta complicación.

El cuadro clínico de la conjuntivitis hemorrágica epidémica se caracteriza por edema parpebral, secreciones serosas o mucoides, ocasionalmente sanguinolentas, hemorragia subconjuntival que inicialmente pueden ser petequias confluyendo posteriormente y tomando disposición en forma de sábanas. También pueden presentarse ocasionalmente adenopatías preauriculares. Entre los síntomas presentes están: sensación de arenilla, visión borrosa, dolor ocular y fotofobia y como síntomas generales puede acompañarse de fiebre, malestar general, mialgias y síntomas respiratorios. Los aceites de origen vegetal se han convertido en vehículos adecuados para la terapéutica con ozono. En este sentido el más comúnmente utilizado es el aceite de oliva.

El carácter germicida del aceite de oliva ozonizado fue comprobado utilizando Staphylococcus aureus4 como modelo experimental obteniéndose, después de aproximadamente 13 horas, un 99 % de muerte del microorganismo. Como control se escogió el aceite de oliva no ozonizado y se pudo observar crecimiento significativo en este grupo. Existen otros estudios microbiológicos y químicos sobre el aceite de oliva ozonizado,5,6 así como experiencia en aplicaciones clínicas del mismo en el tratamiento de la vulvovaginitis, impétigo, sinusitis agudas y crónicas, forunculosis, queratosis senil; y en la Medicina Veterinaria por su acción bacteriana, fungicida y virucida.7,8 Al ozonizar los aceites vegetales, se obtiene una serie de compuestos químicos (ácidos, aldehídos, ozónidos y peróxidos) los cuales poseen un carácter germicida haciéndolo útil para el tratamiento de heridas infectadas, fístulas y otros procesos sépticos locales.

Además, estos peróxidos desempeñan varias funciones en el organismo que incluyen:9 estimulación de varios sistemas enzimáticos de óxido-reducción, por lo que influyen positivamente sobre el transporte de oxígeno a los tejidos y en la cadena respiratoria mitocondrial; bloqueo de los receptores virales y muerte de células infectadas por virus, así como un efecto sinérgico de reforzamiento de la capacidad fagocitaria. En el Centro Nacional de Investigaciones Científicas (CNIC) se realizó un estudio sobre la sustitución del aceite de oliva por el aceite de girasol. Ambos aceites ozonizados fueron evaluados por su poder microbicida, utilizando como modelo experimental, el crecimiento de la especie de levadura Cándida tropicalis. Se emplearon como controles los aceites sin ozonizar. Los resultados mostraron la factibilidad del empleo del aceite de girasol con ventajas económicas sobre el aceite de oliva. Además se comprobó que los aceites sin ozonizar no producían inhibición del crecimiento de esta levadura.

10 El aceite de girasol ozonizado (OLEOZON) es un líquido oleoso, algo viscoso, de color amarillo claro y de olor característico, de aspecto lechoso, libre de materiales sólidos. Es una mezcla compleja, fundamentalmente formada por triglicéridos insaturados, triglicéridos modificados con funciones ácidas y aldehídos, hidroperóxidos, ozónidos y agua en emulsión. Además de sus ventajas económicas ha pasado satisfactoriamente pruebas preclínicas de irritabilidad dérmica y oftálmica, estudios de toxicidad aguda, ensayos de mutagenicidad y teratogenicidad,11,12 los cuales garantizan la inocuidad del mismo. También se realizaron estudios in vitro que demostraron la acción antibacteriana del OLEOZON.13

Desde fines de 1986, se vienen realizando diferentes investigaciones sobre las posibilidades terapéuticas del OLEOZON en diversas enfermedades.14-25 El OLEOZON tópico esta registrado en Cuba para el tratamiento de la epidermofitosis y el impétigo26,27 y el OLEOZON oral para la giardiasis.28 Teniendo en cuenta el carácter germicida de los aceites vegetales ozonizados, el objetivo general de este estudio fue evaluar la efectividad del OLEOZON colirio en el tratamiento de la conjuntivitis epidémica y como objetivos específicos los siguientes: 1. Identificar la respuesta al tratamiento de los pacientes tratados con OLEOZON colirio y con tratamiento convencional. 2. Identificar características clínicas basales y evolutivas de los pacientes tratados con OLEOZON colirio y con tratamiento convencional. 3. Evaluar los posibles efectos adversos con la aplicación de ambos tratamientos…

Pacientes y Método.

Se realizó un estudio epidemiológico, observacional, descriptivo, longitudinal y prospectivo en el Centro Oftalmológico Dr. Salvador Allende, La Habana, Cuba, cuyo universo estuvo conformado por la totalidad de los pacientes que acudieron al mismo con diagnóstico confirmado de conjuntivitis hemorrágica epidémica en el período entre septiembre y octubre 111 de 2009. Se seleccionó una muestra aleatorizada de los primeros 20 de estos que cumplían los criterios de inclusión y exclusión. Criterios de inclusión: 1. Pacientes entre 18 y 59 años. 2. Pacientes que en el momento del examen inicial no tenían complicaciones del segmento anterior. 3. Aceptación de participar en el estudio.

Criterios de exclusión: 1. Pacientes con otra enfermedad ocular o sistémica, aguda o crónica. 2. Pacientes con el antecedente de ingestión de drogas antiagregante plaquetaria en a semana anterior a la inclusión. 3. Pacientes con más de 24 horas de instalada la enfermedad. La muestra se conformó de la siguiente manera: Doce pacientes con tratamiento de OLEOZON colirio y fomentos frescos y 8 pacientes con tratamiento convencional (fomentos frescos de suero fisiológico, Yodoxuridina, Tropicamida, Antiinflamatorio no esteroideo cada 8 horas, Interferón Alfa 2B recombinante una gota cada 8 horas. Los pacientes fueron distribuidos en dos grupos de acuerdo a una tabla de números aleatorios, mediante un programa computarizado. Primer grupo: incluyó 12 pacientes que fueron tratados con 2 gotas oculares de OLEOZON, una vez por día, la que se aplicaba por los investigadores, durante 7 días.

Segundo grupo: Incluyó 8 pacientes que fueron tratados con el tratamiento convencional de esta enfermedad, con base en el empleo local de interferón recombinante y sistémico y además antinflamatorios sistémicos no esteroideos durante 7dias. Se tomaron medidas generales como aislamiento del paciente, medidas higiénicas sanitarias y tratamiento sintomático. Se llenaron los documentos de Consentimiento Informado en conformidad al tratamiento y el de enfermedad de Declaración Obligatoria.

Ambos grupos tuvieron seguimiento clínico diario hasta la remisión completa de la enfermedad, con el objetivo de identificar reacciones adversas al tratamiento indicado. Los pacientes tuvieron un seguimiento total de 10 días. Diariamente se le realizaban examen biomicroscópico con lámpara de hendidura para el examen de segmento anterior. El estudio se llevó a cabo siguiendo las recomendaciones recogidas en la Declaración de Helsinski (1964), en la revisión adoptada por la 52ª Asamblea General de Edimburgo, Escocia (octubre de 2000). En todos los casos incluidos en la serie se obtuvo previamente el consentimiento informado de cada paciente.

««Mirta Copello Noblet, Silvia Menéndez, Adriana Schwartz Tapia Revista Española de Ozonoterapia, vol. 2»»

Criterios de Evaluación Nos basamos en cuatro síntomas y un signo los cuales son: edema parpebral, hemorragia subconjuntival, secreciones, adenopatía preauricular y sensación de arenilla.

Edema parpebral: 5 mm (Altura de la hendidura interparpebral) 7mm 10 mm

Hemorragia subconjuntival: Conjuntiva bulbar afectada totalmente (afectación) Conjuntiva bulbar superior Conjuntiva perilímbica

Secreciones: Mucoserosas, Lagrimeo, Ausente.

Adenopatía preauricular: Presente y dolorosa, Presente e indolora Ausente.

Sensación de arenilla: Intensa Moderada, Ausente.

Criterios de mejoría a las 72 horas y a los 7 días

Significativos: Edema parpebral: Mejoría significativa: de 7 a 10 mm Hemorragia subconjuntival : Perilímibica Secreciones: Ausente Adenopatía preauricular: Ausente Sensación de arenilla: Ausente

Bueno: Edema Parpebral: de 4 a 6mm Hemorragia subconjuntival : Conjuntiva bulbar superior Secreciones: Lagrimeo Adenopatía preauricular: Presente e indolora Sensación de arenilla: Moderada.

Regular: Edema Parpebral: de 1 a 3mm Hemorragia subconjuntival : Presencia de inyección ciliar Secreciones: Mucoides Adenopatía preauricular: Presente e indolora Sensación de arenilla: Moderada.

Malo: Edema Parpebral: de 1 a 3mm Presencia de inyección ciliar Secreciones: seromucoides Adenopatía preauricular: Presente y dolorosa Sensación de arenilla: Moderada Dolor intenso.

Efectos adversos. Se consideró el escozor cuando se aplicaban ambos tratamientos, siendo este más acentuado cuando se utilizaba el aceite ozonizado. Lo anterior se debe a que el pH de los colirios es cercanos al pH lagrimal (7,45), mientras que el del aceite ozonizado es ~5. También debido a su carácter oleoso permanece más en contacto con la superficie ocular inflamada. Visión borrosa aproximadamente una hora en aquellos pacientes tratados con Oleozon debido a la presencia de la película oleosa en la superficie corneal.

Mecanismos de acción germicida. El OLEOZON puede atacar grupos sulfhídrilos de hongos y bacterias. Estos grupos sulfhídrilos se encuentran unidos a proteínas, los cuales cuando son atacados por los productos del OLEOZON se oxidan, dañándose la estructura de la proteína ocurriendo su posterior degradación. Si esta proteína se encuentra unida al ADN del agente biológico (bacteria, hongo o virus), este sufre daño, el cual puede ser irreversible. Además, si esta proteína es una enzima vital del germen (hongo, bacteria o virus) se afecta el ciclo de vida del agente biológico y su crecimiento, quedando inhibido o muerto.28-35

Por otra parte, se conoce que el OLEOZON provoca toxicidad sobre el agente biológico, oxidando componentes de membrana, modificando la estructura molecular del receptor por lo que no puede reconocer a la célula a la cual va a parasitar. Ha sido ampliamente publicado que en caso de los virus, que los productos del OLEOZON (ácidos, aldehídos, hidroperóxido, ozónidos) atacan a la N-acetil glicosamida, molécula por la cual varios virus se anclan a la célula, por lo que el virus no puede anclarse a la célula y la inhibe.28-35

De forma general los aceites vegetales ozonizados tienen efectos in vitro ya estudiados y publicados que aportan un posible mecanismo germicida directo, sobre agentes biológico (hongos, virus, bacterias) estos son:36-38 1-Oxidación directa de biomoleculas presentes en membranas, capside, etc. 2-Degradación del ADN (bacteriano, fúngico y posiblemente viral). 3- Ataque directo a grupos sulfhídrilos presentes en proteínas de membranas, asociadas al ADN, o formadoras de canales de sodio y/o potasio. 4- Los compuestos presentes en los aceites ozonizados provocan un ambiente de estrés oxidativas para los agentes biológicos (virus, bacterias, protozoo, hongos) .Dicho ambiente no es soportado por estos agentes ya que los mismos no cuentan con una capacidad antioxidante, por lo que se inhiben deteniéndose su crecimiento y a veces mueren.

Conclusiones. Debido al gran carácter germicida del OLEOZON colirio se logró una evolución más rápida hacia la curación en los pacientes aqejados de la conjuntivitis Hemorrágica Epidémica comparado con el Grupo control.

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Effect of ozone therapy on redox status in experimentally induced arthritis

M.Nabil.Mawsouf Ozone Therapy Unit, National Cancer Institute, Cairo University, Egypt Maha.M. El-Sawalhi, Hebatalla A. Darwish, Amira A. Shaheen Biochemistry Department, Faculty of Pharmacy, Cairo University, Egypt G. Martínez-Sánchez CEIEB-IFAL, University of Havana, Cuba Lamberto Re Pharmacology, D.I.S.M.A.R., University of Ancona, Italy.

Abstract:

Controlled ozone administration has been shown to promote an adaptation to oxidative stress by increasing endogenous antioxidant systems. In the present study, the effects of O2/O3 administration either prophylactically or therapeutically on the alterations of oxidant status in adjuvant-induced arthritis in rats have been studied. Seven groups
of rats were used: 1) normal control group; 2) control arthritic group (21 days); 3) prophylactic ozone group: arthritic rats received fifteen intra-rectal applications of O2/O3 at 0.5, 0.7 and 1 mg/kg b.w.

in a 5-6 mL volume starting one day before adjuvant inoculation and continued as five applications/week over 21 days; 4) oxygen group: received oxygen (vehicle of ozone) in a similar schedule to group 3; 5) control arthritic group (24 days); 6) therapeutic-ozone group: arthritic rats received 10 intra-rectal applications of O2/O3 at 0.5, 0.7 and 1 mg/kg b. w. in a 5-6 mL volume daily for 10 days
starting fourteen days after adjuvant inoculation; 7) oxygen-treated group: received oxygen in a similar schedule of group 6. The effect of O2/O3 administration was assessed by measuring: blood glutathione (GSH), erythrocyte glutathione peroxidase and catalase activities, serum levels of protein thiols (PrSH), malondialdehyde (MDA)

and nitrite/nitrate (NO2/NO3), as well as serum ceruloplasmin activity (CP). The pres
ent study showed that adjuvant-induced arthritis in rats caused a significant (p0.05)

reduction in blood GSH, serum PrSH levels and erythrocyte antioxidant enzyme ac-

tivities accompanied by a significant (p0.05) increase in serum levels of MDA,

NO2/NO3 and CP activity. Ozone administration either prophylactically or therapeuti-

cally normalize blood GSH, serum PrSH and MDA levels and restored erythrocyte na-

tioxidant enzyme activities. However ozone did not significantly (p>0.05) modify sérum

NO2/NO3 level in induced rat but significant (p>0.05) increase CP activity. So it could

be concluded that O2/O3 oxidative preconditioning / postconditioning effectively mod-

ulate the antioxidant/oxidant balance associated with adjuvant arthritis model in rats.

Sugerencia sobre cómo citar este artículo: M.Nabil.Mawsouf, Maha.M. El-Sawalhi, G. Martínez-Sánchez, Hebatalla A. Darwish and Amira A. Shaheen, L. Re. (2011). Effect of ozone therapy on redox status in experimentally induced arthritis. Revista Española de Ozonoterapia. Vol.1, nº 1, pp. 32-43.

Introduction:

Ozone therapy as a complementary medical approach has been known for more than four decades. The main areas where that kind of treatment could be useful include resistant infectious diseases, autoimmune diseases, neurodegenerative diseases, orthopedic pathologies and vascular disorders1 . With the advent of precise medical ozone generator, currently ozone therapy have been marked with growing recognition of the use of appropriate and judicious doses making this therapy useful with valuable biological effects2. The use of calculated, standardized ozone doses has been found to induce a transient acute oxidative stress condition which is not deleterious but is capable of eliciting a multiple useful biological responses. The effect could be seen in activation of antioxidant defense system, improvement of circulation, oxygen delivery, and trophic processes in tissues as well as enhancement of autocoids, growth factors and cytokine release3.

Several experimental studies have demonstrated that controlled ozone administration could bring about a state of ozone oxidative preconditioning (O3OP) or adaptation to oxidative stress, preventing the damage caused by reactive oxygen species (ROS) generated in various experimental models. These include; carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity4, hepatic ischemia-reperfusion injury5, cisplatin-induced acute renal failure6 , chronic renal failure induced by subtotal nephrectomy7 and streptozotocin-induced diabetes in rats8. More recently is also demonstrated that the oxidative postconditioning can be cytoprotective in different experimental model of diseases9 , 10 . Experimental arthritis induced by adjuvant is an experimental model of systemic inflammatory autoimmune disease that shares many features with human rheumatoid arthritis. It involves most of the joints and associated tissues11 .

Although the etiology of rheumatoid arthritis is not fully elucidated, autoimmune destruction of the affected tissues plays a pivotal role in the incidence and progression of the diseases12. In addition excessive generation of free radicals and formation of lipid peroxide in target tissues of inflammation are, also, considered as the most common factors implicated in tissue damage in rheumatoid arthritis13 and experimental arthritis14 . Thus, a state of oxidative preconditioning such that achieved with controlled ozone therapy may potentially be able to readjust the redox imbalance in adjuvant arthritis and attenuate the progression of the disease. The aim of the current work was to investigate the role of ozone, as prophylactic or therapeutic agent, in correcting the redox imbalance and the biochemical changes associated with adjuvant-induced arthritis in rats.

Materials and Methods:

Animals: Adult male albino rats of Wistar strain, 200-250 g weight were obtained from Egyptian Organization for Biological Products and Vaccines (Cairo, Egypt). Rats were housed in plexiglass cages, maintained in an air-filtered and temperature-conditioned (20 oC – 22 oC) room with a relative humidity of 50 % – 52 % and under an artificial light/dark cycle of 12 h. Animals were fed with standard laboratory chow and water ad libitum. Procedures involving animals and their care were conducted in conformity with the institutional guidelines that are in compliance with national and international (EEC Council Directive 86/ 609, OJL 358, 1, 12 December 1987;

Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, US National Research Council, 1996) laws and policies. Chemicals: Complete Freund`s adjuvant (Difco laboratories, Detroit, USA) was used for induction of arthritis in rats. It consists of 0.05% heat killed Mycobacterium butyricum suspended in mineral oil. All other chemicals were of analytical pure grade supplied from Sigma-Aldrich St. Louis (USA). Ozone generation: Ozone was generated just before applied by ozone generator system [EXT120-T] (Longevity-resovces Inc., Canada – ETL approved for proven quality and safety). Ozone obtained from 34 Revista Española de Ozonoterapia, vol. 1, nº 1. pp. 32-43, 2011 Effect of ozone therapy on redox status in experimentally induced arthritis. medical grade oxygen represented about 0.4-0.5 % (1 µg/mL – 120 µg/mL) of the gas mixture. The ozone concentration was measured by using a build-in UV spectrophotometer at 254 nm.

Experimental design:

Induction of adjuvant arthritis: It was induced in rats by a single subcutaneous injection of 0.25 mL of complete Freund`s adjuvant into the palmer surface of the right hind foot pad15. The peak of adjuvant polyarthritis was reached after 14 days from adjuvant inoculation.

Ozone treatment :

Ozone was given by intra-rectal application using 20 mL silicone-coated disposable syringe and rectal catheter. Fixed volumes of the O3/O2 mixture were administered according to the animal weight so as to reach a final O3 dose. This route of administration was considered as most useful and easy procedure in rats16.

For studying the prophylactic or therapeutic effects of ozone on the adjuvant arthritis model, the arthritic rats were divided equally into six groups of eight rats each. The first (prophylactic O3/O2 group) received 15 intra-rectal applications of O3/O2 over three weeks starting one day before adjuvant inoculation. O3/O2 mixture was given as five applications per week. It was started with a relatively low dose of ozone as 0.5 mg/kg b.w. /day in the first week, increased to 0.7 mg/kg b.w./day in the second week and ended with 1 mg/kg b. w./day in the third week. The volume of O3/O2 mixture administered was 5-6 mL/rat according to the animal weight.

The second arthritic group received oxygen only (as a vehicle for ozone) in a similar schedule to the first group. The third group of arthritic rats was kept without treatment throughout 21 days and served as a control (arthritic 21 days) for the above two groups. The fourth arthritic group (therapeutic ozone group) received 10 intra-rectal applications of O3/O2 mixture starting fourteen days after adjuvant inoculation.

The treatment was started by a daily dose of 0.5 mg/kg b.w. for 3 days, followed by 0.7 mg/kg b.w. for another 3 days and ended with one mg/kg b.w. for 4 days. The volume of O3/O2 mixture administered was 5-6 mL/rat according to the animal weight. The fifth arthritic group received oxygen only 14 days after adjuvant inoculation in a similar way to the fourth group. The sixth arthritic group was kept without treatment throughout 24 days and served as a control (arthritic 24 days) for the fourth and fifth groups. A group of normal rats left without any treatment and served as a control (non arthritic) group for all the above groups. All the groups were kept under the same conditions during the whole experiment.

At the end of the experimental periods, the animals were sacrificed and the blood was collected in heparinized and non-heparinized tubes, an aliquot of heparinized blood was used to assay glutathione (GSH)17. Another aliquot of heparinized blood was lysed directly in ice cold distilled water (5% v/v) and used for the determination of catalase activity (CAT; EC 1.11.1.6)18. The remaining heparinized blood was centrifuged for 10 min at 3000 g for the separation of red cells used to measure the glutathione peroxidase activity (GPx; EC 1.11.1.9)19. On the other hand the non-heparinized blood was allowed to clot and the separated serum were used for the estimation of malondialdehyde (MDA)20, 21; protein thiols (PrSH)22 and nitrite/nitrate (NO2/NO3) levels23 as well as ceruloplasmin (CP) activity24.

Statistical:

Analysis Initially the OUTLIERS preliminary test for detection of error values was applied as a first step in the statistical analysis. After this, the homogeneity of variance test (Bartlett-Box) was used. Values are given as means ± SD. The level of statistical significance was taken at p

Results:

Blood antioxidant levels in arthritic rats subjected to prophylactic and therapeutic intra-rectal application of ozone: The results for these parameters are shown in table 1 and 2. Data demonstrated that 21 or 24 days after adjuvant inoculation, arthritic rats exhibited a significantt (p<0.05) reduction in blood GSH and serum PrSH levels. The reduction was extended, also, to include GPx and CAT activities as compared to the normal values.

Intra-rectal application of O3/O2 as prophylactic therapy (table1), caused a significant (p<0.05) elevation in blood GSH, serum PrSH, erythrocyte GPx and CAT activities as compared to the values present in arthritic animals. In the same way, therapeutic intra-rectal application of O3/O2 mixture (table 2) successfully restored these blood antioxidants to levels approaching or exceeding the normal values.

Serum levels of MDA and NO2/NO3 as well as CP activity in arthritic rats subjected to prophylactic or therapeutic intra-rectal application of ozone: As indicated in table 3 and 4,

adjuvant-induce arthritis caused a significant (p<0.05) increase in serum levels of MDA, NO2/NO3 and CP activity after both 21 or 24 days of adjuvant inoculation.

These data, demonstrated that prophylactic intra-rectal application of

O3/O2 mixture (table 3) normalize serum MDA

level of arthritic induced rats,

but failed to exert any change in serum NO2/NO3 level of these rats. Meanwhile,

O3/O2 pretreatment provided a further elevation of serum CP activity to a level exceeding the arthritic values. Therapeutic intra-rectal application of O3/O2 mixture (table 4) caused a significant (p<0.05) reduction in serum MDA level to approach the normal value, together with further elevation of CP activity than the arthritic levels. Meanwhile serum NO2/NO3 of arthritic rats was not significantly changed in response ozone treatment.

The results clearly showed that intra-rectal application of O2 (as a vehicle of O3) in prophylactic and therapeutic treatment did not affect any of the measured parameters compared to the values of arthritic rats.

Discussion:

The involvement of ROS in chronic inflammatory conditions such as rheumatoid arthritis and adjuvant induced-arthritis is well documented. ROS once generated provoke deleterious effects on various cellular components, among which are membrane lipids that are extensively subjected to peroxidation. Aggravation of arthritis was reported to be associated with enhancement of lipid peroxidation25.

In the present study, overproduction of ROS in adjuvant arthritis model leads to a considerable oxidant stress as indicated by a high serum level of MDA, a marker of lipid peroxidation, as well as consumption of blood antioxidants such as GSH and PrSH. The marked increase in serum MDA was observed in arthritic rats in line with our results; in arthritic rats model 26-28, and in rheumatoid arthritis patients29. Increased lipid peroxide in arthritic rats is exacerbated by the decline in blood antioxidants. Similar results about GSH were reported in arthritic rats model and rheumatoid arthritis patients respectively30, 31.

In the same line, a marked decrease in GSH concentration was observed in the joint articular cartilage of arthritic rats32 . The reduction of GSH might be attributed to the increased consumption for counteracting oxidative stress during inflammation. Increased oxidative stress was reported to enhance the formation and efflux of glutathione disulfides33. Moreover, the observed reduction in serum PrSH is in line with previous studies30, 34. Such reduction could be attributed to the excessive consumption by peroxide35 and/or to a low serum albumin reported in other studies, since the greatest majority of serum SH (85- 90%) are found in albumin36.

In the current investigation, the decline in blood antioxidants was, also, extended to include erythrocyte GPx and CAT activities. The observation is consistent with previous manuscript 26 , 27 .Adefective antioxidant enzyme machinery had been observed in erythrocytes of rheumatoid arthritis patients37 and in liver, kidney and heart of adjuvant arthritic rats38. The increased production of superoxide anion, H2O2 and hydroxyl radicals demonstrated by Ramprasath et al. (2005)39 might be responsible for inhibition of GPx and CAT activities.

The role of NO and other reactive nitrogen species in inflammation has not been conclusively established. However, evidences for the implication of NO in the process of inflammation and that NOS inhibitors possess potential-anti inflammatory effects have been presented.

The present results revealed a significant (p<0.05) ) increase in serum NO level in arthritic rats (measured as total NO2/NO3). Such result is in line with previous reports27, 41 in arthritic rats and in rheumatoid arthritis patients42. The over expression of iNOS in arthritis might result from increased production of IL- 1 and other pro-inflammatory cytokines characteristic of that disease40.

Moreover, a major systemic event that happens in the rat following the induction of inflammation is the marked change in the level of serum CP, an acute phase protein43 . In the present study, a marked elevation in serum CP activity was observed. Such elevation is consistent with previous observations30 , 34 in arthritic rats. The increase in serum CP activity might be due to increase in its hepatic synthesis triggered by increased secretion of IL-1, epinephrine and glucocorticoids44. Furthermore, such an increase in CP activity has been reported to have a role in down regulating the inflammatory mediators and inhibiting the lipid peroxidation43.

In the present study, prophylactic intra-rectal application of O2/O3 to arthritic rats over three weeks exerted protective effects on some important blood antioxidants (GSH, PrSH, GPx and CAT) and preserved them to pre-arthritic values (table 1). The present data, demonstrated that therapeutic intra-rectal application of O2/O3 for 10 days after development of adjuvant arthritis attenuated the reduction in blood antioxidants and restored the levels of these defense constituents to values close to or above the normal ones (table 2).

Moreover, these stimulant effects of O2/O3 therapy on blood antioxidants were accompanied by a decrease in serum MDA level to reach the normal levels (tables 3 and 4). These positive experimental observations could be explained at the light of the ozone abilities to up-regulate the antioxidant system, a state reached under controlled use of O2/O345. Ozone post or preconditioning is analogous to other phenomena such as ischemic preconditioning46, thermal preconditioning47, chemical preconditioning48, ischemic protconditioning10, 49. All of these processes have in common that a repeated and controlled stress is able to provide protection against a prolonged and severe stress.

A point that should not be overlooked is that O3 adaptation caused by judicious use of O3 is due to the fact that O3, instantaneously reacts with biomolecules generating ROS, among which are H2O2 and lipid peroxidation products (LOP). These molecules can elicit the up-regulation of antioxidant enzymes such as SOD, GPx, GSH-reductase and CAT. In bone marrow cells, particularly during erythrogenesis, submicromolar concentrations of LOP can up-regulate the synthesis of antioxidant enzymes2 . Interestingly, Iles and Liu50 have demonstrated that some LOP by inducing the expression of glutamate cysteine ligase cause an intracellular increase of GSH. These aforementioned findings might account for the generation of biochemically improved erythrocytes during prolonged O3 therapy. Erythrocytes have been shown to respond to O3 therapy with activation of glycolysis and pentose phosphate pathway51.

In the current study, up-regulation of erythrocytes GPx and CAT by O2/O3 might be responsible for the preservation of blood GSH and serum PrSH from oxidation by ROS in arthritic rats. Furthermore, the reported activation of pentose phosphate pathway might play a role in restoring GSH level from its oxidized form.

On the other hand, prophylactic and therapeutic rectal applications of O2/O3 therapy provided further elevation of serum CP activity than the arthritic levels (tables 3 and 4). That effect could be explained on the basis that O3 acts as a mild enhancer of immune system through activation of gene/regulatory nuclear factor kappa B (NF-κB) by H2O2, one of the major decomposition products of O3. Activation of that transcription factor switches on some genes that are responsible for the synthesis of several proteins, among which are the acute phase reactants and numerous interleukins52. The increased CP activity might reflect improved antioxidant status of animals subjected to O3 therapy. Moreover, O3-induced increase in CP activity could be beneficial to prevent against oxidative stress observed in adjuvantinduced arthritic rats.

In the present study, the remarkable enhancement of antioxidant status of arthritic rats has provided a protection against ROS and suppressed the process of lipid peroxidation leading to normalization of serum MDA level. Another point which should be considered in is the inability of O3 therapy to change the serum level of NO than was raised the arthritic induced rats; such effect might be related to the stimulatory effect of O3 on blood GSH. It has been stated that NO readily reacts with GSH and other cysteine containing compounds forming S-nitrosothiols with half lives of 5-50 min, in contrast to the very short half-life of NO53. Thus, formation of S-nitrosothiols in response to O3 therapy may allow more pharmacological effects at distant sites.

Conclusions It can be concluded that O2/O3 pre or postconditioning effectively improved the antioxidant/oxidant imbalance associated with adjuvant arthritis in rats. These results potentially support the use of ozone therapy as a complementary medical approach in rheumatoid arthritis. However, further studies are needed to verify the benefit of O3 therapy in rheumatoid arthritis at biochemical and clinical levels.

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Factores de crecimiento derivados de plaquetas y sus aplicaciones en medicina regenerativa. Potencialidades del uso del ozono como activador.

Growth factors derived from platelet and its applications in regenerative medicine. Potential use of ozone as activator

Abstract:

A newer treatment, autologous platelet-rich plasma (PRP), represents a greater similarity to the natural healing process as a composite of multiple growth factors, is safe due to its autologous nature, and is produced as needed from patient blood. PPR is an concentration of platelets and growth factors, including transforming growth factor-beta (TGF-b), vascular endothelial growth factor (VEGF), and platelet derived growth factor (PDGF). The enhancement of tissue healing by the placement of supraphysiologic concentration of autologous platelets at the Site of tissue injury or surgery is supported by basic science and clinical studies.

Due to the increased concentration and release of these factors, PPR can potentially enhance the recruitment and proliferation of stem cells and endothelial cells. Ozone can promote platelet aggregation and release of grow factors with both mitogenic and chemotactic properties. In addition to use in the treatment of chronic skin and soft tissue ulcerations, application of this method include periodontal and oral surgery, maxillofacial surgery, orthopedic and trauma surgery, cosmetic and plastic surgery, spinal surgery, heart bypass surgery, and burns. A better understanding of platelet function and appropriate clinical use is essential in achieving the desired outcomes of platelet-rich concentrate in clinical applications.

Resumen:
Los tratamientos que emplean el plasma autólogo rico en plaqueta (PRP) mimetizan los eventos que se suceden durante el proceso fisiológico de cicatrización debido a la liberación de diversos factores de crecimiento. Al ser autólogo, la seguridad del procedimiento es alta y la cantidad requerida se obtiene de la sangre del propio paciente. El PRP es un concentrado de plaquetas y factores de crecimiento que incluye: el factor transformante beta (TGF-b), factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) y el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) entre otros.

La potenciación del mecanismo de cicatrización inducido por concentraciones supra-fisiológicas de plaquetas autólogas en el tejido dañado o zona quirúrgica ha sido demostrado tanto es estudios básicos como clínicos. Debido a la alta concentración y liberación de estos factores, PRP pueden potencialmente incrementar el reclutamiento y proliferación de células madres y endoteliales. El ozono promueve la agregación plaquetaria y la liberación de factores con propiedades mitogénicas y quimiotácticas. Además de ser útil en el tratamiento de úlceras crónicas y de tejidos blandos, otras aplicaciones de este método involucran: cirugía oral y periodontal, cirugía maxilofacial, cirugía ortopédica y traumatología, cirugía plástica y cosmética, cirugía de columna, cirugía cardiovascular y quemaduras. Un conocimiento más profundo de las funciones plaquetarias y su empleo apropiado desde el punto de vista clínico es fundamental para arribar a un uso óptimo desde el punto de vista terapéutico.

Introducción:

El primer factor de crecimiento fue descubierto por la neurofisióloga italiano-judía Rita Levi en 1948 quien comparte el premio Nobel de medicina junto a Stanley Cohen en 1986. Fue denominado Factor de Crecimiento Nervioso (NFG). Desde 1990 se conoce que la regeneración de tejidos blandos, heridas y huesos depende de la acción de diferentes componentes sanguíneos (fibrina, fibronectina, factores de crecimiento entre otros) y que su presencia en elevadas concentraciones puede alterar o acelerar este proceso. 6

El uso de concentrados de plaquetas para acelerar el proceso de cicatrización fue descrito por primera vez en 1997. 7 Las plaquetas contienen grandes cantidades de factores de crecimiento que tiene un papel trascendental en el proceso de cicatrización, como el factor de crecimiento derivado de plaquetas AB (PDGF-AB), el factor de crecimiento trasformador beta (TGF-b) y el factor de crecimiento vascular (VEGF) entre otros que son capaces de estimular la proliferación celular, la quimiotaxis, la remodelación de la matriz extracelular y la angiogénesis.

Las plaquetas son principalmente conocidas por su papel en el proceso de hemostasia en el cual contribuyen a evitar la pérdida de sangre en las zonas vasculares heridas. Para llevarlo a cabo, las plaquetas se adhieren, se agregan y forman una superficie pro-coagulante, que provoca la generación de trombina y la formación de fibrina. La formación de un hematoma o un coagulo inicia la cascada de cicatrización.

La formación de un coagulo puede iniciarse por una ruta intrínseca o extrínseca. La vía intrínseca se activa por un daño o alteración de la propia sangre, mientras que la vía extrínseca se inicia cuando la sangre entra en contacto con factores ajenos a la sangre (e.j. tejidos dañados). Ambas rutas involucran una cascada de eventos, que aunque se inician de manera diversa, tienen puntos de convergencia en las etapas finales. Las plaquetas son las células liberadoras de las proteínas esenciales y necesarias en la ruta de la formación del coagulo.

El Plasma Rico en Plaquetas (PRP) se define como la porción de la fracción de plasma de sangre autóloga que tiene una concentración de plaquetas superior al valor basal. 13 El PRP no solo contiene plaquetas, sino que además está formado por: plasma, leucocitos, factores de crecimiento, proteínas de secreción y todos los componentes de la cascada de coagulación.

El ozono promueve la agregación plaquetaria y la liberación de factores de crecimiento provenientes de las plaquetas. 14,15 La activación de plaquetas con ozono puede ser útil en el tratamiento de úlceras crónicas y de tejidos blandos, la cirugía oral y periodontal, cirugía maxilofacial, cirugía ortopédica y traumatología, cirugía plástica y cosmética, cirugía de columna, cirugía cardiovascular y quemaduras. El presente trabajo tuvo como objetivo hacer una revisión de los antecedentes, estado actual y perspectivas de los tratamientos basados en el uso de PRP, además de los distintos protocolos que aplican PRP activados con ozono.

Materiales y Métodos:

La búsqueda y localización de la información, incluyó una revisión de artículos científicos en la base de datos MEDLINE, entre los años 2000-2011, para lo cual se utilizaron en lo fundamental los descriptores siguientes: ozono, plasma rico en plaquetas, plaquetas y factores de crecimiento derivados de plaquetas. Se localizaron y analizaron las fuentes de información primaria (artículos originales). La búsqueda bibliográfica incluyó artículos científicos de revisión y de resultados experimentales.

Aspectos estructurales de las plaquetas Las plaquetas:

Son células sanguíneas que proceden del megacariocito, célula que prolifera y madura en la médula ósea bajo la influencia de la trombopoyetina. La fragmentación de su citoplasma da nacimiento, a nivel del seno vascular a las plaquetas, que son células que carecen de núcleo y no pueden replicarse. Circulan en la sangre en forma de disco biconvexo (discocitos) de aproximadamente 3 mm2 de diámetro, 4 – 7 mm3 de volumen y 10 pg de peso. Poseen carga eléctrica negativa en su superficie. Su concentración normal en la sangre es de 150 •106/mL a 350•106/mL y su tiempo de vida media en sangre es de 5 a 10 días.

La membrana externa constituye una bicapa lipoproteica con glicoproteínas que funcionan como receptores de los agonistas fisiológicos de las plaquetas (ADP, TXA2, trombina), proteínas de adhesión (fibrinógeno, fibronectina, laminina, trombospondina, vitronectina, factor de von Willebrand [vWF]) y para ligandos fibrosos como el colágeno, además, posee enzimas importantes para el funcionamiento celular y fosfolípidos. Es responsable de la interacción de la célula con el medio circundante a través de receptores entre las que figuran las integrinas las cuales se caracterizan por enlazarse a proteínas que tienen la secuencia arginina-glicina-aspartato (e.j: fibrinógeno, fibronectina, vitronectina, factor de von Willebrand, colágeno).

Las integrinas más estudiadas han sido GPIIb/IIIa y la GPIb/IX. La GPIIb/IIIa ocupa una gran proporción de la superficie plaquetaria (~15 % de la proteína total de la membrana y 3 % de la célula). Hay de 3 a 8 réplicas en la plaqueta en reposo. Es un heterodímero de 228 kDa, dependiente de calcio, cuyas subunidades a y b son codificadas por genes diferentes. La mayor proporción de esta glicoproteína es extracelular y dispone de 2 segmentos transmembrana y 2 cortos segmentos citoplasmáticos formados por los extremos C terminales. En la plaqueta en reposo se halla en forma de monómero, ya que la asociación de las subunidades requieren calcio extracelular, que se enlaza a la subunidad IIb.

La GP Ib/IX es un heterodímero formado por la asociación de las GP Ib y IX. La GPIb consta de una cadena a y una b enlazadas por puentes disulfuro. Tiene regiones extracelulares (~40 nm), que garantizan la interacción con los ligandos vWF y trombina), submembrana y citoplasmáticos, que actúan como anclaje del complejo a la célula. Esta glicoproteína es rica en leucina. Después de la GPIIb/IIIa es la mayoritaria en la membrana de la plaqueta (1 – 3 •104 moléculas /plaqueta).

Las subunidades GP1 a y b y la GPIX son codificadas por genes diferentes, localizados en cromosomas diferentes. La región extracelular posee los dominios de identificación de la trombina y el vWF. Las diferentes porciones de este complejo tienen una función: la región extracelular facilita el acceso al subendotelio y la interacción con trombina y vWF; la región intracitoplasmática une los dominios funcionales extraplaquetarios con el citoesqueleto de actina; la región transmembrana actúa como anclaje de la glicoroteína en la membrana plaquetaria.

El citoplasma contiene partículas de glucógeno diseminadas o aglomeradas que constituyen la fuente energética de esta célula. Contiene ribosomas en muy pocas cantidades, fundamentalmente en las células jóvenes, lo que concuerda con la casi nula actividad de síntesis proteica. Soporta, además, los microtúbulos que aparecen en forma de circunferencia, ubicados de manera concéntrica y que mantienen la forma discoide de la célula y garantizan su resistencia a la deformación.
El citoesqueleto es un gel viscoelástico que contiene filamentos de actina entrecruzados, conectados a la GPIb por proteínas de unión de actina. Tiene como funciones: a) la regulación de las propiedades de la membrana, tales como sus contornos y estabilidad, junto a los microtúbulos propicia el mantenimiento de la forma de la plaqueta en reposo, b) mediación de la distribución lateral de las glicoproteínas receptoras en la membrana, c) constituyen una barrera para la exocitosis.

Su alteración puede llevar a la fragmentación del citoplasma formando micropartículas.
El gel contractil está formado por largos filamentos de actina enrejados, conectados con el citoesqueleto submembranoso y miosina que se encuentra en forma no polimérica en la célula en reposo. Constituye el cuerpo de los organelos celulares, los cuales se desplazan hacia el centro de la célula a consecuencia de la contracción del gel.
El sistema canalicular abierto está formado por canales ramificados, se conecta a la membrana externa y posee características similares a ella en cuanto a su composición. Através de este sistema se transportan las GPIIb/IIIa y la GP1b hacia los gránulos alfa.

El sistema tubular denso es un sistema de membranas que aparece en la vecindad de los microtúbulos y rodea los organelos, con apariencia, y funciones similares a las del retículo endoplásmico liso de otras células. Regula la activación plaquetaria mediante el secuestro o liberación de calcio, de forma similar a los túbulos del músculo esquelético y por un mecanismo más rápido que el de las mitocondrias. También posee ATPasas, enzimas del metabolismo del ácido araquidónico y adenilato ciclasa. Las plaquetas poseen organelos inespecíficos, como mitocondrias, lisosomas y peroxisomas, que tienen características y funciones similares a los de otras células pero, además, portan organelos específicos, que son los gránulos alfa y los gránulos densos.

Los gránulos alfa son organelos esféricos de 140 nm a 400 nm en diámetro, contienen más de 30 proteínas bioactivas (Tabla 1).9 Constituyen un 15 % del volumen total de las células. Sus membranas contienen GPIIb/IIIa, pequeñas cantidades de GPIb, GPIX y P selectina. Tienen una importante participación en el funcionamiento celular, al propiciar la interacción entre plaquetas, de ahí que la cantidad de gránulos alfa (como promedio 35-40) determina el valor funcional de la célula. También participan en la interacción con otras células a través de la liberación de su contenido.

Aspectos fisiológicos de las plaquetas:
Las plaquetas se caracterizan por un elevado consumo de oxígeno, es 6 veces superior al de las células musculares en reposo. La fuente de energía es la glucosa. Incorporan a su interior (por un mecanismo independiente de energía) fragmentos de membrana que contienen GPIIb/IIIa y también fibrinógeno y (por un mecanismo dependiente de energía) fragmentos de membrana que contienen GPIb, esto permite la regeneración de los receptores de membrana.
Estas células concentran la mayoría de la serotonina de la sangre la cual toman unida a calcio mediante transporte activo. También toman del plasma ligandos como fibrinógeno, colágeno, fibronectina y aminas biógenas.
Activación plaquetaria. La participación de las plaquetas en los procesos de hemostasia y trombosis depende de la ocurrencia de 3 eventos: el enlace plaqueta – superficie o adhesión plaquetaria; el cambio de forma y el enlace plaqueta-plaqueta o agregación plaquetaria.

Adhesión plaquetaria: Las plaquetas son capaces de adherirse a superficies artificiales, sobre las cuales se expanden. Utilizan como ligando al fibrinógeno, a través de su unión a GPIIb/IIIa. También se adhieren al colágeno (fundamentalmente de los tipos I y III), vWF, fibronectina y laminina. En condiciones de bajo flujo sanguíneo, este evento es mediado por la interacción VWF-GPIb, pero en condiciones de alto flujo también se requiere la participación de GPIIb/IIIa. Se forman enlaces firmes que dependen de la estructura fibrilar del colágeno y de la cantidad de subunidades RGD. La adhesión plaquetaria al colágeno requiere de la interacción del colágeno con vWF del plasma, GPIb, GPIaIIa de la membrana de la plaqueta que durante la formación del coágulo establecen enlaces plaqueta-fibrina. Se produce la internalización de las mallas de fibrina o de colágeno, que son rodeados de microfilamentos.

Cambio de forma: La primera manifestación física de la activación plaquetaria es el cambio de forma de discocito a esferocito, que se acompaña de un incremento en la superficie desde 8,02 mm2 (en la plaqueta en reposo) a 13,0 mm2 (en la plaqueta activada). Disminuye la longitud del subesqueleto submembrana cuya evaginación aporta membranas para este processo.

Se produce la redistribución de los microtúbulos, lo que le confiere la característica de deformabilidad celular y la posibilidad de emitir seudópodos. Los microtúbulos que están en estrecho contacto con el gel contráctil, se trasladan hacia el centro de la célula. Se procede a la desintegración del citoesqueleto y se restituye a partir de la internalización de fragmentos de la membrana externa. Es un proceso independiente de calcio (cuando el estímulo es el ADP) y dependiente de energía.

Agregación plaquetaria. Los estímulos fisiológicos para la activación plaquetaria son la trombina, el colágeno, el ADP, la epinefrina, el tromboxano A2 (TXA2). Los eventos posteriores tienen elementos comunes y otros que lo diferencian. En el caso de la trombina, el ADP y el TXA2, se trata de receptores acoplados a proteínas de unión a nucleótidos de guanina (proteínas G). El de trombina es una glicoproteína con 7 dominios transmembrana, de la cual hay de 1 500 a 2 000 copias que se desensibilizan rápidamente al producirse la activación las cuales no son recuperables. El receptor del ADP es purinérgico, él se caracteriza por responder con activación frente al ADP y con inhibición frente al ATP. Su estructura no ha sido identificada y por mucho tiempo se ha denominado farmacológicamente como receptor P2T.

Sin embargo, algunas evidencias experimentales recientes, sugieren que se trata de 3 receptores, uno P2Y1, igual al que media la vasodilatación y que es causante del aumento del calcio citoplasmático, el cambio de forma y la agregación plaquetaria, otro P2Y1 cyc, que media la inhibición de la adenilciclasa y uno P2X1 (no acoplado a proteína G) con una menor significación.
Se plantea que al menos una glicoproteína, la GPVI, actúa como receptor para la fase de activación inducida por el colágeno y que su estimulación es una señal para una fosfolipasa C. Un evento que sigue a la activación es el incremento de la concentración de calcio citoplasmática, cuyo mecanismo bioquímico no ha sido determinado totalmente en la mayoría de los casos.

Con respecto a la trombina, el colágeno y el TXA2, se ha demostrado la ocurrencia de activación de la fosfolipasa C, que da lugar a la formación de 1,4,5 trifosfato de inositol (que libera calcio del sistema tubular denso y activa una miosina cinasa) y 1,2 diacilglicerol (que activa la proteína cinasa C, que desencadena una serie de fosforilaciones de proteínas que parecen importantes para el proceso de agregación plaquetaria). En el caso del TXA2 se cree que también hay entrada a la célula del calcio extracelular a través de una intensificación del intercambio Na+/H+ de lo cual depende más de la mitad del incremento del calcio citoplasmático.

La trombina, el ADP y la epinefrina inducen inhibición de la actividad adenilciclasa en la plaqueta, cuya implicación en el resultado final no está bien determinado. Se desconocen los mecanismos bioquímicos que llevan a la activación de la GPIIb/IIIa y el enlace del fibrinógeno, pero hay evidencias de que este último es independiente del calcio. La activación plaquetaria por agentes como trombina, colágeno, ADP y epinefrina, puede conducir a la activación de la fosfolipasa A2 citoplasmática, que requiere concentraciones fisiológicas de calcio para activarse, la cual cataliza la hidrólisis de los fosfolípidos de membrana y da lugar al ácido araquidónico que se metaboliza preferencialmente por la vía de la TXA2 sintetasa para dar lugar al TXA2, producto inestable (sólo 5 s dura su actividad) cuyos precursores, los endoperóxidos cíclicos, son también capaces de activar el receptor. De esta manera el TXA2 constituye un amplificador de la señal de activación plaquetaria.

Después de un estímulo fuerte los gránulos alfa y densos se alargan y emiten seudópodos, se aproximan a la membrana plasmática (lo que es posible debido a la disolución del sistema canalicular abierto), se funden con la membrana, aumentan de volumen debido a la entrada de agua y esto propicia la liberación de su contenido al medio exterior, lo que se denomina secreción.

Un elemento que distingue a los agentes inductores de agregación de la plaqueta es el peso relativo que tienen la síntesis de TXA2 y la secreción en el resultado final. Por ejemplo, la agregación inducida por trombina, es resultado fundamentalmente de la señal dada por la activación de su receptor, ya que no es afectada por la inhibición que ejerce la aspirina sobre la síntesis del TXA2. El ADP produce una primera fase de agregación reversible, de aproximadamente 30 s de duración y que es consecuencia de la señal de activación del receptor, a lo que sigue una segunda fase irreversible y que depende de la síntesis de TXA2. El TXA2 parece requerir de la liberación de ADP.

La conocida susceptibilidad a la aspirina de la agregación inducida por colágeno, sugiere la importancia de la liberación de TXA2 en su mecanismo de activación plaquetaria. La epinefrina se considera un agonista débil que amplifica el efecto de otros estímulos a través del incremento de la concentración de calcio intracelular y de la actividad adenilato ciclasa.

Los concentrados de plaquetas:

Los concentrados de plaquetas fueron originalmente utilizados en medicina transfucional en el tratamiento o prevención de hemorragias a causa de una severa trombocitopenia. Los concentrados estándares de plaquetas a transfundir se denominaron PRP y su concentración era de 0,5•1011 plaquetas por unidad.22 Las potencialidades del uso de productos derivados de la sangre para estimular la cicatrización y sellar heridas fue descrito por primera vez en 1970.23 Se trataba fundamentalmente de concentrados de fibrinógeno cuya polimerización se inducia con calcio o trombina. Por su alto contenido en factores de crecimiento el uso de las plaquetas en acelerar el proceso de cicatrización resulta muy atractivo y se ha venido utilizando en los últimos años en la práctica clínica.

El uso de los concentrados de plaquetas cuenta con protocolos diversos, un punto en común es que se obtienen por lo general a partir de sangre con anticuagulante y se procesan de manera usual como máximo una hora antes de ser administrados. Uno de los pasos más comunes es la centrifugación inicial de la sangre, cuyo objetivo es obtener diferentes fracciones:

1. Fracción correspondiente a los glóbulos rojos (sedimento).
2. Capa leucocitária.
3. Fracción de plasma acelular que teóricamente se subdivide en a) Zona rica en plaquetas o PRP y b) Plasma Pobre en

Plaquetas (PPP). Otro método implica la extracción del sobrenadante (descartando los eritrocitos) del primer centrifugado y la re-centrifugación a mayores gravedades.24 Un método alternativo a la centrifugación es la filtración, para lo cual se emplean dispositivos apropiados, se plantea que este método requiere un 40% menos de tiempo y que es menos traumático para las plaquetas, mientras que se obtienen concentraciones similares de plaquetas y factores de crecimiento.

Fracciones que se obtienen tras la centrifugación de la sangre. El protocolo clásico25 describe la centrifugación de 5 mL de sangre tratada con citrato (8 min a 460 g) mediante la cual se distinguen tres fracciones fundamentales: 1) Fracción eritrocitaria, 2) Capa leucocitaria y 3) Plasma acelular. Esta última fracción puede sub dividirse en dos sub fracciones:
a) Fracción rica en factores de crecimiento y
b) Fracción pobre en factores de crecimiento. En un segundo momento, se extrae la fracción rica en factores de crecimiento y se añaden los activadores. Modificado de Dohan et al. 2009.

Las técnicas de obtención pueden variar también en dependencia de su obtención manual o con dispositivos creados al efecto, pasando por sistemas abiertos como el PRGF (creado por Anitua en 199926,27) que es sencillo pero exige trabajar en medio estéril como flujo laminar, campana de vacío o en quirófano. Otros métodos que existen en el mercado son cerrados o semi cerrados siendo su coste variable según la casa comercial (e.j. BTI, GPS de BIOMET, AGF de MBA, PReGF de Harvest, PROTEAL, GMP, Orthogen, entre otros).

El uso de los preparados de plaquetas está sujeto a numerosas variables, las cuales incidirán en su eficacia clínica. Algunas de estas variables son: concentración de plaquetas que se logra, técnica de obtención, concentración de proteínas secretadas, manipulación y aplicación clínica. Sobre la cantidad de plaquetas que se obtiene con distintos métodos se han reportado variaciones que van desde 2 a 8,5 veces el valor basal. En cuanto a este aspecto se refiere que para obtener óptimos resultados se requiere concentrar las plaquetas entre 3-5 veces por encima del valor basal. 28 Teniendo en consideración que un individuo normal tiene alrededor de 200 000 plaquetas/µL un concentrado de plaquetas con 1 000 000 plaquetas/µL sería óptimo con fines terapéuticos. 29 Se ha demostrado que concentraciones superiores no incrementan el efecto, en cuanto a la cicatrización de heridas se refiere.

Los preparados de PRP son estables en las soluciones anticoagulantes durante 8 h. Antes de aplicarlos, se deben activar, por lo general añadiendo 1000 U de trombina (activador que polimeriza la fibrina en un gel insoluble que origina la degranulación de las plaquetas y la liberación de los factores de crecimientos) o una solución de cloruro de calcio al 10 %. La adición de estos componentes provoca la liberación inmediata de los factores de crecimiento. Tras 15-20 min después de añadir el cloruro de calcio se forma un gel inestable que debe ser utilizado de manera inmediata. Si se coloca el PRP sin activador la liberación de los factores tiene lugar en los tejidos de manera lenta.

Antes de su aplicación. Según sea el tiempo y temperatura tras la activación, se puede obtener desde un líquido para infiltración, hasta un compuesto sólido gelatinoso maleable útil para sellar o compactar (gel de plaquetas o coágulo). Si solo interesase el gel adhesivo sin factores, puede activarse PPP obteniéndose un coágulo de fibrina.

Los rendimientos que se obtienen al centrifugar la sangre son variables y depende entre otros del valor de hematocrito individual. Como referencia con la centrifugación (460 g) de 8 mL de sangre total se obtiene 1 mL de plasma pobre el factores de crecimiento y 1 mL de plasma rico en factores de crecimiento. La cantidad de PRP a preparar dependerá de su uso final. En el proceso de preparación se deben tener en cuenta que para tratamientos quirúrgicos el lugar de preparación será un quirófano. Para infiltraciones, se podrá realizar en una sala de curas cuidando al máximo la asepsia. El paciente se preparará con 15 días de antelación recetándole un multivitamina (sobretodo vitamina C). Si es fumador se le solicita que no fume o lo haga menos durante 15 días.

La extracción sanguínea se realiza al paciente unos minutos antes de comenzar con el procedimiento terapéutico a realizar. La cantidad dependerá del defecto a tratar. A manera de ejemplo, si la técnica requiere el uso de heparina, la jeringuilla se carga previamente con 30 UI/mL de heparina y se extraen 20 mL de sangre con aguja tipo mariposa 21 a 18 G. La extracción debe realizarse en modo de evitar la hemólisis, se aspira delicadamente. La sangre se trasfiere al contenedor que se utilizará para centrifugar vertiéndola por la pared interior delicadamente, en modo de evitar la formación de espuma (hemolísis).

La separación del plasma se realiza generalmente mediante centrifugación durante 8 min a 200-460 g. En este caso se usa una centrifugación a bajas gravedades que permita concentrar las plaquetas en el plasma que se encuentra más próximo a los hematíes. Al final del proceso se obtiene un estimado de 10 mL de plasma, de los cuales de 6 mL a 7,5 mL corresponderá a PPP y 2,5 mL a 4 mL PRP por cada tubo de sangre anticoagulada. Aunque debido al hematocrito del paciente, se obtenga mayor volumen total, sólo se aprovecharán como máximo 4 mL de PRP.

Las plaquetas que se extraen por succión se encuentran en la zona central del plasma y hacia la zona más próxima al paquete eritrocitario. Si se incrementa la velocidad de centrifugación estas sedimentan y no se pueden extraer. Si se desea hacer una segunda centrifugación del sobrenadante de la primera, se emplean 3000 g, en este caso hacia la zona baja del tubo se concentran las plaquetas y hacia la parte superior encontraremos el PPP.

Inconvenientes prácticos:

Es posible que después de centrifugar se observe un plasma blanquecino con aspecto sebáceo. Esto puede tener dos posibles orígenes: que el paciente esté en plena digestión tras una ingesta de grasas o que padezca de dislipidemia. Este plasma no debe utilizarse nunca para infiltraciones. También es posible encontrar un color rosáceo, esto se debe a una extracción de sangre traumática que provoca una liberación de tromboplastina tisular, dando lugar a micro-coágulos que retienen algunos hematíes.
Este plasma tampoco se recomienda que se use. El plasma ideal es de color amarillento traslúcido. Otra posible complicación es que durante la extracción de sangre ésta salga con exceso de velocidad creando hemólisis. Este plasma será rojizo y se deberá desechar. Esto se evita haciendo la extracción con un catéter de calibre adecuado.

Clasificación de los concentrados de plaquetas:

El uso de los concentrado de plaquetas se guía por diferentes protocolos lo que trae aparejado resultados clínicos variables debido al empleo de concentrados con diferentes características biológicas y con tipos de aplicaciones diversos. Se ha propuesto una clasificación de los preparados ricos en plaquetas en las siguientes categorías:

1. P-PRP, plasma rico en plaquetas puro.
2. L-PRP, Plasma rico en leucocitos y plaquetas.
3. P-PRF, plasma rico en plaquetas y fibrina y
4. L-PRF, plasma rico en leucocitos plaquetas y fibrina. Para la obtención de cada uno de estos concentrados existen dispositivos disponibles en el mercado o métodos manuales. Los métodos manuales tienen como desventaja la variabilidad que induce la habilidad del operado para aspirar el plasma, mientras que los métodos automáticos son más precisos pero incrementan los costos del procedimiento notablemente.

Con relación a los agentes inductores de la coagulación existen también variaciones, por ejemplo se usa gluconato de calcio o batroxonina (enzima que lisa fibropéptidos e induce la polimerización en ausencia de trombina bovina, la gelificación tiene lugar en 10 min).

La obtención del L-PRF tiene la particularidad de que no se emplean ningún agente anticoagulante. En esencia se centrifuga a baja velocidad la sangre total y se deja en reposo. El proceso natural de coagulación se activa y como consecuencia dentro del tubo se obtienen tres fases: en el fondo la capa eritrocitaria, en el centro un coagulo que atrapa la mayor parte de las plaquetas y leucocitos, y en la fase superior el suero. El coagulo formado es estable y se utiliza como material de relleno en cirugía de la cavidad oral, 30 maxilofacial 31,32 y cirugía plástica. 33 Este método tienen numerosas ventajas pues permite obtener de manera económica y rápida material para el relleno de cavidades.

La mayor parte de los estudios realizados hasta el momento con PRP han utilizado protocolos seleccionados bajo bases empíricas. El PRP ha sido obtenido por los procedimientos descritos pero con grandes variaciones, por ejemplo la fuerza centrífuga utilizada varia de 160 g a 3000 g y el tiempo de centrifugación de 3 min a 20 min.

Es por lo anterior que es difícil definir si los resultados que actualmente han sido publicado han usado P-PRP o L-PRP. Estudios in vitro demuestra que en efecto los PRP estimulan la proliferación de distintos tipos de células (e.g. osteoblastos, fibroblastos, células del tendón, condrocitos, ligamento periodontal, células madres mesenquimales del hueso). 22 Pero al mismo tiempo otros estudios del mismo tipo han encontrado resultados contradictorios. 34 Lo mismo tiene lugar para los efectos relacionados con la diferenciación celular inducida con PRP. 35,36 La variabilidad en los resultados parece depender del número de plaquetas que contienen los PRP, planteándose en general que existe un número óptimo por encima del cual los efectos inductores serian negativos.

Por otra parte, la diferencia fundamental en cuanto a los preparados L-PRP y P-PRP la determina el papel potencial de los leucocitos en los procesos de proliferación, diferenciación, inmunitarios y en la respuesta a infecciones, pero en la práctica la aplicación de métodos donde no se ha controlado el número de leucocitos en los preparados impide discernir entre la utilidad de uno u otro tipo de preparados.

Algunos autores han recomendados sin una demostración experimental la eliminación de los leucocitos de los PRP, mientras que otros lo aconsejan. Estos últimos tienen en consideración el papel de los leucocitos en los procesos de respuesta inmune, respuesta a infecciones y secretor de VEGF. Investiga ciones recientes han demostrado que el uso de L-PRP estimulan el anabolismo y la remodelación de tendones 37 y pudieran ser de utilidad en el tratamiento de la tendinitis. 5 Han sido utilizado además en la cicatrización ósea38 y en el control del dolor y la inflamación. 5

Aunque se ha lanzado la hipótesis sobre el papel sinérgico que podrían tener los leucocitos y las plaquetas hasta el momento no existen estudios sólidos que lo demuestren.
Algunos de los productos del PRP presentan efectos antibacterianos contra Staphylococcus aureus39 e incluso antiinflamatorios mediados por el bloqueo de la proteína MCP-1 y la generación de lipoxina A4.40 Esto hace que los pacientes presenten en general menores índices de inflamación y expresen menos sensación de dolor en su recuperación funcional. Los resultados anteriores pudieran relacionarse con la presencia de leucocitos en el PRP utilizado.

Anitua defiende la no inclusión de leucocitos, 27 argumentando que alteran la función de algunos facotres de crecimiento e interfieren en la acción antiinflamatoria. Otros, como Smart PRePTM system (Harvest Technologies Corporation, Munich, Alemania) alegan que carece de importancia este detalle y además su PRP contiene algunos hematíes. Otros autores prefieren la inclusión de leucocitos para el tratamiento de las úlceras u otras cirugías ya que consideran que tiene un efecto antimicrobiano y desinfectante.
La presencia de fibrinógeno y la densidad del gel o coagulo es también un factor determinante. De esto dependerá la velocidad de liberación de las citocinas y por tanto su efecto final.

Seguridad:
Dado que los PRP son preparados autólogos, su administración es segura y no está sujeta a la transmisión de enfermedades como HIV, Hepatitis, entre otras. Los PRP son bien tolerados por los pacientes. Cuando se emplea trombina bovina como agente acelerador de la coagulación existe la posibilidad de la inducción de anticuerpos contra esta proteína, no obstante el proceso de producción actual de la trombina para estos fines, elimina el factor Va que es el antígeno responsable.

El uso de PRP está contraindicado en pacientes que padecen de trastornos de la coagulación (trombocitopenia, hipofibrinogenia o que reciben terapia anticoagulante), que poseen hipersensibilidad a productos bovinos (en el caso que se use la trombina), o anestésicos locales (en el caso que se use alguno). Ante la sospecha de lesión precancerosa o cancerosa, lo prudente, es no aplicarlos. 9 En casos en los que el conteo de plaquetas sea inferior a 100•103 plaquetas / µL, embarazo o lactancia el procedimiento está contra indicado.

El paciente debe ser informado de la posible presencia de síntomas indeseables temporales después de la inyección (dolor local, eritema). Esta respuesta se produce de manera natural debido a la estimulación de los mediadores de la inflamación. En general los eventos adversos son mínimos, pero los riesgos comunes a cualquier inyección como: infección local, daño neurovascular, entre otros, pueden ocurrir de manera remota.

Aplicaciones clínicas
Las aplicaciones terapéuticas del PRP son muy diversas. Se utilizó hace años en cirugía como coagulante, sellante y compactante de injertos óseos. En los últimos tiempos se sugieren nuevas terapias fundamentadas en el potencial regenerativo y antiinflamatorio de los factores de crecimiento contenidos en las plaquetas y que estas liberan al activarse.

También se utiliza junto a auto o aloinjertos óseos o con algún sustrato de fosfato tricálcico u otro material de relleno óseo combinado con células madre, en casos de falta de consolidación ósea.
Se están desarrollando estudios, tanto a nivel pre-clínico como clínicos, destinados a generar evidencia científica de los efectos antiinflamatorios, analgésicos y/o regenerativos del PRP infiltrado en articulaciones artrósicas, tendinitis, ligamentoplastias y otras lesiones musculo-esqueléticas.

Desde hace mas de 10 años que se viene aplicando el PRP en medicina deportiva: lesiones musculares, tendinosas y también en trastornos degenerativos: artrosis, condropatías y problemas de cicatrización. La indicación ideal en la artrosis es aquel paciente que no es sensible a los tratamientos convencionales y que por razones varias (edad, riesgo quirúrgico, entre otros), no procede una cirugía radical como la artroplastia total o prótesis. También el deportista con problemas de condropatía puede recuperar sus prestaciones habituales con este tratamento.

Está indicado en aquellas situaciones en que se precise estimular la regeneración celular. Sobre todo cuando existe degeneración de partes blandas: tendinitis degenerativas, degeneración discal, fascitis, degeneración del cartílago. Se está utilizando con éxito actualmente en:

• Condropatias, osteocondritis y artrosis
• Lesiones de ligamentos de la rodilla u otras articulaciones
• Ligamentoplastias
• Lesiones musculares y tendinosas
• Consolidación ósea
• Implantación de prótesis articulare
• Cicatrización de úlceras y heridas
• Lesiones corneales
• Implantes dentales
• Regeneración cutánea: úlceras de decúbito, retardos de cicatrización, medicina estética.

Cabe destacar su utilización en lesiones del tendón de Aquiles en las lesiones ligamentosas de la rodilla como la del ligamento cruzado anterior y ligamentoplastias, en la fascitis plantar, en la epicondilitis del codo, fracturas, pseudoartrosis y fusión intervertebral en la patología del manguito rotador del hombro. Y por supuesto en la patología del cartílago y la artrosis. En cirugía se utiliza además por su acción antiinflamatoria, antiedematosa y antihemorrágica. Otros autores resaltan su acción antimicrobiana.

En las lesiones cutáneas u otros procesos cicatriciales se aprecia un aumento en la rapidez y calidad de la cicatrización. En la tabla 2 se resumen algunos ejemplos de los resultados de un grupo de estudios que soportan el uso de los PRP.

El ozono como activador las plaquetas
Liberación de factores de crecimiento. Estudios realizados por el Dr. Bocci(1999)14 y Re (2010)15, han demostrado que la ozonización del plasma heparinizado promueve la agregación plaquetaria acentuando así la liberación de sus factores de crecimiento. Se observó una gran diferencia entre la sangre anticoagulada con citrato o con heparina. El estudio del Dr. Bocci 14 se realizó a diferentes concentraciones: 20 µg/mL, 40 µg/mL y 80 µg/mL de ozono, con mediciones tras 2 h, 4 h y 8 h de incubación. Constató que cuando se utiliza heparina, aumenta la agregación plaquetaria en un 20 % con una concentración de ozono de 40 µg/mL y en un 68% cuando la concentración es de 80 µg/mL.

Los factores de crecimiento derivados de las plaquetas que se estudiaron fueron: PDGF AB, se libera especialmente cuando la sangre está heparinizada, a partir de 40 µg/mL de ozono, superando en más del doble a lo que se libera si la sangre se trata con citrato, las concentraciones más elevadas se alcanzaron a partir de las 2 h de incubación.

TGF beta1, se libera de manera creciente desde la primera hora hasta la cuarta, con una mayor expresión a las 4 h en el grupo donde se heparinizó la sangre y se trató con 80 µg de O3. IL-8, se libera a las 4 h, se supone que es el tiempo que necesita su síntesis. TBX2, se libera desde la primera hora de incubación, los valores a las 2 y 4 h son similares y las diferencias en cuanto a su liberación dependiente del anticoagulante se registraron solo para 2 h de incubación a las concentraciones de 20 µg de O3 y 80 µg de O3 a favor del citrato.

14 Por otra parte, la presencia de FGF es independiente del anticoagulante y se activa de igual modo con cloruro de calcio que con el ozono.
El efecto anticoagulante de la heparina se ejerce a través de la activación de la antitrombina III. La heparina se une al inhibidor de la coagulación antitrombina III, produce un cambio conformacional de la molécula que acelera más de 1000 veces la unión de la antitrombina III a los factores activados, principalmente la trombina y el factor Xa, con menor intensidad al XIa y XIIa (complejo heparina-antitrombina se une finalmente a la trombina). Esta unión inactiva las proteasas de la coagulación de suero. La inhibición de la activación mediada por trombina de los factores V y VII es de importancia fundamental para el efecto anticoagulante. La heparina es anticoagulante con efectos in vivo, e in vitro.

El citrato sódico (10 mL 3,3% puede anti coagular 100 mL de sangre) es sólo anticoagulante in vitro por ser un secuestrador de los iones de calcio, y no tiene efecto sistémico.

Los métodos convencionales de activación de las plaquetas usan citrato debido a que el cloruro de calcio que se añade para la activación, satura la capacidad quelante del citrato y activa el proceso de formación del coagulo. Por tanto, cuando se trate de activar el PRP con O3 y se necesite del coagulo (ej. para rellenar cavidades) deberá usarse como anticoagulante citrato, mientras que cuando la mayor importancia la tiene lograr un plasma más rico en factores (ej. para inyecciones sub cutáneas en piel) deberá usarse heparina.

La combinación de ambas técnicas, activación con calcio y ozono, acelera la activación de las plaquetas. Al ozonizar el PRP se forman ozónidos y otros derivados, que difunden en el interior de la plaqueta, se activa la fosfolipasa C y la A2 (dependiente de calcio), facilitando la formación de sustancias pro-agregantes (PGE2, Tromboxano, etc). Con ello se consigue no solo liberar los factores de crecimiento más rápidamente, sino que la formación de peróxidos despliega muchas rutas metabólicas curativas que estaban silentes.

Procedimiento de ozonización del plasma
De manera general se carga en una jeringa un volumen de ozono similar al volumen de PRP obtenido, las concentraciones de O3 van de 40 µg/mL a 80 µg/mL se procede a mezclar con el PPR por un minuto y a continuación de añade el cloruro de calcio. Será la combinación de ambos la que dará una mejor y óptima liberación de los factores de crecimiento.
Formación del coágulo: si el propósito es la formación del coágulo, es de vital importancia respetar las proporciones y nunca poner más cloruro cálcico del indicado, además de obtener el plasma con citrato de sodio como anticoagulante. Para acelerar la coagulación y la formación de fibrina se utiliza una incubadora que eleva la temperatura a 37º C y se incuba durante unos 30 a 40 min. El coágulo obtenido se comportará como una esponja empapada en factores de crecimiento.

En el caso de usar la técnica para la cura de heridas, estas se tratan con ozono (con agua ozonizada o bolsas de ozono), se debridan y se procede a irrigar la úlcera con el PPR no coagulado, se cubre la úlcera con la membrana biológica (fibrina), plasma coagulado y se sella con un apósito hidrocoloide durante 3 días. Este procedimiento se repite cada 15 días.
En aplicaciones para bioestimulación cutánea y tratamientos anti-envejecimiento, se debe inyectar intradérmicamente con técnica de mesoterapia e inmediatamente después de la activación. Se dan 3 sesiones de tratamiento separadas con dos semanas entre sí. Como norma se infiltra en todo el trayecto de la arruga 1 mL de PPR. En rodilla se infiltra entre 6 mL y 8 mL. En codo de 3 mL a 6 mL, en epicondilitis de 2 mL a 3 mL.

El sobrenadante del PRP es también ideal para su uso como colirio. La aplicación del PRP tanto de forma tópica como en colirio ha demostrado ser un procedimiento fiable, seguro y eficaz para restaurar la superficie epitelial de la cornea. La formulación líquida del PRP es empleada además para bioactivar la superficie de los implantes dentales o para aglutinar injertos. Mientras que el coágulo de PRP es ideal para estimular la regeneración ósea en alveólos postextracción, tratamiento de úlceras, ingeniería de tejidos, entre otros.

Para la artrosis la combinación de la ozonoterapia tradicional con la de PRP potencia el efecto regenerativo del PRP, garantizando su esterilidad y añadie los efectos conocidos del ozono como antiinflamatorio y en el control del dolor.

Otra aplicación del plasma es el llamado plasmagel. Este se obtiene del plasma pobre en plaquetas y se utiliza para rellenos. Para su preparación se carga previamente la jeringa con ácido ascórbico 100 mg/mL, a razón de 1 mL por cada 5 mL de sangre que se va a extraer, mezclándose en la jeringa.

Después la sangre sin anticoagulante se centrífuga (1800 r•min-1, 8 min). El PRP se carga en jeringuillas de 1 mL y se introduce en agua a 95 °C -98°C durante 3 min, con lo cual el plasma se gelifica por desnaturalización de las proteínas y ese es el material que se utiliza para los rellenos faciales. Se debe prestar especial atención a la desnaturalización de las proteínas, para lograr la formación de un gel con una viscosidad tal que facilite su inyección. Las infiltraciones se hacen por lo general con una jeringuilla de 1 mL y aguja de 27 G. Este procedimiento mantiene su efecto relleno de 3 a 4 meses (comunicación personal, de A. Schwartz).

Una vez hecho los rellenos se utiliza el PRP rico en factores ozonizado para bioestimular. Se repite la bioestimulación con PRP una vez al mes, durante 3 meses y a los 3 meses se revalora el paciente para un nuevo relleno con plasmagel, que en este caso sustituye en gran medida al ácido hialurónico.

La tecnología del PRP abre nuevas perspectivas en el área de regeneración tisular humana y es una inestimable herramienta para tratar una amplia gama de lesiones tisulares, en ortopedia, medicina deportiva, medicina estética, vascular, odontología, implantología, cirugía maxilofacial, oftalmología y otras. La activación de PPR con ozono ha demostrado una gran eficacia desde el punto de vista clínico, así como su combinación con la ozonoterapia convencional. En este campo se acumula una gran cantidad de datos basados en la observación clínica de los practicantes, pero se hacen necesarios el establecimiento de protocolos de trabajo estándares así como el estudio clínico y molecular más profundo de sus efectos.
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La ozonoterapia es una forma de tratamiento médico alternativo que pretende la saturación de oxígeno en el organismo a través de la insuflación de una mezcla de oxígeno y ozono al cuerpo por diversas vías. Se sugieren varios métodos para introducir la mezcla de gases al cuerpo, los presuntos beneficios de esta terapéutica incluyen el tratamiento de diversas enfermedades incluyendo cáncer, SIDA, esclerosis múltiple, entre otras. No existen pruebas creíbles en publicaciones revisadas por iguales que respalden el uso del ozono como un tipo válido de tratamiento médico^.

Por otra parte, sí existen amplias evidencias de que el ozono resulta perjudicial para los tejidos humanos y vegetales. El código de regulación federal de los EE.UU. de fecha Abril 1 de 2016, en su acápite a) dice lo siguiente: “El ozono es un gas tóxico sin aplicaciones médicas conocidas; específicas, coadyuvantes o preventivas. Para que el ozono sea efectivo como germicida debe estar presente en una concentración mucho mayor que la tolerada con seguridad por personas y animales”.

En los siguientes acápites el código proporciona muchos más detalles sobre sus efectos dañinos y considera fraudulentos los generadores de ozono y sujetos a confiscación si se promocionan con fines médicos o se utilizan en hospitales u otros lugares ocupados por enfermos, ya que su uso con fines médicos se encuentra prohibido en los EE.UU. En la Unión Europea los generadores de ozono para uso médico son considerados productos sanitarios con la calificación II-b y deben contar con la preceptiva certificación.

El ozono médico se produce a partir de oxígeno medicinal y está formado por una mezcla de un 5%, como máximo, de ozono y un 95% de oxígeno, ya que dosis superiores han demostrado ser tóxicas para todos los tejidos.

La dosis total de ozono usada se expresa en microgramos (μg) y es el equivalente al volumen del gas (mL) multiplicado por la concentración de ozono (μg/mL). En estudios ambientales se utiliza la unidad parte por millón de volumen como unidad de medida (ppm).

Historia de la ozonoterapia

En 1856, tan sólo 16 años después de su descubrimiento, el ozono fue utilizado por primera vez para el cuidado de la salud para desinfectar quirófanos y esterilizar material quirúrgico.

Para finales del siglo XIX se utilizó el ozono para potabilizar agua y eliminar sus microorganismos, fue difundido este proceso en Europa continental.

En 1892 “The Ancet” publicó un artículo describiendo la administración de ozono para el tratamiento de tuberculosis.

Durante la Primera Guerra Mundial se usó el gas ozono para la limpieza y desinfección de heridas. Esta forma de tratamiento está muy extendida en el centro de Europa, sobre todo en Alemania, Austria y Suiza, habiendo sido tratados un gran volumen de pacientes, pero en muchas ocasiones de forma totalmente empírica.

La indicación de tratamiento mediante ozonoterapia de la hernia discal es la que dispone de un nivel de evidencia más elevado.^{11 12} Este tratamiento ha permitido incluir de forma oficial a la ozonoterapia en la cartera de servicios de las unidades de dolor en España.

A partir de los años 80 del siglo pasado se generalizó mundialmente el concepto de la Medicina Basada en la Evidencia‟ MBE (del inglés Evidence-Based Medicine), que consideraba insuficiente el razonamiento fisiopatológico tradicional hasta el momento para tomar decisiones clínicas.

Como pioneros en el desarrollo de la MBE se reconocen los trabajos publicados de Archie Cochrane, John Wennenberg, Iván Ilich y Thomas McKeown a partir de los años 70.

Los puntos a considerar por la MBE son:

• La búsqueda y hallazgo de la literatura biomédica original y relevante, su lectura crítica y correcta interpretación para establecer su nivel real de evidencia.
• La experiencia clínica y el conocimiento sistemático del contexto de esa experiencia.
• Las preferencias del paciente. La colaboración Cochrane es una organización sin ánimo de lucro. La integran alrededor de 11 500 investigadores de unos 90 países que aplican un proceso de revisión sistemático y riguroso de las publicaciones sobre la salud. Los resultados se publican regularmente en la Cochrane Library.

Algunos consideran que junto al Código de Núremberg y la Declaración de Helsinki , el concepto de MBE sentó las bases para una verdadera revolución social en el campo de la medicina del siglo pasado. En lo referente al ozono aún no aparecen resultados Cochrane favorables. Por el contrario resultados negativos sí aparecen en diversos lugares.

En 2005 un Comité de Expertos del Ministerio de Salud de Malasia llegó a la conclusión de que no existía evidencia para para recomendar las terapias de ozono como tratamiento alternativo en ninguno de los padecimientos analizados. (sida, isquemias, oftalmología, otorrinolaringología, ginecología y obstetricia, ortopedia, cáncer y dermatología).

En los EE.UU., el código de regulación federal de fecha Abril 1 de 2016, en su acápite (a) dice lo siguiente: “El ozono es un gas tóxico sin aplicaciones médicas conocidas; específicas, coadyuvantes o preventivas” (sic).

En los siguientes acápites el código proporciona detalles sobre sus efectos dañinos y considera fraudulentos los generadores de ozono si se usan en hospitales u otros lugares ocupados por enfermos. Otra referencia afirma que no existe evidencia creíble, revisada por pares, que apoye al ozono como un tipo de terapia médica.

Por regla general, los estudios favorables a la ozonoterapia son sólo aquellos realizados por terapistas del ozono en consultas de caracter privado.recomendar las terapias de ozono como tratamiento alternativo en ninguno de los padecimientos analizados. (sida, isquemias, oftalmología, otorrinolaringología, ginecología y obstetricia, ortopedia, cáncer y dermatología).

En los EE.UU., el código de regulación federal de fecha Abril 1 de 2016, en su acápite (a) dice lo siguiente: “El ozono es un gas tóxico sin aplicaciones médicas conocidas; específicas, coadyuvantes o preventivas” (sic).

En los siguientes acápites el código proporciona detalles sobre sus efectos dañinos y considera fraudulentos los generadores de ozono si se usan en hospitales u otros lugares ocupados por enfermos. Otra referencia afirma que no existe evidencia creíble, revisada por pares, que apoye al ozono como un tipo de terapia médica.

Por regla general, los estudios favorables a la ozonoterapia son sólo aquellos realizados por terapistas del ozono en consultas de caracter privado.

Uso propuesto y evaluación científica

La ozonoterapia consiste en la introducción o insuflación de la mezcla de oxígeno y ozono al organismo por diversos medios, usualmente añadiendo a la mezcla distintas sustancias como otros gases o líquidos e insuflándolos al cuerpo por medios que incluyen el recto, la vagina, intramuscular (en distintos músculos), de manera subcutánea (dentro de la piel), o intravenosa (directamente en las venas).

El ozono también puede administrase por medio de autohemoterapia, en donde la sangre es extraída del paciente, expuesto a la mezcla oxígeno-ozono para después re-introducirse al torrente sanguíneo del paciente.

Se utilizan diferentes vías, parentelares y tópicas, para administrar el ozono sin que tenga efectos tóxicos en el organismo. Para facilitar la aplicación del gas sin efectos secundarios, éste se mezcla con agua bidestilada o aceita de oliva o girasol, obteniendo respectivamente agua ozonizada y aceites ozonizados.

En todo caso, hay que utilizar productos sanitarios específicos, si los hay, o resistentes al ozono.

El ozono se disuelve inmediatamente en el agua del organismo, tanto en el plasma como en los fluidos extracelulares debido a que su solubilidad es diez veces superior a la del oxígeno.

Esto permite la reacción inmediata con los compuestos y biomoléculas solubles presentes en estos fluidos. Es por ello que cuando la sangre humana es expuesta a dosis no tóxicas de oxígeno-ozono, ambos gases se disuelven en el plasma, pero mientras que el oxígeno se equilibra entre la fase gaseosa y el plasma al reaccionar apenas con ninguna substancia, el ozono no puede equilibrarse ya que reacciona de forma inmediata con biomoléculas presentes en el plasma y se agota totalmente.

La reacción del ozono implica varios procesos fundamentales que tienen lugar al mismo tiempo:

Una pequeña parte de la dosis de ozono se consume en la oxidación de sustancias antioxidantes naturales: ácido ascórbico, ácido úrico, grupos sulfidrilo del GSH, proteínas y glicoproteínas presentes en el agua del plasma. Este hecho explica que una dosis muy baja de ozono puede ser ineficaz o equivalente a placebo. Concentraciones de ozono por debajo de 15 μg/mL son inactivadas por los antioxidantes del plasma en la mayoría de individuos. No obstante, los diferentes tejidos del organismo tiene distinta capacidad antioxidante y, por tanto, la dosis mínima y máxima varía de uno a otro.

El ozono tiene una gran afinidad por los dobles enlaces carbono-carbono (C=C) presentes en algunos compuestos orgánicos, como los ácidos grasos insaturados. Estas moléculas viajan en el plasma habitualmente en forma de triglicéridos, unidas a lipoproteínas plasmáticas, ya que no son solubles en el agua; pero una parte se encuentra unida a la albúmina en forma de AGI libres, que son los AGI que reaccionan con el ozono. La mayor parte del ozono se consume en una reacción de adición a los dobles enlaces carbono-carbono de los ácidos grasos insaturados, conocida como Reacción de Criegee.

Esta reacción en condiciones fisiológicas hidrofílicas genera aldehídos, alfa-hidroxi-hidroperóxidos, conocidos como productos de oxidación lipídica (POLs) y especies reactivas de oxígeno (ERO) especialmente peróxido de hidrogeno (H₂O₂), con un carácter oxidante mucho menor que los peróxidos generados por el metabolismo aeróbico y con poca tendencia a la formación de radicales libres.

Es importante destacar que estas reacciones, por ser molécula a molécula, se terminan rápidamente, con el agotamiento del ozono suministrado, por lo que el estrés oxidativo que se produce es fácilmente controlable, a diferencia del estrés oxidativo crónico patológico que genera una reacción en cascada que se retroalimenta.

Esta reacción es la responsable de los efectos biológicos y terapéuticos del ozono, mientras que las ERO, fundamentalmente el H₂O₂, son responsables de los efectos biológicos inmediatos con un estrés oxidativo leve, controlado, agudo y transitorio, pues su vida media de minutos/segundos, los POLs son los efectores tardíos y llegan al sistema vascular y a prácticamente todos los órganos, con una vida media de días.

Incluso una dosis alta de ozono (16.000 μg para 200 mL de sangre venosa -concentración de 80 μg/mL) nunca sobrepasa la capacidad antioxidante del plasma y no produce daño a las células sanguíneas. La respuesta terapéutica alcanzada con la ozonoterapia tras un estrés oxidativo repetido y controlado puede ser considerada como un efecto precondicionante capaz de re-equilibrar y potenciar el sistema redox alterado en algunas patologías.

La molécula de ozono puede ser sintetizada de forma natural por algunas células de nuestro organismo, como los leucocitos activados que producen ozono en determinadas circunstancias.

En este caso, tiene un efecto bactericida directo, pues debilita la membrana del microorganismo e induce su muerte. Partiendo de esa reacción del ozono, según el tejido dónde se administra, sus metabolitos (ERO y POLs) producen distintos efectos, que han sido estudiados en laboratorio sobre muestras biológicas y animales de experimentación.

Las principales indicaciones de la ozonoterapia son:

– Heridas y retardos de cicatrización. Es la indicación más antigua de la ozonoterapia. Las úlceras venosas y el pie diabético son las indicaciones más claras. Forma de administración: Tópica y/o sistémica.

– Hernia discal. En aquellos pacientes en los que la cirugía no esté indicada y el tratamiento farmacológico habitual sea insuficiente. Forma de administración: intradiscal y/o infiltración en musculatura paravertebral.

– Artrosis. Indicado para disminuir los síntomas de la artrosis y mejorar la calidad de vida de los pacientes. Forma de administración: intra-articular.

– Arteriosclerosis periférica. Sobre todo en fumadores y pacientes diabéticos. Forma de administración: sistémica (habitualmente autohemoterapia).

– Proctitis hemorrágica. En pacientes tratados con radioterapia. Forma de administración: intrarrectal.

– Vulvovaginitis de repetición. Indicado sólo en el caso de infecciones recidivantes y crónicas y resistentes al tratamiento farmacológico habitual. Forma de administración: intravaginal.

– Enfermedades bucodentales. Periodontitis e infecciones crónicas y recurrentes de la cavidad oral. Forma de administración: agua ozonizada.

– Fístulas. Postquirúrgicas, postradiación. Forma de administración: insuflación a través de catéter de pequeño diámetro.

– Un amplio número de patologías pueden ser tratadas con ozonoterapia: arteriosclerosis, diabetes, enfermedades inflamatorias, autoinmunes y, en general, todas aquellas que cursen con un déficit de aporte de oxígeno a nivel de los tejidos o un desequilibrio entre oxidantes y antioxidantes, generando estrés oxidativo crónico. Forma de administración: autohemoterapia o intrarectal.

Esta terapia ha sido propuesta para su uso en diversas enfermedades, incluyendo cáncer, SIDA, esclerosis múltiple, artritis, enfermedades cardiovasculares, Alzheimer, enfermedad de Lyme, entre otras.

Uno de los mecanismos propuestos para el tratamiento del cáncer proviene de la teoría que propone que las células cancerosas no crecen ni se desarrollan en ambientes ricos en oxígeno. A acción del ozono es aumentar la saturación del oxígeno en el cuerpo y por lo tanto ayudará en tratar la neoplasia.

Para tratar el VIH/SIDA, el ozono desactiva las partículas virales, las pruebas que se han hecho han sido en ambientes invitro.

Un informe crítico publicado en 2001 concluye que la ingestión, infusión o inyección de ozono, que reacciona con la sangre a formar peróxido de hidrógeno, no puede reoxigenar los tejidos del cuerpo porque el metabolismo de un adulto de 60 kg requiere de 200 a 250 ml de oxígeno por minuto, necesidad que resulta cubierta por la respiración normal (J.H. Comroe Jr and R.D. Drips, A Monograph: The Physiological Basis for Oxygen Therapy. (Charles C Thomas, Springfield Ill 1950)). Cada litro de sangre que sale de los pulmones lleva unos 200 ml de oxígeno, de los cuales unos 50 ml son absorbidos cuando pasa a través de los capilares en los tejidos.

Durante una sesión de ozonoterapia convencional la cantidad de oxígeno que proviene de la descomposición del ozono no sobrepasa los 4 ml por hora (unos 0.7 ml por minuto), por lo que la posible contribución a la oxigenación de los tejidos es insignificante al compararse con la del oxígeno que proviene de la respiración (R.F. Moran, Oxygen saturation, content and the dyshemoglobins. Part I. Ciba-Corning News ll (1990)17).

Es conocido que diversos encargados de proyectores de cine expuestos niveles excesivos de ozono, como un sub-producto de las lámparas de arco de carbono utilizadas en los proyectores, desarrollaron lo que era conocido como “pulmones de proyeccionista”. El ozono causó un deterioro de las membranas inferiores de los pulmones.

A FDA (Food and Drug Administration) de Estados Unidos realizó estudios que demuestran que el ozono puede llega a ser dañino al tejido pulmonar al ser inhalado directamente.

Se han reportado meta análisis estadísticos con resultados favorables para la aplicación percutánea de ozono en el dolor de espalda. No obstante, los propios autores reconocen que: 1. Ninguno de los ensayos clínicos consultados trabajó con grupos de control, 2. Hubo ausencia de diagnósticos precisos y; 3. La aplicación de ozono se mezcló con la aplicación otros agentes terapéuticos, características que no se ajustan a los criterios actuales de la Organización Mundial de Salud para realizar ensayos clínicos rigurosos.

Tampoco se reportan las dosis de ozono aplicadas; las mediciones de la concentración de ozono requieren de equipos de cierta complejidad, atípicos en un consultorio médico convencional.Federal Register, Part II Environmental Protection Agency 40 CFR Part 50, 51, 52, et al. National Ambient Air Quality Standards for Ozone; Final Rule. Volume 80, number 206 (2015)).

Un metaanálisis publicado en 2009 concluye que la inyección local de ozono es efectiva para mitigar el dolor y ayudar en la recuperación de pacientes con hernia de disco o discólisis.

Sin embargo, el estudio no menciona la existencia de grupos de control o las concentraciones aplicadas, sólo las cantidades de supuestas mezclas de oxígeno y ozono, sin especificar proporción. También comenta que el ozono tiene efectos analgésicos y anti-inflamatorios, pero no brinda referencias; en realidad, existen numerosos estudios que muestran lo contrario: un efecto irritante en los tejidos vegetales y animales

Un estudio clínico publicado en 2016 encontró resultados positivos en pacientes con artritis reumatoide tratados con metotrexato + ozono, comparados con el grupo control que solo recibió tratamiento con metotrexato.

Existe en Bélgica cierta controversia legal acerca de su uso por atletas para mejorar su rendimiento físico. En 2013 un médico belga se encontraba bajo investigación criminal por sospechas de dopaje al extraer sangre de ciclistas, mezclarlas con ozono, y reinyectarlas nuevamente.

Seguridad y protección al paciente

La mayor parte de la preocupación acerca de la ozonoterapia surge alrededor de la ozonización de la sangre. Es bien conocido que cuando los mamíferos inhalan el ozono, éste reacciona con compuestos en los tejidos que revisten los pulmones iniciando una cascada de efectos patológicos.

Saul Green ha argumentado que ya que el ozono tiene la capacidad de oxidar compuestos orgánicos en un ambiente atmosférico, debe también lógicamente oxidar componentes de la sangre y tejidos endógenos humanos. Cuando es infusionado con sangre humana, el ozono puede llegar a producir EROS (especies reactivas del oxígeno) o radicales libres, una exceso de estos es conocido que causa estrés oxidativo y daño celular, y está implicado en la progresión de ciertas enfermedades crónico-degenerativas. Parece probado que altos niveles de ozono inhalado pueden tener efectos tóxicos, aunque niveles bajos y controlados pueden no llegar a serlo.

Los artículos sobre ozonoterapia nunca mencionan valores numéricos ni límites tolerables; tampoco los posibles efectos secundarios o colaterales, como es usual en cualquier medicamento convencional. Según un texto clásico de los EE.UU., un fármaco es “…cualquier sustancia que produce efectos medibles o sensibles en los organismos vivos y que se absorbe, puede transformarse, almacenarse o eliminarse”, pero un artículo avalado por la presidencia de la Asociación Española de Profesionales Médicos considera que “…el ozono no es un fármaco y como tal no provoca efectos colaterales”.

Las contraindicaciones de las que existe evidencia científica son formas mayores de favismo, enfermedad hemólitica causada por un déficit de la G-6PD.

La mayor parte de la preocupación acerca de la ozonoterapia surge alrededor de la ozonización de la sangre. Es bien conocido que cuando los mamíferos inhalan el ozono, éste reacciona con compuestos en los tejidos que revisten los pulmones iniciando una cascada de efectos patológicos. Saul Green ha argumentado que ya que el ozono tiene la capacidad de oxidar compuestos orgánicos en un ambiente atmosférico, debe también lógicamente oxidar componentes de la sangre y tejidos endógenos humanos.

Cuando es infusionado con sangre humana, el ozono puede llegar a producir EROS (especies reactivas del oxígeno) o radicales libres, una exceso de estos es conocido que causa estrés oxidativo y daño celular, y está implicado en la progresión de ciertas enfermedades crónico-degenerativas. Parece probado que altos niveles de ozono inhalado pueden tener efectos tóxicos, aunque niveles bajos y controlados pueden no llegar a serlo.

Los artículos sobre ozonoterapia nunca mencionan valores numéricos ni límites tolerables; tampoco los posibles efectos secundarios o colaterales, como es usual en cualquier medicamento convencional. Según un texto clásico de los EE.UU., un fármaco es “…cualquier sustancia que produce efectos medibles o sensibles en los organismos vivos y que se absorbe, puede transformarse, almacenarse o eliminarse”, pero un artículo avalado por la presidencia de la Asociación Española de Profesionales Médicos considera que “…el ozono no es un fármaco y como tal no provoca efectos colaterales”.

Las contraindicaciones de las que existe evidencia científica son formas mayores de favismo, enfermedad hemólitica causada por un déficit de la G-6PD.

 

Pacientes com Retinite Pigmentosa tratados com ozono durante 20 anos. Experiências cubanas

Mirta Copello, Silvia Menéndez

Resumo

A Retinite Pigmentosa (RP) é caracterizada por má visão noturna, diminuição do campo visual e / ou acuidade, com eletroretinograma (ERG) diminuído em amplitude e, finalmente, não reproduzível. Levando em consideração alguns dos efeitos biológicos do ozono, como: melhora no metabolismo do oxigênio, aumento da energia celular, capacidade do imunomodulador e aprimoramento do sistema de defesa antioxidante, o objetivo deste trabalho é avaliar a eficácia da Ozonoterapia nesses pacientes tratados Duas vezes por ano durante 20 anos.

Um estudo clínico controlado e retrospectivo foi realizado em 56 pacientes com Retinite Pigmentosa típica (não associada), com homogeneidade da amostra, idade, sexo e estágio da doença, e com consentimento informado assinado. Quarenta pacientes receberam ozono diariamente, por via retal, Durante 20 sessões (com uma concentração de 40 mg / L e um volume de 200 mL) como único tratamento, com repetição deste ciclo a cada 6 meses e 16 outros tratamentos médicos (grupo controle).

Os resultados mostraram que, após 10 anos, os pacientes nos estágios I e II apresentaram uma melhor resposta à Ozonoterapia, e essa resposta foi mais duradoura, com uma melhora alcançada a partir de 4 meses, o período mais curto para pacientes nos estádios II e IV. Após 20 anos de tratamento, 50,1% dos pacientes melhoraram seu campo visual, 31,1% permaneceram os mesmos e 18% seguiram o curso da doença. Em relação à acuidade visual, observamos que 37,5% dos pacientes melhoraram, 34,9% permaneceram estáveis e 27,6% continuaram o curso da doença. Recomenda-se a aplicação de terapia de ozônio a intervalos de seis meses, a fim de atrasar o curso da doença e manter as capacidades visuais. Não foram observados efeitos colaterais. A terapia com ozono é uma boa escolha terapêutica no tratamento de pacientes com RP aumentando sua qualidade de vida.

Retinitis Pigmentosa (RP) is characterized by bad night vision, decrease of visual field and/or acuity, with electroretinogram (ERG) diminished in amplitude and finally, non reproducible. Taking into account some of the ozone biological effects, as: improvement in the oxygen metabolism, increase in the cell energy, the immunomodulator capacity and enhancement of the antioxidant defense system the aim of this paper is to assess ozone therapy’s efficacy in these patients, treated twice a year during 20 years.

A controlled and retrospective clinical study was performed in 56 patients with Typical Retinitis Pigmentosa (non-associated), with sample homogeneity, in age, sex and stage of the disease, and with signed informed consent. Forty patients received ozone daily, by rectal way, during 20 sessions (at a concentration of 40 mg/L and a volume of 200 mL) as only treatment, with repetition of this cycle every 6 months, and 16 received other medical treatments (control group). Results showed that, after 10 years, patients in stages I and II had a better response to ozone therapy, and this response was more lasting, with an improvement attained as of 4 months, which is the shortest time period for patients in stages II and IV.

After 20 years of treatment, 50.1 % of patients improved their visual field, 31.1 % remained the same and 18 % followed the course of the disease. In respect to visual acuity, we observed that 37.5% of patients improved, 34.9 % remained stable and 27.6 % continued the course of the disease. It is recommended to apply ozone therapy at six-month intervals in order to delay the course of the disease and maintain the visual capabilities. No side effects were observed. Ozone therapy is a good therapeutic choice in the treatment of patients with RP increasing their quality of life.

Introduction Retinitis Pigmentosa (RP) is the name for a heterogeneous group of heredodegenerative retinochoroidal diseases of unknown origin, with variable gene expression.

Its average incidence ranges between 3.2 and 4.5 for every 10000 people in the world, therefore, being an important cause for blindness in the world . It is characterized by initially affecting visual cells and the pigment epithelial layer and by, afterwards, extending to all retinal and choriocapillaris layers.

Basically, there are two forms of presentation:

Typical ones, when degeneration begins in the rods, and atypical ones, when beginning in the cones. It can be found associated to other systemic and ocular diseases, where the presence of cataract, glaucoma, and vitreous and macular alterations can be noticeable. People suffering from the disease lose their visual field and/or visual acuity. Patients complain about night blindness and progressive reduction of the visual field, and can even initially present a ring scotoma and, finally, in gun barrel, being noticed that in very advanced stages, in some cases, there can be a loss of central vision. In this disease, electroretinogram (ERG) can appear abnormal or non recordable.

Within the physical examination of the eye, it can be observed waxen or pale disks, dimmed or very fine vessels and pigments in the form of osseous spicules in the peripheral means, initially, and, in the most advance stage, it can be distributed to the 4 quadrants. Diagnose is made by exams of visual acuity, visual field, eye fundus and ERG.

At their beginnings the retinal pigmentary epithelium cells start to:

• • Remodel its molecular structure and anatomical and histophysiological relations.
  • Adapt to new challenges imposed on them by the cell stress, producing this disease, but if the stress increases, an irreversible process begins to develop leading to a cell death.
  • Develop neuroplasticity mechanisms, depending on its capacity to obtain diverse growth factors and neurogenic elements, which are necessary in this process.

Hemodynamic studies carried on by researchers have demonstrated the following:

-Significant decrease in the blood flow

-Great decrease of vascular diameter.

-Increase in blood viscosity.

-Marked oxygen deficit in the retina.

-Deficit of the necessary nutrients for the metabolism of visual cells.

Normally, these cells need great quantities of oxygen from the choriocapillaris, which is closely related to the photoreceptors, ensuring normal functioning. However, histopathological studies have shown the choriocapillaris is atrophied and disappears within the affected retinian areas. Despite this, there are cell groups resisting prolonged stress, exhibiting a molecular and functional structure apparently normal, which allows them to survive and relate among them.

There is not yet a specific treatment to eliminate the cause for production of alteration in the gene. Notwithstanding, some countries have carried on different efforts in searching for therapeutic alternatives to improve the quality of live of these patients. There have been several therapeutic assays for the common formularies of RP. But none of them have demonstrated a detention of the degenerative process up to now.

It is necessary to continue research in methods to introduce, in the photoreceptors, any substance capable of prolonging the functional and anatomical condition of them, taking into account the genetic pattern mainly. At the moment, current treatments are mainly aimed at diminishing development of alterations provoked by the pathology in the retina.

In RP, a process to shorten the external photoreceptor segments is produced, initially caused by the incapacity to adequately use the opsins contributing to the external segment disk formation, redistributing these opsins to the internal segments, unleashing an immunological reaction. The incapacity of the retinal pigmentary epithelium cells to transport the waste elements from the photoreceptor produces:

Free radical formation.

-Changes in the photoreceptor metabolism

-Decrease of oxygenation and glutathione levels in the retinal pigment epithelium.

-Release of citotoxic and genotoxic aldehydes, derived from lipid peroxidation.

-Decrease of the subretinal space.

Taking into account the ozone’s biological effects as: improvement in the oxygen metabolism, increase in the cell energy, the immunomodulator capacity and increase in antioxidant defense systems, ozone therapy’s effectiveness, as only treatment in patients with typical Retinitis Pigmentosa diagnose treated for 20 years in six month intervals treatment cycle, was studied.

Patients and Methods It was carried out a controlled and retrospective study. This study was accepted by the Scientific Council and Ethics Committee of the Institution, following the principles of the Declaration of Helsinki (1997). All patients gave their informed consent, after receiving the adequate information of the study. The universe was made up of 56 adult patients of both sexes and of different ethnical origin who had been diagnose with Typical Retinitis Pigmentosa and were treated in the National Reference Center for Retinitis Pigmentosa, based in Havana City, Cuba. Forty patients received treatment with ozone therapy, daily (from Monday to Friday), applying, by rectal way, 200 mL of a mixture of gas composed of medical oxygen (O2) and O3 (generated by OZOMED equipments, Habana, Cuba) at a concentration of O3 of 40mg/L, during 20 sessions. This treatment cycle was maintained every 6 months during 20 years.

These patients were provided with antioxidant vitamins in intercycles of treatment with ozone therapy.

In the ozone group, patients were classified (10 in each stage) according to the stage of the disease (from I to IV), in accordance with the Cuban Classification of Retinitis Pigmentosa. Patients in stage I presented an initial ophthalmologic manifestation of their base eye disease with visual acuity from 0.6 to 1.0 and visual field with a discrete drop of the peripheral isopters. Patients in stage II had visual acuity between 0.3 and 0.5, with a visual field with pericentral ring scotoma. Patients in stage III presented visual acuity from 0.05 to 0.2 and visual field between 5 and 10 degrees. In this stage, some patients with incipient cataracts, macular alterations of dystrophic type or with glaucoma could be observed. Patients in stage IV presented visual acuity inferior to 0.05 and visual field lesser than 50. This classification was made taking these parameters found in the best eye

The control group was made up of 16 patients who received other medical treatments as: antioxidant vitamins, electro stimulus, dilating vessel medicaments and were allowed to evolve during 20 years.

 

Improvement Criteria

Visual field (VF), was carried out by Goldman perimeter (it was measured the V4 isoptera and the white stimulus, calculating the area in % and mm2) and visual acuity (VA), applying Snellen chart. It was considered a significant increase of the visual field area by ≥ 25% on the area of basal VF in at least 2 consecutive exams in the year, and in relation to visual acuity, an increase of VA > 2 lines of the Snellen chart.

Results and Discussion

Significant improvement was seen in the variables analyzed, though a group of patients followed the natural course of the disease and whose treatment had been varied according to the cause of this deterioration. It was observed that patients in stages I and II had a better response to ozone therapy and this response was more lasting in time, with result of a decrease of these effects improvement as of the 4 months, being this the shortest period in patients in stages II and IV.

In the cessation in the 10th year. It was observed that patients treated with ozone maintain, in relation to the visual field, improvement by 70 % and the 30 % remained the same. In respect to visual acuity, it was observed that 19.0 % of the patients improved, 68.0 % remained the same and 13 % continued the natural course of the disease, with the appearance of macular alterations and presence of glaucoma or cataract, as a typical characteristic of the patient whose disease has maintained its course.

After 20 years of treatment, 50 % of the patients improved their visual field, 31.1% remained the same and 18.8 % continued the course of his/her disease. Regarding visual acuity we noticed that 37.5 % of the patients improved, 34.9 % remained stable and 27.6 % continued the course of the disease.

A significant decrease (p=0.040) of the visual field in the control group in respect to the ozone group was observed. The visual field behaviour, for the 20 years of ozone treatment in comparison with the control group, is shown In. There is a slow down in the visual field in patients treated with ozone. This is indicative of an increase in the quality of life of these patients.

The main risk factor for the loss of the retinal ganglion cell (RGC) and its axons is the increase in the intraocular pressure (IOP) (Mechanical Theory), the bad perfusion of the head of the optic nerve (Ischemic Theory) or any hemodynamic ocular alteration above defensive levels of the optic nerve. It is also found the structural injury of the trabecular meshwork and of the juxtacanalicular trabecula, possibly associated an optic nerve ischemia, as well as the decrease in the perfusion with accumulation of oxytocins and glutamate activating the cell death programmed or apoptosis.

Peroxynitrite is considered as a putative cytotoxin, which has been implicated in the pathophysiology of a variety of processes. It should be pointed out that NO is the only known biological molecule generated in high enough concentrations under pathological conditions to compete and overcome the effects of endogenous SOD for superoxide. The use of i-NOSspecific inhibitor has to be careful because it can increase lipid peroxidation and tissue damage, as it has been referred in hepatic ischemia/reperfusion (I/R) injury. However, NO donor increased the activity of iNOS and decreased the hepatic injury, thus NO production has a beneficial role in hepatic I/R injury.

Also, it has to be considered that an excess of NO with a decrease in SOD increases peroxynitrite formation, with a damage effect. In the model of liver injury, ozone prime and activate the genes associated to NOS expression, which promotes NO formation in the required concentrations for protecting against liver I/R injury. Then, a modulation of NO, as ozone is able to produce, is necessary to achieve a positive result.

Therefore, it is important to preserve the RGC. Among strategies to prevent death of RGC and justification of the use of ozone therapy are: -An increase in the cAMP levels. Ozone oxidative preconditioning exerted protective effects against liver ischemia/reperfusion injury through activation ofA1 adenosine receptors.Adenosine has been preserved and nitric oxide (NO) level modulated by ozone playing a role in the pathways of cellular signaling which promote preservation of the cellular redox balance, mitochondrial function, glutathione pools, as well as the regulation of the nuclear transcription factor NF-kB and heat shock protein (HSP-70). Adenosine is a major component of vascular homeostasis playing an important role in regulating smooth muscle tone acting via cAMP-mediated cascades to induce vascular smooth muscle relaxation.

An increase of the antioxidant capacity. Ozone may induce an adaptation to oxidative stress or an oxidative preconditioning that under controlled doses, by means of a slight and transient oxidative stress, may stimulate the endogenous antioxidant mechanism, preparing the host to face physiopathologic conditions mediated by reactive oxygen species. This effect has been demonstrated in several papers.

The use of inhibitors of nitric oxide synthase (NOS) blocking the peroxynitrite formation. Ozone diminishes the peroxynitrite levels when incrementing activity of superoxide dismutase (SOD), which scavenges the superoxide anion (O2)- •And, therefore, the following reaction will be seen decreased:

-The use of antioxidants (to decrease lipid peroxidation). Ozone decreases lipid peroxidation, suggesting the preservations of the membrane integrity. There are several studies (preclinical and clinical) that confirm this ozone effect. -To minimize the apoptosis phenomenon. Ozone improves chronic ischemia, one of the causes for apoptosis.

Also, in the model of nephrotoxicity after cisplatin application, ozone reduced the increase in serum creatine levels and the renal necrosis, inducing a lesser decrease of the Bax expression (proapoptotic proteins) in cisplatin-treated kidneys. Bax is Bcl-2-like protein that binds and antagonizes the protective effect of Bcl-2 and BclxL, rendering cells more sensitive to death. In this sense, the ratio of expression of Bcl-2 or Bcl-XL to Bax appears to determine cell fate in an adverse environment [38]. Ozone reverted and protected from cisplatin-induced renal damage by modulation of the Bax protein expression, as it can be seen in the following reaction:

Conclusions

It is recommended the application of cycles of ozone therapy every 6 months to slow down the course of the disease and, hence, maintain visual capacities of our patients for the longest possible time, improving their quality of life. This campimetric response is transitory, being more significant in the first 4 months post treatment. The evolutionary stage of the disease influences in the response to treatment negatively, better results are obtained in the initial stages. Non adverse effect was observed during this 20 years of study.

 

Effect of ozone therapy on redox status in experimentally induced arthritis

M.Nabil. Mawsouf, Maha.M. El-Sawalhi, Hebatalla A. Darwish, Amira A. Shaheen, Gregorio Martínez-Sánchez, Lamberto Re

 

Resumen

Controlled ozone administration has been shown to promote an adaptation to oxidative stress by increasing endogenous antioxidant systems. In the present study, the effects of O2/O3 administration either prophylactically or therapeutically on the alterations of oxidant status in adjuvant-induced arthritis in rats have been studied. Seven groups of rats were used:

1) normal control group.

2) control arthritic group (21 days).

3) prophylactic ozone group: arthritic rats received fifteen intra-rectal applications of O2/O3 at 0.5, 0.7 and 1 mg/kg b.w. in a 5-6 mL volume starting one day before adjuvant inoculation and continued as five applications/week over 21 days.

4) oxygen group: received oxygen (vehicle of ozone) in a similar schedule to group 3.

5) control arthritic group (24 days).

6) therapeutic-ozone group: arthritic rats received 10 intra-rectal applications of O2/O3 at 0.5, 0.7 and 1 mg/kg b. w. in a 5-6 mL volume daily for 10 days starting fourteen days after adjuvant inoculatio.

7) oxygen-treated group: received oxygen in a similar schedule of group 6. The effect of O2/O3 administration was assessed by measuring: blood glutathione (GSH), erythrocyte glutathione peroxidase and catalase activities, serum levels of protein thiols (PrSH), malondialdehyde (MDA) and nitrite/nitrate (NO2/NO3), as well as serum ceruloplasmin activity (CP). The present study showed that adjuvant-induced arthritis in rats caused a significant (p<0.05) reduction in blood GSH, serum PrSH levels and erythrocyte antioxidant enzyme activities accompanied by a significant (p<0.05) increase in serum levels of MDA, NO2/NO3 and CP activity.

Ozone administration either prophylactically or therapeutically normalize blood GSH, serum PrSH and MDA levels and restored erythrocyte antioxidant enzyme activities. However ozone did not significantly (p>0.05) modify serum NO2/NO3 level in induced rat but significant (p<0.05) increase CP activity. So it could be concluded that O2/O3 oxidative preconditioning / postconditioning effectively modulate the antioxidant/oxidant balance associated with adjuvant arthritis model in rats.

Introduction

Ozone therapy as a complementary medical approach has been known for more than four decades. The main areas where that kind of treatment could be useful include resistant infectious diseases, autoimmune diseases, neurodegenerative diseases, orthopedic pathologies and vascular disorders1 . With the advent of precise medical ozone generator, currently ozone therapy have been marked with growing recognition of the use of appropriate and judicious doses making this therapy useful with valuable biological effects2.

The use of calculated, standardized ozone doses has been found to induce a transient acute oxidative stress condition which is not deleterious but is capable of eliciting a multiple useful biological responses. The effect could be seen in activation of antioxidant defense system, improvement of circulation, oxygen delivery, and trophic processes in tissues as well as enhancement of autocoids, growth factors and cytokine release3.

Several experimental studies have demonstrated that controlled ozone administration could bring about a state of ozone oxidative preconditioning (O3OP) or adaptation to oxidative stress, preventing the damage caused by reactive oxygen species (ROS) generated in various experimental models. These include; carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity4, hepatic ischemia-reperfusion injury5, cisplatin-induced acute renal failure6 , chronic renal failure induced by subtotal nephrectomy7 and streptozotocin-induced diabetes in rats8.

More recently is also demonstrated that the oxidative postconditioning can be cytoprotective in different experimental model of diseases9 , 10 . Experimental arthritis induced by adjuvant is an experimental model of systemic inflammatory autoimmune disease that shares many features with human rheumatoid arthritis. It involves most of the joints and associated tissues11 . Although the etiology of rheumatoid arthritis is not fully elucidated, autoimmune destruction of the affected tissues plays a pivotal role in the incidence and progression of the diseases12. In addition excessive generation of free radicals and formation of lipid peroxide in target tissues of inflammation are, also, considered as the most common factors implicated in tissue damage in rheumatoid arthritis13 and experimental arthritis14 .

Thus, a state of oxidative preconditioning such that achieved with controlled ozone therapy may potentially be able to readjust the redox imbalance in adjuvant arthritis and attenuate the progression of the disease. The aim of the current work was to investigate the role of ozone, as prophylactic or therapeutic agent, in correcting the redox imbalance and the biochemical changes associated with adjuvant-induced arthritis in rats.

Materials and Methods Animals:

Adult male albino rats of Wistar strain, 200-250 g weight were obtained from Egyptian Organization for Biological Products and Vaccines (Cairo, Egypt). Rats were housed in plexiglass cages, maintained in an air-filtered and temperature-conditioned (20 oC – 22 oC) room with a relative humidity of 50 % – 52 % and under an artificial light/dark cycle of 12 h. Animals were fed with standard laboratory chow and water ad libitum. Procedures involving animals and their care were conducted in conformity with the institutional guidelines that are in compliance with national and international (EEC Council Directive 86/ 609, OJL 358, 1, 12 December 1987; Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, US National Research Council, 1996) laws and policies. Chemicals: Complete Freund`s adjuvant (Difco laboratories, Detroit, USA) was used for induction of arthritis in rats. It consists of 0.05% heat killed Mycobacterium butyricum suspended in mineral oil. All other chemicals were of analytical pure grade supplied from Sigma-Aldrich St. Louis (USA). Ozone generation: Ozone was generated just before applied by ozone generator system [EXT120-T] (Longevity-resovces Inc., Canada – ETL approved for proven quality and safety). Ozone obtained from medical grade oxygen represented about 0.4-0.5 % (1 µg/mL – 120 µg/mL) of the gas mixture. The ozone concentration was measured by using a build-in UV spectrophotometer at 254 nm.

Experimental design

Induction of adjuvant arthritis: It was induced in rats by a single subcutaneous injection of 0.25 mL of complete Freund`s adjuvant into the palmer surface of the right hind foot pad15. The peak of adjuvant polyarthritis was reached after 14 days from adjuvant inoculation.

Ozone treatment

Ozone was given by intra-rectal application using 20 mL silicone-coated disposable syringe and rectal catheter. Fixed volumes of the O3/O2 mixture were administered according to the animal weight so as to reach a final O3 dose. This route of administration was considered as most useful and easy procedure in rats16.

For studying the prophylactic or therapeutic effects of ozone on the adjuvant arthritis model, the arthritic rats were divided equally into six groups of eight rats each. The first (prophylactic O3/O2 group) received 15 intra-rectal applications of O3/O2 over three weeks starting one day before adjuvant inoculation. O3/O2 mixture was given as five applications per week.

It was started with a relatively low dose of ozone as 0.5 mg/kg b.w. /day in the first week, increased to 0.7 mg/kg b.w./day in the second week and ended with 1 mg/kg b. w./day in the third week. The volume of O3/O2 mixture administered was 5-6 mL/rat according to the animal weight. The second arthritic group received oxygen only (as a vehicle for ozone) in a similar schedule to the first group. The third group of arthritic rats was kept without treatment throughout 21 days and served as a control (arthritic 21 days) for the above two groups.

The fourth arthritic group (therapeutic ozone group) received 10 intra-rectal applications of O3/O2 mixture starting fourteen days after adjuvant inoculation. The treatment was started by a daily dose of 0.5 mg/kg b.w. for 3 days, followed by 0.7 mg/kg b.w. for another 3 days and ended with one mg/kg b.w. for 4 days. The volume of O3/O2 mixture administered was 5-6 mL/rat according to the animal weight.

The fifth arthritic group received oxygen only 14 days after adjuvant inoculation in a similar way to the fourth group. The sixth arthritic group was kept without treatment throughout 24 days and served as a control (arthritic 24 days) for the fourth and fifth groups. A group of normal rats left without any treatment and served as a control (non arthritic) group for all the above groups. All the groups were kept under the same conditions during the whole experiment.

 

At the end of the experimental periods, the animals were sacrificed and the blood was collected in heparinized and non-heparinized tubes, an aliquot of heparinized blood was used to assay glutathione (GSH)17. Another aliquot of heparinized blood was lysed directly in ice cold distilled water (5% v/v) and used for the determination of catalase activity (CAT; EC 1.11.1.6)18. The remaining heparinized blood was centrifuged for 10 min at 3000 g for the separation of red cells used to measure the glutathione peroxidase activity (GPx; EC 1.11.1.9)19. On the other hand the non-heparinized blood was allowed to clot and the separated serum were used for the estimation of malondialdehyde (MDA)20, 21; protein thiols (PrSH)22 and nitrite/nitrate (NO2/NO3) levels23 as well as ceruloplasmin (CP) activity24.

Statistical Analysis

Initially the OUTLIERS preliminary test for detection of error values was applied as a first step in the statistical analysis. After this, the homogeneity of variance test (Bartlett-Box) was used. Values are given as means ± SD. The level of statistical significance was taken at, using one way ANOVA followed by Tukey-Kramer`s multiple comparisons test to judge the difference between various groups. The SPSS software package version 10, 2000 was used for all statistical analyses.

Results

Blood antioxidant levels in arthritic rats subjected to prophylactic and therapeutic intra-rectal application of ozone: The results for these parameters are shown in table 1 and 2. Data demonstrated that 21 or 24 days after adjuvant inoculation, arthritic rats exhibited a significant reduction in blood GSH and serum PrSH levels. The reduction was extended, also, to include GPx and CAT activities as compared to the normal values.

Intra-rectal application of O3/O2 as prophylactic therapy (table1), caused a significant ) elevation in blood GSH, serum PrSH, erythrocyte GPx and CAT activities as compared to the values present in arthritic animals. In the same way, therapeutic intra-rectal application of O3/O2 mixture (table 2) successfully restored these blood antioxidants to levels approaching or exceeding the normal values.

Serum levels of MDA and NO2/NO3 as well as CP activity in arthritic rats subjected to prophylactic or therapeutic intra-rectal application of ozone: As indicated in table 3 and 4, adjuvant-induce arthritis caused a significant ) increase in serum levels of MDA, NO2/NO3 and CP activity after both 21 or 24 days of adjuvant inoculation. These data, demonstrated that prophylactic intra-rectal application of O3/O2 mixture (table 3) normalize serum MDA level of arthritic induced rats, but failed to exert any change in serum NO2/NO3 level of these rats.

Meanwhile, O3/O2 pretreatment provided a further elevation of serum CP activity to a level exceeding the arthritic values. Therapeutic intra-rectal application of O3/O2 mixture (table 4) caused a significant reduction in serum MDA level to approach the normal value, together with further elevation of CP activity than the arthritic levels. Meanwhile serum NO2/NO3 of arthritic rats was not significantly changed in response ozone treatment.

The results clearly showed that intra-rectal application of O2 (as a vehicle of O3) in prophylactic and therapeutic treatment did not affect any of the measured parameters compared to the values of arthritic rats.

Discussion

The involvement of ROS in chronic inflammatory conditions such as rheumatoid arthritis and adjuvant induced-arthritis is well documented. ROS once generated provoke deleterious effects on various cellular components, among which are membrane lipids that are extensively subjected to peroxidation. Aggravation of arthritis was reported to be associated with enhancement of lipid peroxidation.

In the present study, overproduction of ROS in adjuvant arthritis model leads to a considerable oxidant stress as indicated by a high serum level of MDA, a marker of lipid peroxidation, as well as consumption of blood antioxidants such as GSH and PrSH. The marked increase in serum MDA was observed in arthritic rats in line with our results; in arthritic rats model, and in rheumatoid arthritis patients. Increased lipid peroxide in arthritic rats is exacerbated by the decline in blood antioxidants. Similar results about GSH were reported in arthritic rats model and rheumatoid arthritis patients respectively.

In the same line, a marked decrease in GSH concentration was observed in the joint articular cartilage of arthritic rats . The reduction of GSH might be attributed to the increased consumption for counteracting oxidative stress during inflammation. Increased oxidative stress was reported to enhance the formation and efflux of glutathione disulfides. Moreover, the observed reduction in serum PrSH is in line with previous studies. Such reduction could be attributed to the excessive consumption by peroxide and/or to a low serum albumin reported in other studies, since the greatest majority of serum SH (85- 90%) are found in albumin.

In the current investigation, the decline in blood antioxidants was, also, extended to include erythrocyte GPx and CAT activities. The observation is consistent with previous manuscript. Adefective antioxidant enzyme machinery had been observed in erythrocytes of rheumatoid arthritis patients and in liver, kidney and heart of adjuvant arthritic rats. The increased production of superoxide anion, H2O2 and hydroxyl radicals demonstrated by Ramprasath et al. (2005) might be responsible for inhibition of GPx and CAT activities.

The role of NO and other reactive nitrogen species in inflammation has not been conclusively established. However, evidences for the implication of NO in the process of inflammation and that NOS inhibitors possess potential-anti inflammatory effects have been presented.

The present results revealed a significant increase in serum NO level in arthritic rats (measured as total NO2/NO3). Such result is in line with previous reports, in arthritic rats and in rheumatoid arthritis patients. The over expression of iNOS in arthritis might result from increased production of IL- 1 and other pro-inflammatory cytokines characteristic of that disease.

Moreover, a major systemic event that happens in the rat following the induction of inflammation is the marked change in the level of serum CP, an acute phase protein. In the present study, a marked elevation in serum CP activity was observed. Such elevation is consistent with previous observations, in arthritic rats. The increase in serum CP activity might be due to increase in its hepatic synthesis triggered by increased secretion of IL-1, epinephrine and glucocorticoids. Furthermore, such an increase in CP activity has been reported to have a role in down regulating the inflammatory mediators and inhibiting the lipid peroxidation.

In the present study, prophylactic intra-rectal application of O2/O3 to arthritic rats over three weeks exerted protective effects on some important blood antioxidants (GSH, PrSH, GPx and CAT) and preserved them to pre-arthritic values. The present data, demonstrated that therapeutic intra-rectal application of O2/O3 for 10 days after development of adjuvant arthritis attenuated the reduction in blood antioxidants and restored the levels of these defense constituents to values close to or above the normal ones.

Moreover, these stimulant effects of O2/O3 therapy on blood antioxidants were accompanied by a decrease in serum MDA level to reach the normal levels. These positive experimental observations could be explained at the light of the ozone abilities to up-regulate the antioxidant system, a state reached under controlled use of O2/O345. Ozone post or preconditioning is analogous to other phenomena such as ischemic preconditioning, thermal preconditioning, chemical preconditioning48, ischemic protconditioning. All of these processes have in common that a repeated and controlled stress is able to provide protection against a prolonged and severe stress.

A point that should not be overlooked is that O3 adaptation caused by judicious use of O3 is due to the fact that O3, instantaneously reacts with biomolecules generating ROS, among which are H2O2 and lipid peroxidation products (LOP). These molecules can elicit the up-regulation of antioxidant enzymes such as SOD, GPx, GSH-reductase and CAT. In bone marrow cells, particularly during erythrogenesis, submicromolar concentrations of LOP can up-regulate the synthesis of antioxidant enzymes2 .

Interestingly, Iles and Liu50 have demonstrated that some LOP by inducing the expression of glutamate cysteine ligase cause an intracellular increase of GSH. These aforementioned findings might account for the generation of biochemically improved erythrocytes during prolonged O3 therapy. Erythrocytes have been shown to respond to O3 therapy with activation of glycolysis and pentose phosphate pathway.

In the current study, up-regulation of erythrocytes GPx and CAT by O2/O3 might be responsible for the preservation of blood GSH and serum PrSH from oxidation by ROS in arthritic rats. Furthermore, the reported activation of pentose phosphate pathway might play a role in restoring GSH level from its oxidized form.

On the other hand, prophylactic and therapeutic rectal applications of O2/O3 therapy provided further elevation of serum CP activity than the arthritic levels (tables 3 and 4). That effect could be explained on the basis that O3 acts as a mild enhancer of immune system through activation of gene/regulatory nuclear factor kappa B (NF-κB) by H2O2, one of the major decomposition products of O3. Activation of that transcription factor switches on some genes that are responsible for the synthesis of several proteins, among which are the acute phase reactants and numerous interleukins. The increased CP activity might reflect improved antioxidant status of animals subjected to O3 therapy. Moreover, O3-induced increase in CP activity could be beneficial to prevent against oxidative stress observed in adjuvantinduced arthritic rats.

In the present study, the remarkable enhancement of antioxidant status of arthritic rats has provided a protection against ROS and suppressed the process of lipid peroxidation leading to normalization of serum MDA level. Another point which should be considered in is the inability of O3 therapy to change the serum level of NO than was raised the arthritic induced rats; such effect might be related to the stimulatory effect of O3 on blood GSH. It has been stated that NO readily reacts with GSH and other cysteine containing compounds forming S-nitrosothiols with half lives of 5-50 min, in contrast to the very short half-life of NO53. Thus, formation of S-nitrosothiols in response to O3 therapy may allow more pharmacological effects at distant sites.

Conclusions

It can be concluded that O2/O3 pre or postconditioning effectively improved the antioxidant/oxidant imbalance associated with adjuvant arthritis in rats. These results potentially support the use of ozone therapy as a complementary medical approach in rheumatoid arthritis. However, further studies are needed to verify the benefit of O3 therapy in rheumatoid arthritis at biochemical and clinical levels. Table 1. Blood antioxidant levels in arthritic rats subjected to prophylactic intra-rectal application of O3/O2 mixture.

Adjuvant hyperbaric oxygen and ozone therapy in the treatment of chronic leg and foot ulcers (pilot clinical study)

Ahmed M. Fathi Fathi, M.Nabil. Mawsouf

 

Resumen

This pilot study describes the clinical effects of Adjunctive Hyperbaric Oxygen Therapy (HBOT) and Ozone Therapy in the treatment of chronic ulcers most of which did not respond to standard wound care and conventional methods of therapy and the patients were threatened by amputation. HBO and Ozone Therapy increased the healing rate of these ulcers, and avoided amputation. Adjuvant HBO and Ozone Therapy showed effective adjunctive therapy and we recommend a Randomized Controlled Trial to prove that effect.

Introduction

Leg ulcers are a common problem thought to affect about 1% of the population at some point in their lives and about 1.5 per 1000 people at any one time. Leg ulcers are more common in women than men, and the prevalence increases with age. Venous disease is present in the majority of cases; peripheral vascular disease may coexist or may be the main cause of an ulcer. Other disease processes may also be involved, such as diabetes or rheumatoid disease. Leg ulceration is chronic, and an ulcer may be present for months or years without healing.

After healing, recurrence rates are high. There are many approaches to management, with large variations in practice at local and international levels. (1) Hyperbaric Medicine is the fascinating use of barometric pressure for delivering increased oxygen dissolved in plasma to body tissues. Hyperbaric oxygen therapy (HBOT) is a form of treatment in which a patient breathes 100% oxygen at higher than normal atmospheric pressure that is greater than 1 atmosphere absolute (ATA). Therapy is given in special therapeutic chambers, which were earlier used primarily to treat illnesses of deep sea divers. (2, 3, 4) Ozone (O3) is a strong antioxidant. (5)

Ozone can exert protective effects by oxidative preconditioning, stimulating and/or preserving the endogenous antioxidant systems and by blocking the xanthine / xanthine oxidase pathway for reactive oxygen species generation, as demonstrated in studies of the damage induced by carbotetrachloride (CCL4) or by hepatic and renal ischemia-reperfusion. (6, 7, 8, 9) Ozone has been used with good results in the treatment of patients with diabetic foot, because of its germicidal properties and its influence on the processes of oxygen metabolism, and other effects.

Aim of the Work

The present pilot study aims to clinically evaluate the effectiveness of two different modalities of OxyTherapy; Hyperbaric Oxygen and Ozone Therapy in the treatment of chronic ulcers.

Patients and Methods

This pilot study represents experience in the management of 15 cases, who had clinically diagnosed leg or foot ulcer, treated throughout the period between 2007 and 2008.

Patients were grouped into three different groups according to the severity of the case and treatment modality; Hyperbaric Oxygen Therapy; 5 patients; Ozone Therapy; patients; and Combined Modality Therapy, 5 patients.

Methods:

Diagnosis/Assessment; medical history, physical examination, ulcer examination, clinical investigations, ankle brachial pressure index (ABPI), investigations to exclude other causes, wound measurement, identifying hard-to-heal ulcers.

Management of wounds: the general rules to treat wounds include the accurate diagnosis and classification of the Wound, the vascular Status (ABPI), good control of blood glucose, correction of underlying cause, correction of malnutrition, treatment of Infection, debridement: of necrotic tissue and underlying osteomyelitis, obliteration of dead space as a result of debridement, .off-loading, wound care, and finally adjuvant therapy.

Hyperbaric Oxygen Therapy: Following the protocol adapted by Jain KK (12) , sessions was done in the Multiplace Baramed 6/2/6 Hyperbaric Chambers, ETC Inc., USA. Oxygen was inhaled from a helmet or a mask at a pressure of: 2- 2.5 ATA (atmospheric pressure, equals 10 – 15 meters under Sea Surface).

Sessions were initially done on daily basis (6 sessions/ week). Intermittent, each session will be 90- 120 minutes, with rest every 20 sessions. The first clinical evaluation was done after 5 sessions.

Ozone Therapy: Following the protocol adapted by Renate Viebahn-Hänsler (2007) (13) , patients to be treated daily with ozone (generated by an ozone generator, Ozonosan Alpha 1, Germany), by rectal insufflation as systemic therapy (with an ozone concentration up to 35 µg), and local treatment by covering the lesion by a plastic bag, filled with ozone at a concentration of 60 µg, decreased up to 20). The first clinical evaluation was done after 5 sessions. With improvement, the frequency of sessions was decreased gradually.

Combined: The combined modality was achieved by systemic HBOT and Local O3 as described above. For local treatment; Standard wound care, topical application of ozonated olive oil and wound dressing.

Results

Ten patients (66.7%) had type 2 diabetes mellitus of them 8 (53.3%) were IDDM. The mean age was 53.3 ± 9.86 years (37- 68 years). The sex distribution was 10 males (66.7%) and 5 females (33.3%), with a ratio of 2:1. In addition, 10 patients (66.7%) were threatened by amputation. The main data of the studied patients is shown in table 1.

Outcome

Successful results were achieved in 11 (73.3%) out of the studied 15 patients. The most effective modalities were combined modality 4 out of 5 (80%), the ozone therapy 4 out of 5 (80%), the HBOT 3 out of 5 (60%). Considering the severity of cases, combined modality was the most effective but with more selection of cases which suffered more from ischemia, infection and/or edema. Ozone therapy was very effective, easier to apply with less complication and higher patient compliance.

A striking feature was that out of the 10 patients threatened by amputation, seven (70%) patients had their limbs saved.

Clinical case treated with HBOT:

Male, 38 yrs, smoker not diabetic. complaining of recurrent left leg ulcer since 1 month provoked by Trauma, then infected wound, gradually increased in size. Similar ulcer developed in the same place since 10 years and lasted for 3 Years.

Clinical case treated with ozone therapy:

A 65 years male IDDM patient was diagnosed as Rt diabetic foot gangrene; Wagner 4 classification. The main problem was diabetic foot, Infection and neuropathy. He was recommended for Right below knee amputation. He was unfit for HBOT because of his heart problem. He received ozone therapy daily (Topical 80→60 µg/ml) and rectal insufflation 15 – 35 µ/ml 250 – 300 ml for 5 days followed by surgical debridement.

Ozone therapy continued 3 sessions / week for seven weeks then twice / week for four weeks and finally once / week for 12 weeks. This was followed by using ozonated olive oil only. The maximum concentration for rectal insufflation was 35 µ/ml and the volume was 300 ml. Topical ozone concentration dropped gradually from 80 µ/ml till 20 µ/ml.

Clinical cases treated with combined HBOT and ozone therapy: A 55 years female patient with uncontrolled IDDM and ulcer of the left heel. She was suffering from pains of the left leg and foot. She passed serial debridements and unfit for re-vascularization. She was planned for below knee amputation. There was complete occlusion of tibialis posterior artery and occluded segments of tibialis anterior and superficial safenous arteries.

There was left leg ischemia (ABPI 0.65), severe diabetic foot infection, gangrenous arterial Ulcer of the Heel. The surgical decision was to control diabetes, ischemia, and infection. This to be followed by debridement, grafting (plastic surgery) and proper foot wear. The oxy-therapy protocol was to start with HBOT till control of ischemia and infection by 20 sessions daily; 6 days / week. This is to be followed by topical ozone three sessions / week (60 µg/ml) till wound is clean; then three sessions / week (40→20 µg/ml) to promote healing. The total therapy was 23 sessions HBOT and 37 sessions topical ozone in a four month period.

Another case of 68 years male, NIDDM, smoker with severe pains of the left leg and foot. He suffered from intermittent claudications and was unfit for revascularization. There was a pressure ulcer of the left heel and left superficial safenous artery occlusion.

Discussion HBO promotes wound healing by counteracting tissue hypoxia and is a valuable adjunct in management of ischemic, infected, and non-healing wounds. (12) It is generally accepted that correction of woundhypoxia is required to provide enough O2 that would support growth of regenerating tissues. (14)

Rationale of HBO for ulcers based on the hypoxia theory has been a matter of controversy, between authors who do not recommend the use of HBOT in venous ulcers; reporting that the role of HBOT seems very limited, and that reported successful cases would heal without the need for HBO, (15) or reporting that it is difficult to justify such an expensive, ineffective, complication-prone treatment modality for problem extremity wounds. (16)

Several studies reported favorable results in treating venous ulcers with HBO. (17, 18) Specifically, two Double-Blind, Randomized-controlled studies; the first has significantly demonstrated an improvement in venous stasis ulcers that showed no response to standard wound care. (19) The second concluded that hyperbaric oxygen enhanced the healing of ischemic, non-healing diabetic leg ulcers and may be used as a valuable adjunct to conventional therapy when reconstructive surgery is not possible. (20)

On the other hand, authors supporting its use only in extraordinary circumstances as a useful adjunct in the treatment of some life- or limb-threatening situations where it can be cost effective. (21) Also, Jain et al, 2004 reported that HBO will remain an important adjunct to wound healing but its role needs to be redefined. (12)

Conclusions

Oxy-Therapy is a beneficial adjuvant therapy that:

• Accelerates the rate of wound healing,
• Preserves a functional extremity,
• Reduces the need for Amputation, and
• Increases the rate of complete healing of bad ulcers on long-term therapy

Ozone Therapy:

• Highly effective treatment of bad healing ulcers
• Improves some systemic disorders present in those patients
• Enhances the sense of wellbeing

Hyperbaric Oxygen Therapy:

• Valuable for treating Selected cases of diabetic foot complications and impaired wound-healing. (Hypoxic).

Combined Modality

• More beneficial in Selected cases (Hypoxia, infection, edema)
• Costly

Recommendations

From this pilot study we conclude that Adjuvant HBO and Ozone Therapy increased healing rates of chronic leg ulcers which did not respond to standard wound care and conventional methods of therapy, even in the presence of significant and severe co morbidities and challenges.

We also support many recommendations that the role of HBOT and Ozone Therapy should be redefined by good randomized controlled studies to improve the level of evidence supporting their use in the management of venous ulcers and the cost effectiveness of its use.

Factores de crecimiento derivados de plaquetas y sus aplicaciones en medicina regenerativa. Potencialidades del uso del ozono como activador

Growth factors derived from platelet and its applications in regenerative medicine. Potential use of ozone as activator

Adriana Schwartz, Gregorio Martínez-Sánchez, Lamberto Re

Abstract

A newer treatment, autologous platelet-rich plasma (PRP), represents a greater similarity to the natural healing process as a composite of multiple growth factors, is safe due to its autologous nature, and is produced as needed from patient blood. PPR is an concentration of platelets and growth factors, including transforming growth factor-beta (TGF-b), vascular endothelial growth factor (VEGF), and platelet derived growth factor (PDGF). The enhancement of tissue healing by the placement of supraphysiologic concentration of autologous platelets at the site of tissue injury or surgery is supported by basic science and clinical studies.

Due to the increased concentration and release of these factors, PPR can potentially enhance the recruitment and proliferation of stem cells and endothelial cells. Ozone can promote platelet aggregation and release of grow factors with both mitogenic and chemotactic properties. In addition to use in the treatment of chronic skin and soft tissue ulcerations, application of this method include periodontal and oral surgery, maxillofacial surgery, orthopedic and trauma surgery, cosmetic and plastic surgery, spinal surgery, heart bypass surgery, and burns. A better understanding of platelet function and appropriate clinical use is essential in achieving the desired outcomes of platelet-rich concentrate in clinical applications.

Sugerencia sobre cómo citar este artículo: Schwartz, A. Martínez- Sánchez, G. Re, L. (2011). Factores de crecimiento derivados de plaquetas y sus aplicaciones en medicina regenerativa. Potencialidades del uso del ozono como activador. Revista Española de Ozonoterapia. Vol.1, nº 1, pp. 54-73.

Resumen

Los tratamientos que emplean el plasma autólogo rico en plaqueta (PRP) mimetizan los eventos que se suceden durante el proceso fisiológico de cicatrización debido a la liberación de diversos factores de crecimiento. Al ser autólogo, la seguridad del procedimiento es alta y la cantidad requerida se obtiene de la sangre del propio paciente. El PRP es un concentrado de plaquetas y factores de crecimiento que incluye: el factor transformante beta (TGF-b), factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) y el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) entre otros. La potenciación del mecanismo de cicatrización inducido por concentraciones supra-fisiológicas de plaquetas autólogas en el tejido dañado o zona quirúrgica ha sido demostrado tanto es estudios básicos como clínicos.

Debido a la alta concentración y liberación de estos factores, PRP pueden potencialmente incrementar el reclutamiento y proliferación de células madres y endoteliales. El ozono promueve la agregación plaquetaria y la liberación de factores con propiedades mitogénicas y quimiotácticas. Además de ser útil en el tratamiento de úlceras crónicas y de tejidos blandos, otras aplicaciones de este método involucran: cirugía oral y periodontal, cirugía maxilofacial, cirugía ortopédica y traumatología, cirugía plástica y cosmética, cirugía de columna, cirugía cardiovascular y quemaduras. Un conocimiento más profundo de las funciones plaquetarias y su empleo apropiado desde el punto de vista clínico es fundamental para arribar a un uso óptimo desde el punto de vista terapéutico.

Introducción

El primer factor de crecimiento fue descubierto por la neurofisióloga italiano-judía Rita Levi en 1948 quien comparte el premio Nobel de medicina junto a Stanley Cohen en 1986. Fue denominado Factor de Crecimiento Nervioso (NFG). Desde 1990 se conoce que la regeneración de tejidos blandos, heridas y huesos depende de la acción de diferentes componentes sanguíneos (fibrina, fibronectina, factores de crecimiento entre otros) y que su presencia en elevadas concentraciones puede alterar o acelerar este proceso. 6 El uso de concentrados de plaquetas para acelerar el proceso de cicatrización fue descrito por primera vez en 1997.

Las plaquetas contienen grandes cantidades de factores de crecimiento que tiene un papel trascendental en el proceso de cicatrización, como el factor de crecimiento derivado de plaquetas AB (PDGF-AB), el factor de crecimiento trasformador beta (TGF-b) y el factor de crecimiento vascular (VEGF) entre otros que son capaces de estimular la proliferación celular, la quimiotaxis, la remodelación de la matriz extracelular y la angiogénesis.

Las plaquetas son principalmente conocidas por su papel en el proceso de hemostasia en el cual contribuyen a evitar la pérdida de sangre en las zonas vasculares heridas. Para llevarlo a cabo, las plaquetas se adhieren, se agregan y forman una superficie pro-coagulante, que provoca la generación de trombina y la formación de fibrina. La formación de un hematoma o un coagulo inicia la cascada de cicatrización. La formación de un coagulo puede iniciarse por una ruta intrínseca o extrínseca.

La vía intrínseca se activa por un daño o alteración de la propia sangre, mientras que la vía extrínseca se inicia cuando la sangre entra en contacto con factores ajenos a la sangre (e.j. tejidos dañados). Ambas rutas involucran una cascada de eventos, que aunque se inician de manera diversa, tienen puntos de convergencia en las etapas finales. Las plaquetas son las células liberadoras de las proteínas esenciales y necesarias en la ruta de la formación del coagulo.

El ozono promueve la agregación plaquetaria y la liberación de factores de crecimiento provenientes de las plaquetas. 14,15 La activación de plaquetas con ozono puede ser útil en el tratamiento de úlceras crónicas y de tejidos blandos, la cirugía oral y periodontal, cirugía maxilofacial, cirugía ortopédica y traumatología, cirugía plástica y cosmética, cirugía de columna, cirugía cardiovascular y quemaduras. El presente trabajo tuvo como objetivo hacer una revisión de los antecedentes, estado actual y perspectivas de los tratamientos basados en el uso de PRP, además de los distintos protocolos que aplican PRP activados con ozono.

El Plasma Rico en Plaquetas (PRP) se define como la porción de la fracción de plasma de sangre autóloga que tiene una concentración de plaquetas superior al valor basal. 13 El PRP no solo contiene plaquetas, sino que además está formado por: plasma, leucocitos, factores de crecimiento, proteínas de secreción y todos los componentes de la cascada de coagulación.

Materiales y Métodos

La búsqueda y localización de la información, incluyó una revisión de artículos científicos en la base de datos MEDLINE, entre los años 2000-2011, para lo cual se utilizaron en lo fundamental los descriptores siguientes: ozono, plasma rico en plaquetas, plaquetas y factores de crecimiento derivados de plaquetas. Se localizaron y analizaron las fuentes de información primaria (artículos originales). La búsqueda bibliográfica incluyó artículos científicos de revisión y de resultados experimentales.

Aspectos estructurales de las plaquetas

Las plaquetas son células sanguíneas que proceden del megacariocito, célula que prolifera y madura en la médula ósea bajo la influencia de la trombopoyetina. La fragmentación de su citoplasma da nacimiento, a nivel del seno vascular a las plaquetas, que son células que carecen de núcleo y no pueden replicarse. Circulan en la sangre en forma de disco biconvexo (discocitos) de aproximadamente 3 mm2 de diámetro, 4 – 7 mm3 de volumen y 10 pg de peso. Poseen carga eléctrica negativa en su superficie. Su concentración normal en la sangre es de 150 •106/mL a 350•106/mL y su tiempo de vida media en sangre es de 5 a 10 días .

La membrana externa constituye una bicapa lipoproteica con glicoproteínas que funcionan como receptores de los agonistas fisiológicos de las plaquetas (ADP, TXA2, trombina), proteínas de adhesión (fibrinógeno, fibronectina, laminina, trombospondina, vitronectina, factor de von Willebrand [vWF]) y para ligandos fibrosos como el colágeno, además, posee enzimas importantes para el funcionamiento celular y fosfolípidos. Es responsable de la interacción de la célula con el medio circundante a través de receptores entre las que figuran las integrinas las cuales se caracterizan por enlazarse a proteínas que tienen la secuencia arginina-glicina-aspartato (e.j: fibrinógeno, fibronectina, vitronectina, factor de von Willebrand, colágeno).

Las integrinas más estudiadas han sido GPIIb/IIIa y la GPIb/IX. La GPIIb/IIIa ocupa una gran proporción de la superficie plaquetaria (~15 % de la proteína total de la membrana y 3 % de la célula). Hay de 3 a 8 réplicas en la plaqueta en reposo. Es un heterodímero de 228 kDa, dependiente de calcio, cuyas subunidades a y b son codificadas por genes diferentes. La mayor proporción de esta glicoproteína es extracelular y dispone de 2 segmentos transmembrana y 2 cortos segmentos citoplasmáticos formados por los extremos C terminales. En la plaqueta en reposo se halla en forma de monómero, ya que la asociación de las subunidades requieren calcio extracelular, que se enlaza a la subunidad IIb.18

La GP Ib/IX es un heterodímero formado por la asociación de las GP Ib y IX. La GPIb consta de una cadena a y una b enlazadas por puentes disulfuro. Tiene regiones extracelulares (~40 nm), que garantizan la interacción con los ligandos vWF y trombina), submembrana y citoplasmáticos, que actúan como anclaje del complejo a la célula. Esta glicoproteína es rica en leucina. Después de la GPIIb/IIIa es la mayoritaria en la membrana de la plaqueta (1 – 3 •104 moléculas /plaqueta). Las subunidades GP1 a y b y la GPIX son codificadas por genes diferentes, localizados en cromosomas diferentes. La región extracelular posee los dominios de identificación de la trombina y el vWF.

Las diferentes porciones de este complejo tienen una función: la región extracelular facilita el acceso al subendotelio y la interacción con trombina y vWF; la región intracitoplasmática une los dominios funcionales extraplaquetarios con el citoesqueleto de actina; la región transmembrana actúa como anclaje de la glicoroteína en la membrana plaquetaria.

El citoplasma contiene partículas de glucógeno diseminadas o aglomeradas que constituyen la fuente energética de esta célula. Contiene ribosomas en muy pocas cantidades, fundamentalmente en las células jóvenes, lo que concuerda con la casi nula actividad de síntesis proteica. Soporta, además, los microtúbulos que aparecen en forma de circunferencia, ubicados de manera concéntrica y que mantienen la forma discoide de la célula y garantizan su resistencia a la deformación.

El citoesqueleto es un gel viscoelástico que contiene filamentos de actina entrecruzados, conectados a la GPIb por proteínas de unión de actina. Tiene como funciones: a) la regulación de las propiedades de la membrana, tales como sus contornos y estabilidad, junto a los microtúbulos propicia el mantenimiento de la forma de la plaqueta en reposo, b) mediación de la distribución lateral de las glicoproteínas receptoras en la membrana, c) constituyen una barrera para la exocitosis. Su alteración puede llevar a la fragmentación del citoplasma formando micropartículas.

El gel contractil está formado por largos filamentos de actina enrejados, conectados con el citoesqueleto submembranoso y miosina que se encuentra en forma no polimérica en la célula en reposo. Constituye el cuerpo de los organelos celulares, los cuales se desplazan hacia el centro de la célula a consecuencia de la contracción del gel.

El sistema canalicular abierto está formado por canales ramificados, se conecta a la membrana externa y posee características similares a ella en cuanto a su composición. A través de este sistema se transportan las GPIIb/IIIa y la GP1b hacia los gránulos alfa.

El sistema tubular denso es un sistema de membranas que aparece en la vecindad de los microtúbulos y rodea los organelos, con apariencia, y funciones similares a las del retículo endoplásmico liso de otras células. Regula la activación plaquetaria mediante el secuestro o liberación de calcio, de forma similar a los túbulos del músculo esquelético y por un mecanismo más rápido que el de las mitocondrias.

También posee ATPasas, enzimas del metabolismo del ácido araquidónico y adenilato ciclasa. Las plaquetas poseen organelos inespecíficos, como mitocondrias, lisosomas y peroxisomas, que tienen características y funciones similares a los de otras células pero, además, portan organelos específicos, que son los gránulos alfa y los gránulos densos.

Los gránulos alfa son organelos esféricos de 140 nm a 400 nm en diámetro, contienen más de 30 proteínas bioactivas (Tabla 1).9 Constituyen un 15 % del volumen total de las células. Sus membranas contienen GPIIb/IIIa, pequeñas cantidades de GPIb, GPIX y P selectina. Tienen una importante participación en el funcionamiento celular, al propiciar la interacción entre plaquetas, de ahí que la cantidad de gránulos alfa (como promedio 35-40) determina el valor funcional de la célula. También participan en la interacción con otras células a través de la liberación de su contenido. 20

Figura 1. Proceso de formación de las plaquetas a partir de los megacariocitos. El proceso de maduración de los megacariocitos parte de células inmaduras (A) hasta llegar a la liberación de las plaquetas (E). En la fase B ocurre la endomitosis nuclear, la síntesis de organelos y la maduración y expansión citoplasmática, además tiene lugar el reordenamiento centrosomal de los microtúbulos. En la fase C, los micro túbulos se desensamblan y migran hacia la corteza. Se inicia la formación de las pro-plaquetas con la emisión de seudópodos (D). Toda la masa del megacariocito se transforma en pro-plaquetas que se liberan (E). Modificado de Partel et al. (2005). 3

Leyenda: * Células que lo liberan; PDGF, factor de crecimiento derivado de la plaqueta; VEGF, factor de crecimiento endotelial vascular; TGF-b, factor de crecimiento transformante beta; PDAF, Factor angiogénico derivado de la plaqueta; IGF-1, factor de crecimiento insulínico tipo 1; EGF, factor de crecimiento epidérmico; FGF, factor de crecimiento de fibroblastos; PF-4, Factor plaquetario 4. ** Existen cinco isoformas diferentes de PDGF que activan la respuesta celular a través de dos receptores. Los ligandos conocidos incluyen A, B, C y D y un heterodímero AB con receptores alfa (PDGFRA) y beta (PDGFRB). *** VEGF incluye las proteínas homodiméricas VEGF-A (que es la que se designa normalmente al hablar de VEGF), VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D y PIGF (placental growth factor). Los gránulos densos se caracterizan por su alta densidad que le confieren el elevado contenido en calcio (50 % del total, en una concentración 2 mol/L) y fósforo inorgánico. 19

Aspectos fisiológicos de las plaquetas

Las plaquetas se caracterizan por un elevado consumo de oxígeno, es 6 veces superior al de las células musculares en reposo. La fuente de energía es la glucosa. Incorporan a su interior (por un mecanismo independiente de energía) fragmentos de membrana que contienen GPIIb/IIIa y también fibrinógeno y (por un mecanismo dependiente de energía) fragmentos de membrana que contienen GPIb, esto permite la regeneración de los receptores de membrana. Estas células concentran la mayoría de la serotonina de la sangre la cual toman unida a calcio mediante transporte activo. También toman del plasma ligandos como fibrinógeno, colágeno, fibronectina y aminas biógenas.

Activación plaquetaria. La participación de las plaquetas en los procesos de hemostasia y trombosis depende de la ocurrencia de 3 eventos: el enlace plaqueta – superficie o adhesión plaquetaria; el cambio de forma y el enlace plaqueta-plaqueta o agregación plaquetaria.

Adhesión plaquetaria: Las plaquetas son capaces de adherirse a superficies artificiales, sobre las cuales se expanden. Utilizan como ligando al fibrinógeno, a través de su unión a GPIIb/IIIa. También se adhieren al colágeno (fundamentalmente de los tipos I y III), vWF, fibronectina y laminina. En condiciones de bajo flujo sanguíneo, este evento es mediado por la interacción vWF-GPIb, pero en condiciones de alto flujo también se requiere la participación de GPIIb/IIIa. Se forman enlaces firmes que dependen de la estructura fibrilar del colágeno y de la cantidad de subunidades RGD. La adhesión plaquetaria al colágeno requiere de la interacción del colágeno con vWF del plasma, GPIb, GPIaIIa de la membrana de la plaqueta que durante la formación del coágulo establecen enlaces plaqueta-fibrina. Se produce la internalización de las mallas de fibrina o de colágeno, que son rodeados de microfilamentos.

Cambio de forma: La primera manifestación física de la activación plaquetaria es el cambio de forma de discocito a esferocito, que se acompaña de un incremento en la superficie desde 8,02 mm2 (en la plaqueta en reposo) a 13,0 mm2 (en la plaqueta activada). Disminuye la longitud del subesqueleto submembrana cuya evaginación aporta membranas para este processo.

Se produce la redistribución de los microtúbulos, lo que le confiere la característica de deformabilidad celular y la posibilidad de emitir seudópodos. Los microtúbulos que están en estrecho contacto con el gel contráctil, se trasladan hacia el centro de la célula. Se procede a la desintegración del citoesqueleto y se restituye a partir de la internalización de fragmentos de la membrana externa. Es un proceso independiente de calcio (cuando el estímulo es el ADP) y dependiente de energía. 18

Agregación plaquetaria. Los estímulos fisiológicos para la activación plaquetaria son la trombina, el colágeno, el ADP, la epinefrina, el tromboxano A2 (TXA2). Los eventos posteriores tienen elementos comunes y otros que lo diferencian. En el caso de la trombina, el ADP y el TXA2, se trata de receptores acoplados a proteínas de unión a nucleótidos de guanina (proteínas G). El de trombina es una glicoproteína con 7 dominios transmembrana, de la cual hay de 1 500 a 2 000 copias que se desensibilizan rápidamente al producirse la activación las cuales no son recuperables. El receptor del ADP es purinérgico, él se caracteriza por responder con activación frente al ADP y con inhibición frente al ATP.

Su estructura no ha sido identificada y por mucho tiempo se ha denominado farmacológicamente como receptor P2T. Sin embargo, algunas evidencias experimentales recientes, sugieren que se trata de 3 receptores, uno P2Y1, igual al que media la vasodilatación y que es causante del aumento del calcio citoplasmático, el cambio de forma y la agregación plaquetaria, otro P2Y1 cyc, que media la inhibición de la adenilciclasa y uno P2X1 (no acoplado a proteína G) con una menor significación. 18

Se plantea que al menos una glicoproteína, la GPVI, actúa como receptor para la fase de activación inducida por el colágeno y que su estimulación es una señal para una fosfolipasa C. Un evento que sigue a la activación es el incremento de la concentración de calcio citoplasmática, cuyo mecanismo bioquímico no ha sido determinado totalmente en la mayoría de los casos.

Con respecto a la trombina, el colágeno y el TXA2, se ha demostrado la ocurrencia de activación de la fosfolipasa C, que da lugar a la formación de 1,4,5 trifosfato de inositol (que libera calcio del sistema tubular denso y activa una miosina cinasa) y 1,2 diacilglicerol (que activa la proteína cinasa C, que desencadena una serie de fosforilaciones de proteínas que parecen importantes para el proceso de agregación plaquetaria). En el caso del TXA2 se cree que también hay entrada a la célula del calcio extracelular a través de una intensificación del intercambio Na+/H+ de lo cual depende más de la mitad del incremento del calcio citoplasmático.

La trombina, el ADP y la epinefrina inducen inhibición de la actividad adenilciclasa en la plaqueta, cuya implicación en el resultado final no está bien determinado. Se desconocen los mecanismos bioquímicos que llevan a la activación de la GPIIb/IIIa y el enlace del fibrinógeno, pero hay evidencias de que este último es independiente del calcio.

La activación plaquetaria por agentes como trombina, colágeno, ADP y epinefrina, puede conducir a la activación de la fosfolipasa A2 citoplasmática, que requiere concentraciones fisiológicas de calcio para activarse, la cual cataliza la hidrólisis de los fosfolípidos de membrana y da lugar al ácido araquidónico que se metaboliza preferencialmente por la vía de la TXA2 sintetasa para dar lugar al TXA2, producto inestable (sólo 5 s dura su actividad) cuyos precursores, los endoperóxidos cíclicos, son también capaces de activar el receptor. De esta manera el TXA2 constituye un amplificador de la señal de activación plaquetaria. 20

Después de un estímulo fuerte los gránulos alfa y densos se alargan y emiten seudópodos, se aproximan a la membrana plasmática (lo que es posible debido a la disolución del sistema canalicular abierto), se funden con la membrana, aumentan de volumen debido a la entrada de agua y esto propicia la liberación de su contenido al medio exterior, lo que se denomina secreción.

Un elemento que distingue a los agentes inductores de agregación de la plaqueta es el peso relativo que tienen la síntesis de TXA2 y la secreción en el resultado final. Por ejemplo, la agregación inducida por trombina, es resultado fundamentalmente de la señal dada por la activación de su receptor, ya que no es afectada por la inhibición que ejerce la aspirina sobre la síntesis del TXA2. El ADP produce una primera fase de agregación reversible, de aproximadamente 30 s de duración y que es consecuencia de la señal de activación del receptor, a lo que sigue una segunda fase irreversible y que depende de la síntesis de TXA2. El TXA2 parece requerir de la liberación de ADP.

La conocida susceptibilidad a la aspirina de la agregación inducida por colágeno, sugiere la importancia de la liberación de TXA2 en su mecanismo de activación plaquetaria. La epinefrina se considera un agonista débil que amplifica el efecto de otros estímulos a través del incremento de la concentración de calcio intracelular y de la actividad adenilato ciclasa.

Los concentrados de plaquetas

Los concentrados de plaquetas fueron originalmente utilizados en medicina transfucional en el tratamiento o prevención de hemorragias a causa de una severa trombocitopenia. Los concentrados estándares de plaquetas a transfundir se denominaron PRP y su concentración era de 0,5•1011 plaquetas por unidad.22 Las potencialidades del uso de productos derivados de la sangre para estimular la cicatrización y sellar heridas fue descrito por primera vez en 1970.23 Se trataba fundamentalmente de concentrados de fibrinógeno cuya polimerización se inducia con calcio o trombina. Por su alto contenido en factores de crecimiento el uso de las plaquetas en acelerar el proceso de cicatrización resulta muy atractivo y se ha venido utilizando en los últimos años en la práctica clínica. 23

El uso de los concentrados de plaquetas cuenta con protocolos diversos, un punto en común es que se obtienen por lo general a partir de sangre con anticuagulante y se procesan de manera usual como máximo una hora antes de ser administrados. Uno de los pasos más comunes es la centrifugación inicial de la sangre, cuyo objetivo es obtener diferentes fracciones: 1) Fracción correspondiente a los glóbulos rojos (sedimento), 2) Capa leucocitaria, 3) Fracción de plasma acelular que teóricamente se subdivide en a) Zona rica en plaquetas o PRP y b) Plasma Pobre en Plaquetas (PPP) .

Otro método implica la extracción del sobrenadante (descartando los eritrocitos) del primer centrifugado y la re-centrifugación a mayores gravedades.24 Un método alternativo a la centrifugación es la filtración, para lo cual se emplean dispositivos apropiados, se plantea que este método requiere un 40% menos de tiempo y que es menos traumático para las plaquetas, mientras que se obtienen concentraciones similares de plaquetas y factores de crecimiento. 9

Figura 2. Fracciones que se obtienen tras la centrifugación de la sangre. El protocolo clásico25 describe la centrifugación de 5 mL de sangre tratada con citrato (8 min a 460 g) mediante la cual se distinguen tres fracciones fundamentales: 1) Fracción eritrocitaria, 2) Capa leucocitaria y 3) Plasma acelular. Esta última fracción puede sub dividirse en dos sub fracciones: a) Fracción rica en factores de crecimiento y b) Fracción pobre en factores de crecimiento. En un segundo momento, se extrae la fracción rica en factores de crecimiento y se añaden los activadores. Modificado de Dohan et al. 2009. 25

Las técnicas de obtención pueden variar también en dependencia de su obtención manual o con dispositivos creados al efecto, pasando por sistemas abiertos como el PRGF (creado por Anitua en 199926,27) que es sencillo pero exige trabajar en medio estéril como flujo laminar, campana de vacío o en quirófano. Otros métodos que existen en el mercado son cerrados o semi cerrados siendo su coste variable según la casa comercial (e.j. BTI, GPS de BIOMET, AGF de MBA, PReGF de Harvest, PROTEAL, GMP, Orthogen, entre otros).

El uso de los preparados de plaquetas está sujeto a numerosas variables, las cuales incidirán en su eficacia clínica. Algunas de estas variables son: concentración de plaquetas que se logra, técnica de obtención, concentración de proteínas secretadas, manipulación y aplicación clínica. Sobre la cantidad de plaquetas que se obtiene con distintos métodos se han reportado variaciones que van desde 2 a 8,5 veces el valor basal.

En cuanto a este aspecto se refiere que para obtener óptimos resultados se requiere concentrar las plaquetas entre 3-5 veces por encima del valor basal. 28 Teniendo en consideración que un individuo normal tiene alrededor de 200 000 plaquetas/µL un concentrado de plaquetas con 1 000 000 plaquetas/µL sería óptimo con fines terapéuticos. 29 Se ha demostrado que concentraciones superiores no incrementan el efecto, en cuanto a la cicatrización de heridas se refiere. 13

Los preparados de PRP son estables en las soluciones anticoagulantes durante 8 h. Antes de aplicarlos, se deben activar, por lo general añadiendo 1000 U de trombina (activador que polimeriza la fibrina en un gel insoluble que origina la degranulación de las plaquetas y la liberación de los factores de crecimientos) o una solución de cloruro de calcio al 10 %. La adición de estos componentes provoca la liberación inmediata de los factores de crecimiento. Tras 15-20 min después de añadir el cloruro de calcio se forma un gel inestable que debe ser utilizado de manera inmediata. Si se coloca el PRP sin activador la liberación de los factores tiene lugar en los tejidos de manera lenta.

Antes de su aplicación. Según sea el tiempo y temperatura tras la activación, se puede obtener desde un líquido para infiltración, hasta un compuesto sólido gelatinoso maleable útil para sellar o compactar (gel de plaquetas o coágulo). Si solo interesase el gel adhesivo sin factores, puede activarse PPP obteniéndose un coágulo de fibrina.

Los rendimientos que se obtienen al centrifugar la sangre son variables y depende entre otros del valor de hematocrito individual. Como referencia con la centrifugación (460 g) de 8 mL de sangre total se obtiene 1 mL de plasma pobre el factores de crecimiento y 1 mL de plasma rico en factores de crecimiento. La cantidad de PRP a preparar dependerá de su uso final. En el proceso de preparación se deben tener en cuenta que para tratamientos quirúrgicos el lugar de preparación será un quirófano.

Para infiltraciones, se podrá realizar en una sala de curas cuidando al máximo la asepsia. El paciente se preparará con 15 días de antelación recetándole un multivitamina (sobretodo vitamina C). Si es fumador se le solicita que no fume o lo haga menos durante 15 días.

La extracción sanguínea se realiza al paciente unos minutos antes de comenzar con el procedimiento terapéutico a realizar. La cantidad dependerá del defecto a tratar. A manera de ejemplo, si la técnica requiere el uso de heparina, la jeringuilla se carga previamente con 30 UI/mL de heparina y se extraen 20 mL de sangre con aguja tipo mariposa 21 a 18 G. La extracción debe realizarse en modo de evitar la hemólisis, se aspira delicadamente. La sangre se trasfiere al contenedor que se utilizará para centrifugar vertiéndola por la pared interior delicadamente, en modo de evitar la formación de espuma (hemolísis). La separación del plasma se realiza generalmente mediante centrifugación durante 8 min a 200-460 g.

En este caso se usa una centrifugación a bajas gravedades que permita concentrar las plaquetas en el plasma que se encuentra más próximo a los hematíes. Al final del proceso se obtiene un estimado de 10 mL de plasma, de los cuales de 6 mL a 7,5 mL corresponderá a PPP y 2,5 mL a 4 mL PRP por cada tubo de sangre anticoagulada.

Aunque debido al hematocrito del paciente, se obtenga mayor volumen total, sólo se aprovecharán como máximo 4 mL de PRP. Las plaquetas que se extraen por succión se encuentran en la zona central del plasma y hacia la zona más próxima al paquete eritrocitario. Si se incrementa la velocidad de centrifugación estas sedimentan y no se pueden extraer. Si se desea hacer una segunda centrifugación del sobrenadante de la primera, se emplean 3000 g, en este caso hacia la zona baja del tubo se concentran las plaquetas y hacia la parte superior encontraremos el PPP.

Inconvenientes prácticos

Es posible que después de centrifugar se observe un plasma blanquecino con aspecto sebáceo. Esto puede tener dos posibles orígenes: que el paciente esté en plena digestión tras una ingesta de grasas o que padezca de dislipidemia. Este plasma no debe utilizarse nunca para infiltraciones. También es posible encontrar un color rosáceo, esto se debe a una extracción de sangre traumática que provoca una liberación de tromboplastina tisular, dando lugar a micro-coágulos que retienen algunos hematíe.

Este plasma tampoco se recomienda que se use. El plasma ideal es de color amarillento traslúcido.

Otra posible complicación es que durante la extracción de sangre ésta salga con exceso de velocidad creando hemólisis. Este plasma será rojizo y se deberá desechar. Esto se evita haciendo la extracción con un catéter de calibre adecuado.

Clasificación de los concentrados de plaquetas

El uso de los concentrado de plaquetas se guía por diferentes protocolos lo que trae aparejado resultados clínicos variables debido al empleo de concentrados con diferentes características biológicas y con tipos de aplicaciones diversos. Se ha propuesto una clasificación de los preparados ricos en plaquetas en las siguientes categorías: 1) P-PRP, plasma rico en plaquetas puro; 2) L-PRP, Plasma rico en leucocitos y plaquetas; 3) P-PRF, plasma rico en plaquetas y fibrina y 4) L-PRF, plasma rico en leucocitos plaquetas y fibrina. Para la obtención de cada uno de estos concentrados existen dispositivos disponibles en el mercado o métodos manuales. Los métodos manuales tienen como desventaja la variabilidad que induce la habilidad del operado para aspirar el plasma, mientras que los métodos automáticos son más precisos pero incrementan los costos del procedimiento notablemente.

Con relación a los agentes inductores de la coagulación existen también variaciones, por ejemplo se usa gluconato de calcio o batroxonina (enzima que lisa fibropéptidos e induce la polimerización en ausencia de trombina bovina, la gelificación tiene lugar en 10 min).

La obtención del L-PRF tiene la particularidad de que no se emplean ningún agente anticoagulante. En esencia se centrifuga a baja velocidad la sangre total y se deja en reposo. El proceso natural de coagulación se activa y como consecuencia dentro del tubo se obtienen tres fases: en el fondo la capa eritrocitaria, en el centro un coagulo que atrapa la mayor parte de las plaquetas y leucocitos, y en la fase superior el suero. El coagulo formado es estable y se utiliza como material de relleno en cirugía de la cavidad oral, 30 maxilofacial 31,32 y cirugía plástica. 33 Este método tienen numerosas ventajas pues permite obtener de manera económica y rápida material para el relleno de cavidades.

La mayor parte de los estudios realizados hasta el momento con PRP han utilizado protocolos seleccionados bajo bases empíricas. El PRP ha sido obtenido por los procedimientos descritos pero con grandes variaciones, por ejemplo la fuerza centrífuga utilizada varia de 160 g a 3000 g y el tiempo de centrifugación de 3 min a 20 min. Es por lo anterior que es difícil definir si los resultados que actualmente han sido publicado han usado P-PRP o L-PRP.

Estudios in vitro demuestra que en efecto los PRP estimulan la proliferación de distintos tipos de células (e.g. osteoblastos, fibroblastos, células del tendón, condrocitos, ligamento periodontal, células madres mesenquimales del hueso). 22 Pero al mismo tiempo otros estudios del mismo tipo han encontrado resultados contradictorios. 34 Lo mismo tiene lugar para los efectos relacionados con la diferenciación celular inducida con PRP. 35,36 La variabilidad en los resultados parece depender del número de plaquetas que contienen los PRP, planteándose en general que existe un número óptimo por encima del cual los efectos inductores serian negativos.

Por otra parte, la diferencia fundamental en cuanto a los preparados L-PRP y P-PRP la determina el papel potencial de los leucocitos en los procesos de proliferación, diferenciación, inmunitarios y en la respuesta a infecciones, pero en la práctica la aplicación de métodos donde no se ha controlado el número de leucocitos en los preparados impide discernir entre la utilidad de uno u otro tipo de preparados.

Algunos autores han recomendados sin una demostración experimental la eliminación de los leucocitos de los PRP, mientras que otros lo aconsejan. Estos últimos tienen en consideración el papel de los leucocitos en los procesos de respuesta inmune, respuesta a infecciones y secretor de VEGF.

Investiga ciones recientes han demostrado que el uso de L-PRP estimulan el anabolismo y la remodelación de tendones37 y pudieran ser de utilidad en el tratamiento de la tendinitis. 5 Han sido utilizado además en la cicatrización ósea38 y en el control del dolor y la inflamación. 5 Aunque se ha lanzado la hipótesis sobre el papel sinérgico que podrían tener los leucocitos y las plaquetas hasta el momento no existen estudios sólidos que lo demuestren.

Algunos de los productos del PRP presentan efectos antibacterianos contra Staphylococcus aureus39 e incluso antiinflamatorios mediados por el bloqueo de la proteína MCP-1 y la generación de lipoxina A4.40 Esto hace que los pacientes presenten en general menores índices de inflamación y expresen menos sensación de dolor en su recuperación funcional. Los resultados anteriores pudieran relacionarse con la presencia de leucocitos en el PRP utilizado.

Anitua defiende la no inclusión de leucocitos, 27 argumentando que alteran la función de algunos facotres de crecimiento e interfieren en la acción antiinflamatoria. Otros, como Smart PRePTM system (Harvest Technologies Corporation, Munich, Alemania) alegan que carece de importancia este detalle y además su PRP contiene algunos hematíes. Otros autores prefieren la inclusión de leucocitos para el tratamiento de las úlceras u otras cirugías ya que consideran que tiene un efecto antimicrobiano y desinfectante.

La presencia de fibrinógeno y la densidad del gel o coagulo es también un factor determinante. De esto dependerá la velocidad de liberación de las citocinas y por tanto su efecto final.

Seguridad

Dado que los PRP son preparados autólogos, su administración es segura y no está sujeta a la transmisión de enfermedades como HIV, Hepatitis, entre otras. Los PRP son bien tolerados por los pacientes. Cuando se emplea trombina bovina como agente acelerador de la coagulación existe la posibilidad de la inducción de anticuerpos contra esta proteína, no obstante el proceso de producción actual de la trombina para estos fines, elimina el factor Va que es el antígeno responsable.

El uso de PRP está contraindicado en pacientes que padecen de trastornos de la coagulación (trombocitopenia, hipofibrinogenia o que reciben terapia anticoagulante), que poseen hipersensibilidad a productos bovinos (en el caso que se use la trombina), o anestésicos locales (en el caso que se use alguno). Ante la sospecha de lesión precancerosa o cancerosa, lo prudente, es no aplicarlos. 9 En casos en los que el conteo de plaquetas sea inferior a 100•103 plaquetas / µL, embarazo o lactancia el procedimiento está contra indicado.

El paciente debe ser informado de la posible presencia de síntomas indeseables temporales después de la inyección (dolor local, eritema). Esta respuesta se produce de manera natural debido a la estimulación de los mediadores de la inflamación. En general los eventos adversos son mínimos, pero los riesgos comunes a cualquier inyección como: infección local, daño neurovascular, entre otros, pueden ocurrir de manera remota.

Aplicaciones clínicas

Las aplicaciones terapéuticas del PRP son muy diversas. Se utilizó hace años en cirugía como coagulante, sellante y compactante de injertos óseos. En los últimos tiempos se sugieren nuevas terapias fundamentadas en el potencial regenerativo y antiinflamatorio de los factores de crecimiento contenidos en las plaquetas y que estas liberan al activarse. También se utiliza junto a auto o aloinjertos óseos o con algún sustrato de fosfato tricálcico u otro material de relleno óseo combinado con células madre, en casos de falta de consolidación ósea.

Se están desarrollando estudios, tanto a nivel pre-clínico como clínicos, destinados a generar evidencia científica de los efectos antiinflamatorios, analgésicos y/o regenerativos del PRP infiltrado en articulaciones artrósicas, tendinitis, ligamentoplastias y otras lesiones musculo-esqueléticas.

Desde hace mas de 10 años que se viene aplicando el PRP en medicina deportiva: lesiones musculares, tendinosas y también en trastornos degenerativos: artrosis, condropatías y problemas de cicatrización. La indicación ideal en la artrosis es aquel paciente que no es sensible a los tratamientos convencionales y que por razones varias (edad, riesgo quirúrgico, entre otros), no procede una cirugía radical como la artroplastia total o prótesis. También el deportista con problemas de condropatía puede recuperar sus prestaciones habituales con este tratamento.

Está indicado en aquellas situaciones en que se precise estimular la regeneración celular. Sobre todo cuando existe degeneración de partes blandas: tendinitis degenerativas, degeneración discal, fascitis, degeneración del cartílago. Se está utilizando con éxito actualmente en:

• • Condropatias, osteocondritis y artrosis
  • Lesiones de ligamentos de la rodilla u otras articulaciones
  • Ligamentoplastias
  • Lesiones musculares y tendinosas
  • Consolidación ósea
  • Implantación de prótesis articulare
  • Cicatrización de úlceras y heridas
  • Lesiones corneales
  • Implantes dentales
  • Regeneración cutánea: úlceras de decúbito, retardos de cicatrización, medicina estética.

Cabe destacar su utilización en lesiones del tendón de Aquiles en las lesiones ligamentosas de la rodilla como la del ligamento cruzado anterior y ligamentoplastias, en la fascitis plantar, en la epicondilitis del codo, fracturas, pseudoartrosis y fusión intervertebral en la patología del manguito rotador del hombro. Y por supuesto en la patología del cartílago y la artrosis. En cirugía se utiliza además por su acción antiinflamatoria, antiedematosa y antihemorrágica. Otros autores resaltan su acción antimicrobiana.

En las lesiones cutáneas u otros procesos cicatriciales se aprecia un aumento en la rapidez y calidad de la cicatrización. En la tabla 2 se resumen algunos ejemplos de los resultados de un grupo de estudios que soportan el uso de los PRP.

El ozono como activador las plaquetas

Liberación de factores de crecimiento

Estudios realizados por el Dr. Bocci(1999)14 y Re (2010)15, han demostrado que la ozonización del plasma heparinizado promueve la agregación plaquetaria acentuando así la liberación de sus factores de crecimiento. Se observó una gran diferencia entre la sangre anticoagulada con citrato o con heparina. El estudio del Dr. Bocci 14 se realizó a diferentes concentraciones: 20 µg/mL, 40 µg/mL y 80 µg/mL de ozono, con mediciones tras 2 h, 4 h y 8 h de incubación. Constató que cuando se utiliza heparina, aumenta la agregación plaquetaria en un 20 % con una concentración de ozono de 40 µg/mL y en un 68% cuando la concentración es de 80 µg/mL.

Los factores de crecimiento derivados de las plaquetas que se estudiaron fueron: PDGF AB, se libera especialmente cuando la sangre está heparinizada, a partir de 40 µg/mL de ozono, superando en más del doble a lo que se libera si la sangre se trata con citrato, las concentraciones más elevadas se alcanzaron a partir de las 2 h de incubación.

TGF beta1, se libera de manera creciente desde la primera hora hasta la cuarta, con una mayor expresión a las 4 h en el grupo donde se heparinizó la sangre y se trató con 80 µg de O3. IL-8, se libera a las 4 h, se supone que es el tiempo que necesita su síntesis.

TBX2, se libera desde la primera hora de incubación, los valores a las 2 y 4 h son similares y las diferencias en cuanto a su liberación dependiente del anticoagulante se registraron solo para 2 h de incubación a las concentraciones de 20 µg de O3 y 80 µg de O3 a favor del citrato. 14 Por otra parte, la presencia de FGF es independiente del anticoagulante y se activa de igual modo con cloruro de calcio que con el ozono.

El efecto anticoagulante de la heparina se ejerce a través de la activación de la antitrombina III. La heparina se une al inhibidor de la coagulación antitrombina III, produce un cambio conformacional de la molécula que acelera más de 1000 veces la unión de la antitrombina III a los factores activados, principalmente la trombina y el factor Xa, con menor intensidad al XIa y XIIa (complejo heparina-antitrombina se une finalmente a la trombina). Esta unión inactiva las proteasas de la coagulación de suero. La inhibición de la activación mediada por trombina de los factores V y VII es de importancia fundamental para el efecto anticoagulante. La heparina es anticoagulante con efectos in vivo, e in vitro.

El citrato sódico (10 mL 3,3% puede anti coagular 100 mL de sangre) es sólo anticoagulante in vitro por ser un secuestrador de los iones de calcio, y no tiene efecto sistémico.

Los métodos convencionales de activación de las plaquetas usan citrato debido a que el cloruro de calcio que se añade para la activación, satura la capacidad quelante del citrato y activa el proceso de formación del coagulo. Por tanto, cuando se trate de activar el PRP con O3 y se necesite del coagulo (ej. para rellenar cavidades) deberá usarse como anticoagulante citrato, mientras que cuando la mayor importancia la tiene lograr un plasma más rico en factores (ej. para inyecciones sub cutáneas en piel) deberá usarse heparina.

La combinación de ambas técnicas, activación con calcio y ozono, acelera la activación de las plaquetas. Al ozonizar el PRP se forman ozónidos y otros derivados, que difunden en el interior de la plaqueta, se activa la fosfolipasa C y la A2 (dependiente de calcio), facilitando la formación de sustancias pro-agregantes (PGE2, Tromboxano, etc). Con ello se consigue no solo liberar los factores de crecimiento más rápidamente, sino que la formación de peróxidos despliega muchas rutas metabólicas curativas que estaban silentes.

Procedimiento de ozonización del plasma

De manera general se carga en una jeringa un volumen de ozono similar al volumen de PRP obtenido, las concentraciones de O3 van de 40 µg/mL a 80 µg/mL se procede a mezclar con el PPR por un minuto y a continuación de añade el cloruro de calcio. Será la combinación de ambos la que dará una mejor y óptima liberación de los factores de crecimiento.

Formación del coágulo: si el propósito es la formación del coágulo, es de vital importancia respetar las proporciones y nunca poner más cloruro cálcico del indicado, además de obtener el plasma con citrato de sodio como anticoagulante. Para acelerar la coagulación y la formación de fibrina se utiliza una incubadora que eleva la temperatura a 37º C y se incuba durante unos 30 a 40 min. El coágulo obtenido se comportará como una esponja empapada en factores de crecimiento.

En el caso de usar la técnica para la cura de heridas, estas se tratan con ozono (con agua ozonizada o bolsas de ozono), se debridan y se procede a irrigar la úlcera con el PPR no coagulado, se cubre la úlcera con la membrana biológica (fibrina), plasma coagulado y se sella con un apósito hidrocoloide durante 3 días. Este procedimiento se repite cada 15 días.

En aplicaciones para bioestimulación cutánea y tratamientos anti-envejecimiento, se debe inyectar intradérmicamente con técnica de mesoterapia e inmediatamente después de la activación. Se dan 3 sesiones de tratamiento separadas con dos semanas entre sí. Como norma se infiltra en todo el trayecto de la arruga 1 mL de PPR. En rodilla se infiltra entre 6 mL y 8 mL. En codo de 3 mL a 6 mL, en epicondilitis de 2 mL a 3 mL.

El sobrenadante del PRP es también ideal para su uso como colirio. La aplicación del PRP tanto de forma tópica como en colirio ha demostrado ser un procedimiento fiable, seguro y eficaz para restaurar la superficie epitelial de la cornea. La formulación líquida del PRP es empleada además para bioactivar la superficie de los implantes dentales o para aglutinar injertos. Mientras que el coágulo de PRP es ideal para estimular la regeneración ósea en alveólos postextracción, tratamiento de úlceras, ingeniería de tejidos, entre otros.

Para la artrosis la combinación de la ozonoterapia tradicional con la de PRP potencia el efecto regenerativo del PRP, garantizando su esterilidad y añadie los efectos conocidos del ozono como antiinflamatorio y en el control del dolor.

Otra aplicación del plasma es el llamado plasmagel. Este se obtiene del plasma pobre en plaquetas y se utiliza para rellenos. Para su preparación se carga previamente la jeringa con ácido ascórbico 100 mg/mL, a razón de 1 mL por cada 5 mL de sangre que se va a extraer, mezclándose en la jeringa. Después la sangre sin anticoagulante se centrífuga (1800 r•min-1, 8 min).

El PRP se carga en jeringuillas de 1 mL y se introduce en agua a 95 °C -98°C durante 3 min, con lo cual el plasma se gelifica por desnaturalización de las proteínas y ese es el material que se utiliza para los rellenos faciales. Se debe prestar especial atención a la desnaturalización de las proteínas, para lograr la formación de un gel con una viscosidad tal que facilite su inyección. Las infiltraciones se hacen por lo general con una jeringuilla de 1 mL y aguja de 27 G. Este procedimiento mantiene su efecto relleno de 3 a 4 meses (comunicación personal, de A. Schwartz).

Una vez hecho los rellenos se utiliza el PRP rico en factores ozonizado para bioestimular. Se repite la bioestimulación con PRP una vez al mes, durante 3 meses y a los 3 meses se revalora el paciente para un nuevo relleno con plasmagel, que en este caso sustituye en gran medida al ácido hialurónico.

La tecnología del PRP abre nuevas perspectivas en el área de regeneración tisular humana y es una inestimable herramienta para tratar una amplia gama de lesiones tisulares, en ortopedia, medicina deportiva, medicina estética, vascular, odontología, implantología, cirugía maxilofacial, oftalmología y otras. La activación de PPR con ozono ha demostrado una gran eficacia desde el punto de vista clínico, así como su combinación con la ozonoterapia convencional. En este campo se acumula una gran cantidad de datos basados en la observación clínica de los practicantes, pero se hacen necesarios el establecimiento de protocolos de trabajo estándares así como el estudio clínico y molecular más profundo de sus efectos.

Ozone concentration measurements. State of the art

Manuel Delgado

Abstract There is a wide interest regarding how to accurately measure the ozone concentration in agas mixture. Concerns are even more relevant regarding ozone medical applications because outcomes greatly depend on the correct administered dosages.

Introduction

The usefulness of ozone for medical applications, namely Ozone Therapy, has being explored by many physicians for several decades gaining experience and knowledge on its indications as well as its therapeutic dosage ranges. An important fact and a milestone in the Ozone Therapy practice was the “Madrid Declaration on Ozone Therapy” (1) produced in the framework of the International Meeting of Ozone Therapy Schools, Madrid June 2010 organized byA.E.P.R.O.M.O association (2). This Declaration, among other important issues, defines therapeutic protocols and therapeutic ranges considering ozone concentrations. This factor has never been considered as playing an important role in the success of therapies as it is today.

For ambient ozone, UV photometry is a worldwide standard. The National Institute of Standardisation and Technology, NIST (3) plays a leading role in providing national standards to many nations. Unfortunately, there is no such national standard available for high ozone concentrations as commonly used in Ozone Therapy.

However, the International Ozone Association, IO3A (4) regulation 002/87 (F), gives a recommendation for ozone extinction coefficient of about 3000 ltr/mol cm (1atm / 0ºC).

1.Measuring methods

Ozone concentrations can be measured mainly in two different ways, directly and indirectly which in turn, can be divided into two other methods.

2.Photometric method

Sometimes called spectrophotometric, is a quantitative analysis based on the Beer-Lambert law consisting in the assessment of the absorption of a light radiation with specific wavelenght. The light energy amount absorbed by the sample is directly related with its concentration. Ozone has a peak absorption in the ultraviolet spectrum at 254nm wavelength so a monochromatic UV light must be used.

Operation of an ozone standard photometer is as follows:

– The light beam is sent through a cuvette and its intensity measured for zeroing.

– The gas mixture O3/O2 enters the cuvette.

– Depending on the O3 concentration, some amount of the light is absorbed.

– The light beam outing the cuvette is detected by a sensing device such as a photodetector.

– The intensities for input and output light beam are compared for measuring.

While relatively simple in concept, determining the transmittance involves careful consideration of the geometrical and spectral conditions of the measurement. The method of UV photometry, if performed in the right way, is accurate and reliable for ozone concentration measurement being the election method for ozone researching. Nevertheless this method is very sensitive to dust, contaminants and condensation on the measuring cuvette and these items must be considered in the design. Also, zeroing and frequent calibration is needed. As an UV source, a low pressure mercury lamp is used to produce the 254nm wavelength and these devices are not linear and have a limited lifespan.

In addition, the devices using mercury lamps are not RoHS (5) compliant being obsolete since 1st July 2006 when the directive entered in force within EU. This directive is well known by the medical community as it obliges to remove all the mercury clinical thermometers removing all of them from their original use in the hospitals within the EU. Further considerations must be taken using UV wavelengths because same energy radiation, by hitting oxygen in an O2/O3 mixture, produces as well ozone thus increasing the ozone concentration in the sample measured.

There are two major classes of devices: single beam and double beam photometers. A double beam spectrophotometer compares the light intensity between two light paths, one path containing a reference sample and the other the test sample. A single beam spectrophotometer measures the relative light intensity of the beam before and after a test sample is inserted. Many medical ozone generators include a single beam calibration system as described before.

Regardless if a single or double beam device is used, an important issue is the calibration method used for the photometric device because depending on it, measurements done with the same photometer may result in concentrations with a margin of error of 10%. For instance, those calibrated with the chemical method give 10% higher values than those calibrated with UV photometers which consider the ambient pressure and temperature for correction. These systems usually show the concentration values as μg/Nml, i.e. normalized “N” millilitres (1atm and 0ºC).

2.2 Sources of error in an photometric Ozone Analyzer.

One of the most important factors to achieve accurate measurements on a photometric device is the stability. Stability of a UV device based on a UV lamp is highly compromised by the emission lamp and sensor drift due to its normal wear, mainly of the lamp. Also soiling of the cuvette due to humidity, dirt, NOx and hydrocarbons compromises the accuracy of the analyzer. Because of this, periodic zeroing and/or calibrations of the instrument are needed.

Humidity on the cuvette will appear when the dew point temperature of the water contained in the gas is higher than the temperature of the cuvette windows triggering water condensation on the windows.

Dirt will appear on the cuvette by several reasons such as using polluted oxygen supply from the cylinder or wall supplies, or the use of oxygen concentrators from PSA (7) systems being the latter one of the worst cases, because some lubricating hydrocarbons from the air compressor may reach the cuvette.

Then the high energy UV light could burn it creating a gas that glues in the cuvette windows as a thin layer. This effect completely destroys accuracy and even the cuvette must be discarded.Also contamination of NO has to be considered as PSAsystems delivers oxygen at concentrations of up to 95% and balanced with 5% nitrogen. This nitrogen is modified to different nitrous oxides when passing through the core of generator receiving high voltage discharge.

3.Indirect method

Two main procedures are used as indirect methods. One is the called iodometric “wet chemistry” (6), and the other is a calculated algorithm. We will deal only with the latter because the chemical method is based on the oxidation of a potassium iodide solution according to the reaction 2KI + 03 + H2O 2KOH + O2 + I. This method is a calibration reference for some photometric devices, as mentioned before, but it is impractical to use by a medical ozone generator into a clinical environment because readings are not in real time and procedure is not convenient.

Algorithm calculated measuring (ACM) procedure is an indirect method because there are no sensors or cuvettes involved in the measurement process. The ozone gas mixture does not touch any sensor or detector thus no flow restriction is produced. It is well known that the output ozone concentration produced by any ozone generator is inversely proportional to the flow passing through; therefore, this method requires a constant flow to be accurate so a well designed gas management system is mandatory.

Another important issue for an accurate ACM is the high voltage production and control that involves complicated designs for high frequency voltage generators and sophisticated transformers. The high voltage must be stable and constant. Therefore for concentration settings the generator must modify the PWM (Pulse Width Modulation). Furthermore resonant or quasi-resonant circuits must be considered for high performance generators.

All the required data, pulse width, high voltage, timing, triggering angle and some other are sent to a CPU (central processing unit) that with a proprietary algorithm calculates the ozone concentration. At this point, some advanced and improved devices, considers temperature and pressure to calculate the normalized volume of the O3/O2 gas mixture giving the units in terms of μg/Nml (micrograms per normalized “N” millilitre). These units are the recognized one by the IO3A (4) association. Regardless of the measuring method (photometric or ACM) a serious measure device intended for gas, must consider temperature and pressure to avoid further errors (some times up to 7%).

3.3 Sources of error in an ACM measuring device

Since neither detectors nor cuvettes are used on this method, humidity, dirt and other pollutants do not affect the measurement accuracy. Nevertheless, this method is “blind” to the oxygen supply gas purity or kind of gas, so if a gas different than oxygen is used as gas supply, the ACM method still will show concentration readings. This is a highly unlikely situation because pipelines and cylinder valves have international standards for each every gas in order to avoid mistakes by the operator. For instance, it is almost impossible to fit by mistake an oxygen breathing mask & flow system to a CO2 cylinder also commonly available within hospital environment. The same happens with wall supply sources which are standardized by dedicated plugs avoiding fitting vacuum plug or N2O instead of oxygen.

Another source of measuring error is the use of oxygen concentrators. As said before, ACM method is non sensitive to the feeding gas because it considers it as 100% pure oxygen while actually some percentage of nitrogen is on the mixture. Real concentration on this case will be lower than showed by the readings and must be considered according the application. While this procedure must be absolutely avoided for systemic route application, it is a choice for oil or other liquids ozonation where high oxygen consumption is involved. On the other hand, no damage will be produced to the ACM measuring device due to the lack of UV sensors or cuvettes are in the process.

Summary

The use of one method or another is not inherently better compared to each other. As many other things in the field of technology, if a poor design of the device and / or wrong procedure is involved, poor results will be obtained regardless the used method. Instead to focus the method that must be used, the manufacturers must be requested to advice about the accuracy of their measuring devices as well as its linearity and maintenance requirements.

Many aspects are involved in the medical ozone generators manufacturing that are impossible to be covered by regulations so it is highly desirable that the manufacturers joined the “Good Manufacturing Practices” which is covered by the ISO 13485:2003 regulation that grants the design will be even better and beyond the standard regulations. Then, manufacturers having ISO 13485:2003 certificate will be a good clue about how much care they put into their designs. Needless to say that all medical ozone generators should have CE certification for the directive 93/42EEC Anex II which is the one that regulates.

Revista Española de Ozonoterapia, vol. 1, nº 1. pp. 87-92, 2011

Medical devices into the European Community.

1. Declaration of Madrid can be downloaded from ISCO3 web page.
2. A.E.P.R.O.M.O (Asociación Española de Profesionales Médicos en Ozonoterapia. www.aepromo.org
3. NIST. National Institute of Standardisation and Technology. www.nist.gov
4. INTERNATIONAL OZONE ASSOCIATION, STANDARDISATION COMMITTEE-EUROPE: “Ozone Concentration Measurement in a Process Gas by UV Absorption”, 002/87 (Paris, France: Intl. OzoneAssoc., European-African Group, 1987). IOA3. International Ozone Association. www.io3a.org
5. RoHS. Restriction of Use Hazardous Substances. www.rohs.eu
6. INTERNATIONAL OZONE ASSOCIATION, STANDARDISATION COMMITTEE-EUROPE: “Iodometric Method for the Determination of Ozone in a Process Gas”, 001/87 (Paris, France: Intl. Ozone Assoc., European-African Group, 1987)
7. PSA; Pressure Swift Absorption. Oxygen concentrators for oxygen breathing therapy. K. RAKNESS et al., “Guideline for Measurement of Ozone Concentration in the Process Gas from an Ozone Generator”, Ozone: Science & Engineering, Vol.18 (1996), pp. 209-229

A terapia com oxigênio-ozônio está em um caminho cruzado

Velio Bocci, Emma Borrelli, Iacopo Zanardi, Valter Travagli

Resumo

A terapia com oxigênio-ozono faz envelhecer lentamente e está sendo usada em muitos países. No entanto, enquanto o tratamento do disco hernial simplesmente injetando um pequeno volume de O2-O3 gasoso dentro do núcleo pulposo é um grande sucesso, o uso da assim chamada auto-hemoterapia ozonada (M-O3-AHT), constituída por 200 O ml de sangue autólogo tratado com a mistura gasosa de O2-O3 e rapidamente infundido no doador, está atrasado devido a uma série de razões entre as quais falta de padronização, necessidade de tratamento numeroso, falta de conhecimento, ceticismo e até mesmo negação. O cepticismo, que é fundamental para o método científico, só pode ser superado mostrando a validade do M-O3AHT em ensaios clínicos controlados e randomizados em doenças específicas, conforme solicitado corretamente pela medicina oficial.

Oxygen-ozone therapy is at a cross-road

Abstract

Oxygen-ozone therapy is slowly coming into age and it is being used in many Countries. However, while the treatment of hernial disk by simply injecting a little volume of gaseous O2-O3 inside the nucleus pulposus is a great success, the use of the so-called major ozonated-autohemotherapy (M-O3-AHT), consisting of 200 mL of autologous blood treated with gaseous O2-O3 mixture and rapidly infused into the donor, lags behind due to a number of reasons among which lack of standardization, need of numerous treatment, lack of knowledge, skepticism and even denial. Skepticism, which is fundamental to the scientific method, can be overcome only by showing the validity of M-O3AHT in controlled and randomized clinical trials on specific diseases, as correctly requested by the official Medicine. This paper aims to emphasize all the problems plaguing this therapeutic modality and to suggest remedies to enhance its progress and development.

INTRODUCTION

During the last two decades the considerable progress in understanding the biological mechanism of action of ozone has not been paralleled by a congruent progress in clinical results with the exception of a breakthrough in Orthopedics. Herniated disc (frequently L4-L5) is frequent and painful and can be often cured by the administration of a single volume of oxygen (O2)-ozone (O3) mixture (O3 about 150-180 µg in 4-6 mL of O2) injected into the affected nucleus pulposus [1]. By spreading the word, many thousands of patients undergo this treatment every year in all Continents. On the other hand, by using the classical and safe major ozonated autohemotherapy (M-O3-AHT), no real progress has been made for the treatment of vascular diseases (stroke, chronic heart disease, CHD) and peripheral obstructive arterial disease (POAD) [2].

Although they represent the first cause of death and in spite of a possibly valid ozone therapy, these diseases remain in the realm of orthodox medicine with meager results for several reasons. The first problem is that randomized and well controlled clinical studies are still lacking because ozone therapy has no sponsors and is actually either objected or unknown to clinical scientists. A second problem is that the M-O3-AHT must be performed for several months thus being expensive and cumbersome. Practitioners can do that but, by being carried out with different, often unsuitable procedures and schedules, results are not scientifically acceptable.

The negligence and disinterest of most Health Authorities and the overpower of pharmaceuticals, which can profusely support clinical researches as well as clinicians, represent one of the main obstacle for the progress of ozone therapy. Moreover, a crucial question is if ozone therapy intended as a real scientific endeavor is correctly pursued or, by remaining in practitioners’ hands, is and will remain an obscure complementary approach. Therefore, there is an urgent need to improve the efficacy of M-O3-AHT. This is not a naïve question and indeed regarding M-O3-AHT, which theoretically has the power to really improve some human diseases [2], an objective evaluation of the state of the art is necessary and is the aim of this paper. The following aspects will be examined:

1) Who practices the M-O3-AHT and in what Countries?

2) What kind of ozone generators are in use? Are all of these generators safe and precise?

3) Are the present guidelines correct, effective and safe? Can they be improved?

4) A few of the present methodologies are of doubtful value and may be dangerous or ineffective.

5) The constant need to teach the most correct procedure to the ozonetherapists.

6) Unless randomized and well controlled clinical trials in vascular diseases and age-related macular degeneration (ARMD), dry form, are performed, ozone therapy will remain in limbo.

1) Who practices the M-O3-AHT and in what Countries?

With rare exception, ozone therapy is in private practitioners’ hands. University professor and distinguished clinical scientists either do not know the existence of ozone therapy or they completely disregard it. One of us (V.B.), during several University’s congresses, has discussed ozone therapy and had conversation with prof. H. Sies, prof. M.U. Dianzani, Dr. H. Forman, who invariably thought that ozone therapy was an empirical and useless approach. Prof. W. Pryor, as other chemists, have been dead against this medical practice because for them ozone is “always toxic and should never be used in medicine”.

It is regretful that chemists do not understand the subtlety of biology where a calibrated but potentially dangerous stress is able to provoke a beneficial response. The only one who did not scorn the approach has been prof. L. Packer, a biochemist expert in antioxidant compounds, who actually wrote a letter saying that he firmly believed in the correctness of the concept.

In some Countries as Canada and England, some practitioners of naturopathy and technical engineers practice ozone therapy but hopefully avoid to perform M-O3-AHT. In theory only physicians should carry out this procedure but it remains uncertain their knowledge of the problem. Often they practice without having followed an appropriate course and simply follow the instructions, not necessarily correct or adequate for different diseases, of the ozone generator’s producer.Another disturbing fact is that the physician, aiming to do the best for the patient, most often associates ozone therapy with phytotherapy, or homeopathy, or even magnetotherapy thus making any therapeutic results incomprehensible and useless for evaluation.

Table I shows that M-O3-AHT is performed in many Countries and, while in some there are two or three societies of ozone therapy most often in conflict of interest, in others ozone therapy is still in the initial phase. Germany has the higher number of private practitioners but to our knowledge M-O3-AHT is not practiced in University hospitals. The same happens in Italy and practically in all Countries with the exception of the Russian Federation, probably Ukraine, Cuba, India and China where the Health Authorities allow ozone therapy performed in public hospitals. This is so because they have to satisfy too many patients and whenever possible, ozone therapy helps to keep medical expenses very low. This behavior is laudable although, as it will be discussed in 4), the quality of the service is not always valid.

2) What kind of ozone generators are in use? Are all of these generators safe and precise?

This is one of the crucial points because a good ozone therapist performs a bad treatment by using a defective generator. Until 1990 they were unreliable but today a valid generator is built with the best ozone-resistant materials such as AISI316L stainless steel, pure titanium grade 2, Pyrex® glass, Teflon®, Viton®, avoiding any other material such as Al that could be released due to O3 oxidation. Moreover, a precise photometer reading O3 concentration at 253.7 nm, within the Hartley band, is essential for checking on a digital display the O3 concentration in the gas mixture (medical O2 ≥ 95% + O3 ≤ 5%) flowing into the syringe during withdrawal. Owing to the decay of the Hg vapour lamp, the photometer must be checked every 6-12 months depending on its utilization.

Another photometer measures O3 concentration at 600 nm (Chappuis band) but it is 2500-fold less sensitive. The generator must be checked once a year and, if necessary, adjusted on the basis of O3 concentration measured by the iodometric method considered the gold standard. When O3 reacts with the KI solution, iodine is generated and the solution acquires an amber colour which, upon reduction with a titrated solution of Na2S2O3 and a starch indicator allows the determination of the O3 concentration with a reproducibility of about 2% with the measured O3 concentration. Owing to O3 rapid decay, what is very important is firstly the immediate use of the gas mixture and not so much small changes (± 1%) of concentration. Secondly, polypropylene, silicon–coated syringes must be used only once.

Most of the medical generators can deliver the O2-O3 mixture from 1 to up to 110 µg/mL, at a slightly higher atmospheric pressure and these are safe. However, there is at least one German generator working with the so-called “hyperbaric method”. This instrument delivers from 0 to 70 µg/mL of O3 with a gas constant flow of 0.9 L/min. The term “hyperbaric” appears misleading because the O2-O3 gas mixture has a maximal pressure of 1.05 bar, hence as all other generators. The only difference is that the infusion of the ozonated blood into the patient occurs at a more elevated pressure (~ 200 mbar) similar to the arterial pressure of the patient.

That is why this method is denominated “hyperbaric”. It is important to emphasize that the O3 concentration does not increase as if O3 was under hyperbaric pressure and therefore the advantage is only a faster infusion that obviously must be well regulated to avoid embolism. How relevant is this faster infusion remains to be ascertained.

In reality there are too many different ozone generators, some of which do not have the photometer or do not have the CE symbol. Some generators are less expensive but of poor quality and, when properly checked, do not deliver the presumed O3 concentration. This is a serious pitfall that makes impossible to accept reliable data from practitioners.

Almost needless to say that any type of generator must be provided with an ozone destructor, i.e. an effective catalyzer system to insure the conversion of excess or unused O3 back into O3. O3 must never pollutes the air and must not be inhaled at anytime. Finally, the gas mixture to mix with blood must be always filtered (0.2 µm pore diameter) to prevent bacterial contamination from medical O2, which is not sterile.

3) Are the present guidelines correct, effective and safe? Can they be improved?

Several guidelines have been presented at different times and will be compared [3-5]. The older one and still partly used in Germany is the most conservative and regarding M-O3-AHT has been devised by Ozonosan-Hansler and based on the use of 250 mL glass bottles with a microporous device (the so-called Mikro-Perl system), which is used for insufflating the gas mixture directly into the 50 or at most 100 mL of blood anticoagulated with sodium citrate. The sudden gas inflow causes an intensive foaming that almost fills the bottle. After a few seconds mixing, the bottle is turned upside-down and the ozonated blood infused into the donor, via the same tubing used for blood withdrawal.

The general rule is to avoid the gas bubbling into blood but, in this case, it has been claimed that O3 instantaneously mixes with blood. The examination of the ozonated blood showed that the PaO2 have barely reached 95 mmHg and hemolysis was 3-5%. This is not surprising because the intensive foaming causes a sudden modification and breakdown of the erythrocyte membrane. Several years ago, a German ozonetherapist told us that the rapid infusion insured a further activation of the circulating blood like the spreading of wildfire under a gale.

This sounds romantic, but it is not supported by experimental data. Useful O3 concentrations are said to be in the range of 5-25 µg/mL of gas per mL of blood. These concentrations are said to be very active but clinical results in different diseases have never been published in peer-reviewed journals. Moreover, no comparative evaluation between this method and the one using 500 mL glass bottles (25 mL sodium citrate 3.8% + 225 mL of blood has been performed; in the latter case, O3 concentrations ranging from 10 up to 80 µg/mL gas per mL of blood, 0.21-1.6 mM) has been determined as the useful “therapeutic window” [6].

On the belief that the German guideline has not been influenced by the homeopathic concept, our experimental work has aimed to clarify the biochemical modifications of human blood and to understand how ozone acts. In line with a previous evaluation [7], it was found that O3, ten-fold more soluble than O2, at normal atmospheric pressure dissolves very rapidly in the water of plasma and immediately reacts, partly with hydrosoluble antioxidant of plasma (ascorbic acid, uric acid, GSH, free cysteine) and with unsaturated fatty acids transported by albumin [6].

After 5 min of gentle mixing the blood with the gas mixture, O3 is totally exhausted and acts as a pro-drug. The multiple reactions are now well known: Aa is partially oxidized to dehydroascorbate, uric acid to allantoine and GSH to GSSG. The generated H2O2 as a ROS creates a very transitory gradient between plasma and blood cell intracellular water and is essential for activating a number of biochemical reactions [6]. The generated alkenals (lipid oxidation products, LOPs), mainly 4-HNE, form an adduct either with Cys34 or with nine nucleophilic groups (Lys and His) available in albumin [8,9] which is the most important antioxidant preventing any damage on cell membranes [10].

With this procedure, the PaO2 raises up to 400 mmHg and hemolysis remains negligible if the total antioxidant capacity is in the range of 1,4-1,8 mM [11]. Our recent metabonomic study has shown that an O3 concentration of 10 µg/mL per mL of normal human blood (0.21 µmol) is practically ineffective because O3 reactivity is totally quenched by antioxidants [12]. By increasing the O3 concentration up to 80 µg/mL per mL of blood (1.6 mM) the antioxidant capacity is transiently reduced of about 30% and the hemolysis is still less than 1% [13]. Only by significantly increasing the O3 concentration and exhausting the free antioxidants in plasma, the hemolysis goes up (e.g. >5% at 800 µg/mL) [12].

Needless to say that a progressive increase of O3 concentration (from 20 to 160 µg/mL per mL of blood, 0.42-3,2 mM) is also paralleled by an increased generation of H2O2, alkenals and hemolysis. These data indicate that our therapeutic window (0.42- 1.6 mM) is quite safe. Actually, the slight increased hemolysis is favourable because free Hb, bound to haptoglobin, after being taken up by reticulo-endothelial system, enhances the release of heme-oxygenase-I (HO-I) which is one of the most protective enzymes [14].

Indeed, once patients have become ozone-tolerant, it would be interesting to evaluate the therapeutic activity of the highest range of O3 concentration (1.6- 3.2 mM) in ozone-resistant diseases. It is very unfortunate that old experiments unphysiologically performed with 3-fold washed human erythrocytes showed their damage when tested even with low O3 concentrations [15,16]. These results have negatively and erroneously influenced the search of appropriate O3 dosages and have conditioned the present guidelines.

While it is true that the recommended amount of sodium citrate is a good anticoagulant without any risk, it appears worthwhile to evaluate the relevance of Ca-heparin. In this case the physiological Ca2+ level (about 1.0 mM) remains available and the production of some cytokine is significantly enhanced in comparison to ozone stimulation of the same blood samples treated with citrate [17]. This is a relevant finding when an immune response needs to be improved. Furthermore, the experimental addition to blood of 5 up to 25 mM Ca2+ prior to ozonation, further increased pro-inflammatory cytokine synthesis.

Apparently, the acute oxidative stress, by enhancing the plasmatic Ca2+ entrance into the cytoplasm, potentiates the synthesis of cytokines. Therefore, it is felt that, when necessary, the option to use Ca-heparin plus an extra 5 mM Ca2+ could be useful in immune-suppressed patients during an infection or after chemo-radiotherapy. Almost needless to say that before using heparin, one MUST evaluate if the patient uses already anticoagulants and does not present dyscoagulation. If not, it is suggested not to use more than 20 IU heparin per mL of blood and O3 concentrations above 40 µg/mL gas per mL of blood because Ca-heparin enhances platelet aggregation [18].

After this methodological digression, the question is: how many ozonetherapists perform the correct M-O3-AHT in 500 mL glass bottles? In Italy and likely in other Countries the real situation is worrisome because until recently some ozonetherapists were still using PVC bags idoneous only for the blood bank. PVC bags should never come in contact with O3 because, as it was demonstrated [13] they release phthalates and plastic microparticles (2-25 µm size) into the ozonated blood. In fact, their use for M-O3- AHT has been prohibited by the Italian Ministry of Health since 2002. As a bad example, they are still used in Turkey by some physicians but it is hoped that they will be substituted by glass or polypropylene bottles.

Unfortunately, there is an anarchical trend because every ozonetherapist decides on his own irrespective of guidelines. Moreover, since Russians have publicized the use of ozonated saline in substitution of M-O3-AHT, this approach is being used in other Countries because it is very cheap, quick to perform and as it will be discussed (Section 4) dangerous or scarcely effective.

The most recent guidelines are those published by ISCO3 [5]. On the basis of different advices, O3 concentration, volume of gas and schedules have been reviewed even though there was not 100% agreement. On the whole, O3 concentrations have been slightly increased in comparison with the Hansler Ozonosan guidelines which, in some cases, use extremely low O3 concentrations. It must be said that this line of thought is not supported by the results of controlled and extensive clinical trials but rather by ozonetherapists’ practical experience. Even the present guidelines are not fool-proof and, on the basis of new data, they will need to be revised.

Owing to the complexity of the biochemical events elicited by ozone firstly on blood “ex vivo” and then after the infusion by the organism, the use of a fixed dosage is a nonsense because different diseases, different disease’s stages and different patients need a personalized approach. The most sensible advice is “to start low and go slow” especially when the practitioner cannot measure the initial total antioxidant capacity of each patient [5].
If the patients at the next session reports a feeling of wellness, the O3 dosage can be slowly and progressively increased. On the other hand, if he reports to have felt tired and sleepy, it is advisable to use a lower O3 dose. The reason is that it is impossible to foresee how different patients will respond against the acute, although calibrated, oxidative stress imposed by the ozone action.

This depends entirely by the disease stage, the age and gender and obviously every patient has a different capacity to react towards an acute homeostatic change. In some patients, this way of thinking allows to increase the O3 dose up to maximum of the therapeutic window (20-80 µg/mL of gas per mL of blood, 0,42-1,68 mM) because it means that the patient is able to continuously upregulate his antioxidant system. Moreover, to date it is not yet known which may be the optimal, if any, O3 concentration to elicit T-lymphocyte regulatory cells in autoimmune diseases. It has been supposed, but not yet discovered, if high concentrations, hence a plus of alkenals reaching the bone marrow, may stimulate the release of staminal cells, which would be useful to regenerate infarcted tissues.

4) A few of the present methodologies are of doubtful value and may be dangerous or ineffective. There is no doubt that the most critical disadvantages of the M-O3-AHT are twofold: the first is that, in most cases, the patient must go to the ozonetherapist’s clinic and the second is that each session will last about 30 min. Unfortunately, so far, as it happens for most of the orthodox drugs, a valid substitute to be simply used at the patient’s home has not been provided. As a consequence in the Russian Federation and at Cuba hospitals (their HealthAuthorities allow to use ozone therapy in public hospitals), where every day they have to treat thousands of patients, it appears impossible to perform M-O3-AHT for lack of time and money. Coincidentally, in 1994 was found that the simple physiological saline (0.9% NaCl) could be ozonated by bubbling O3 (70 µg/mL) in it for 10-15 min [13]. It was tested in ourselves but it procured an initial phlebitis.

At that high O3 concentration O3 dissolves in the saline, generates H2O2 and partly remains in solution. There is also a transient production of some HClO which, although it rapidly decays [19,20], is very irritating. Even if this approach appeared dangerous, Russian chemists, in 1995, decided to use it in patients by ozonating the saline with ONLY 2-3 µg/mL for 20 min. Moreover, early morning they ozonize many bottles, which will be infused into patients with some delay. They claim to have good results in ALL diseases but a comparative analysis with M-O3-AHT has never appeared in international peer-reviewed journals. In reality, Maslennikov and Gribkova have reported that a 50% decrease of symptoms can be regarded as a reliable improvement [21].

Therefore, there is no real proof that ozonated saline is therapeutically useful although it could exert a placebo effect. The lack of toxicity with 2-3 µg/mL of gaseous O3 mixture is understandable because, at the infusion time, 250 mL of saline may contain only 0.5 mg of residual O3 and H2O2 probably at a concentration as low as 0.01% . Thus both oxidants during the IV infusion will be promptly neutralized by the plasma antioxidants with a lack of biochemical effects. On the contrary, M-O3-AHT on average receives about 8-10 mg O3 (20- fold higher) and is pharmacologically active.

As the infusion of ozonated saline is very cheap, minimal time-consuming than M-O3-AHT and quite remunerative for the unscrupulous practitioners, physicians have started to use it also in several Western Countries and it is foreseeable that it will be extensively used in poor Countries, possibly at a dangerous, higher O3 concentrations. Indeed, Ikonomidis et al. have reported that they maintain the saline solution under a constant flow of O3 during i.v. infusion but they warned that the maximum amount of O3 daily administered is usually 4-5 mg and should never exceed 8-10 mg [22]. In their publication they have stated “if we exceed these rates, the over coagulation syndrome starts” and they strongly recommended to perform coagulation tests before starting therapy. These warnings reinforce our preliminary objection to this approach.

Moreover Foksinski et al. Have detected 8-oxodeoxyguanosine, a typical oxidative DNA damage in lymphocytes of atherosclerotic patients after the infusion of ozonated saline, that is a worrisome result never detected after M-O3- AHT [23]. It is clear that ozonation of saline is an unstable process because, if it is not promptly infused, O3 totally decomposes in 60 min and therefore this preparation does not comply with the pharmacotherapeutic principle, which requires the stability and exact knowledge of the constituents. Another problem is that commercial ozone generators differ and often they have a variable gas output, i.e. from an output of 1 up to 3-5 L per min and consequently the total amount of O3 delivered can vary from 1 up to 5-fold.

Therefore some ozonetherapists, without a suitable preparation, may risk to intoxicate the patient!Another disturbing factor is that blood flow in the cubital vein varies especially in women with the consequence of an uncertain blood/H2O2-O3 relationship implying a variable bio-oxidation. In conclusion a further diffusion on the use of ozonated saline, although less dangerous than the direct i.v. infusion of O2-O3 that some practitioners of naturopathy still perform, does not represent an improvement and in any case it will be never accepted by the FDA or by EU Health Authorities.

Another route of administration of O3 is the insufflations of O2-O3 gaseous mixture into the rectum for treating chronic colitis and fistulae. In 1936, when Dr. Aubourg proposed the procedure [24], this was a reasonable application which it has been now extended to treat all diseases. The insufflations of a volume of 200-300 mL of gas into the rectum-colon at O3 concentration ranging from 5 to no more than 35 µg/mL can be precisely done but it remains unpredictable the effective O3 dose because of a possible flatulence and the presence of a more or less abundant luminal content.

Thus, it is obvious to predict that a significant fraction of the dose will be neutralized by fecal material. The residual O3 dose will dissolve and be neutralized into the layer composed of glycocalix and mucoproteins covering the mucosa. O3 will instantly and fully reacts with these compounds but only a LOPs fraction will be absorbed with O2 by the mucosa. Indeed, in well-controlled rabbit experiments a transient presence of LOPs was shown in the portal vein [25], but obviously the real therapeutic effect on vascular diseases, diabetes and cancer remains uncertain.

Once again, while in Western Countries many patients object this route, at Cuba they have thousands of patients to be treated every day and they have adopted this rapid, inexpensive procedure in all patients always administering 200 mL O2-O3 mixture with the excessive O3 concentration of 50 µg/mL (O3 dose: 10 mg). Firstly, the O3 concentration is too high and during prolonged use may be mutagenic; secondly, this route, being so uncertain, should not be used in controlled clinical trials. Indeed, it seems that in only twenty days that dosage could cure (?) the diabetic foot in a number of patients treated with rectal ozone and topical ozonated oil [26].

5) The constant need to teach the most correct procedures to the ozonetherapists This is absolutely essential and if Western Health Authorities one day will start to consider ozone therapy as a valid approach, the first requirement for a physician is to have profitably followed a theoretical and practical course of at least three days at the University level. Today, at least in Italy, conscientious physicians are keen to learn all the basic information about ozone and its mechanisms of action.

This is the only way to fully understand the chemical and biological problems and become able to calibrate the therapy for different diseases and patients. Regretfully, there are also a few unscrupulous physicians, who practice ozone therapy just pushing the setting knobs of an ozone generator. They will use ozonated saline mostly for performing the illicit doping in naïve athletes or they may harm patients and further discredit this approach. Annual congresses, or refreshing brief courses would be equally useful. Obviously, even expert practitioners can make useful information but they remain anecdotal and untrusty because it remains uncertain the reliability of their ozone generators, hence real O3 dosages. Often they frequently combine ozone therapy with other therapies and therefore they cannot perform a clinical trial.

6) Unless randomized and well controlled clinical trials in vascular diseases and age-related macular degeneration (ARMD) dry form are performed, ozone therapy will remain in limbo.

Official medicine correctly requires that any new medical procedure undergoes a rigorous control versus the gold standard according to the Helsinki regulations. During the last decade, in spite of having prepared several protocols, we could perform only one trial in PAD patients (III and IV stages) by using the extravascular blood circulation against O2-O3 (EBOO) because the expensive gas-exchange devices had been donated [27].

In such a case, the methodology is far more complex than M-O3-AHT and only a small number of patients could be evaluated for a too short time. Nonetheless clinical results showed a clear improvement of patients treated with EBOO in comparison to the gold standard (Iloprost infusion).

The basic concept is to have two arms: one is the control patients, who are treated with the optimized orthodox therapy (not always curative), while the other arm (including an equal and comparable number of patients) treated with the same orthodox therapy plus M-O3-AHT should markedly improve the outcome. On the basis of preliminary data, a minimal number of 30 + 30 patients should be enough to yield a statistically significant result if ozone therapy is truly effective. The problem are two-fold: one is to obtain the permission of the Ethical Committee and the second is to find support for paying insurance and other expensive costs. Priority must be given to diseases most suitable to be treated with ozone therapy.

1. a) Vascular diseases such as stroke, chronic heart failure (CHF) and peripheral obstructive arterial disease (POAD). All together they represent the first cause of death;
2. b) Degenerative-ischemic disease as the atrophic (dry) form of age-related macular degeneration (dry-ARMD). This is far more frequent than the exudative form and it is very debilitating;
3. c) Chronic obstructive pulmonary disease (COPD), which is the fourth cause of death. Please note that b) and c) represent a serious social-economic problem;
4. d) Diabetes with its various manifestations [28]. The present “epidemic” diabetes with so many awful complications is a disease requiring great attention and certainly cannot be cured in 20 days [26];
5. e) Muscular-skeletal pathology. Within this broad area, it is felt that an appropriate metanalysis study showing the brilliant results achieved in hernial disc is most likely to already demonstrate an excellent results able to boost up the ozone as a therapeutic agent.

Finally there are several other pathologies such as chronic infectious diseases (HIV-AIDS, chronic hepatitis, TBC), cancer, degenerative diseases where ozonetherapy may be useful as a supportive therapy but unable on its own to cure the pathology. This aspect will be considered later on.

The “stroke” protocol, in our mind, is the most urgent and it has great possibilities to be successful. Moreover about 80% of patients with stroke, who arrive later than 4.5 hours at the stroke unit since the initial symptoms are NOT eligible for trombolysis and therefore can only be treated with traditional medications. The result is poor because mortality, morbidity and disability increase very much. Thus this 80% of patients, almost abandoned by official medicine, could also be treated with M-O3-AHT, twice daily for at least ten days and from preliminary results they are likely to markedly improve beyond the best imagination. If this result can be demonstrated and published in one of the best medical journals, ozone therapy will receive great attention. A multicenter trial would be very useful because, by using the same protocol, the value of the results can be enhanced.

After two decades of work in ozone therapy, in spite of the fact that the basic mechanisms of action of ozone in biological fluids have been clarified, orthodox medicine remains skeptical about its medical value and, with the exception of Cubans and Russian Health Authorities, it tends to ostracize this approach in public hospitals. The FDA, the USA regulatory agent, continues to predicate that ozone should not be used as a therapeutic agent. To date, the European Medicines Agency (EMA) and the Therapeutic Goods Administration of Australia have also not approved any form of ozone therapy.

CONCLUDING REMARKS

This paper may be found provocative but the aim is to underscore the problems discussed in the previous sections plaguing ozone therapy. Some are intrinsic in the methods but several others have been created by unscrupulous ozonetherapists, not to mention that nobody acts as a sponsor of our research and all the time both official medicine and Health Authorities ostracize our efforts. Consequently, it appeared worthwhile to call the attention of all ozonetherapists in the attempt to correct our mistakes and in order to improve and above all to show the value of ozone therapy in some diseases. This is difficult because it requires knowledge, fundings and good will but in our opinion it is the only solution. At the moment we are still at a cross-road and is up to us decide if we will enter the main road or we will prefer to remain in a blind alley. Our recent review entitled “The ozone paradox: ozone is a strong oxidant as well as a medical drug” has emphasized the dualistic effect of this gas [6]. Everyone knows that ozone is a toxic gas but it remains to us to show its validity and safety as a therapeutic agent.

Note. The compilation of the table has been possible thanks to the precious assistance of ISCO3 Legal Advisor, Roberto Quintero, based on his own research and information provided directly by national associations, international federations and/or ozonetherapists. It is to emphasize that the presented statistic is necessarily incomplete because the national associations do not have up to date figures of all physicians who practice ozonetherapy. Moreover for Countries not included in the list it does not automatically mean that ozonetherapy is not practiced in any of them. Indeed, at the recent “III World Congress of Oxygen-Ozone Therapy” (Brescia, Italy, 14-16 April 2011) we learnt that ozone therapy is already practiced in Bolivia, Costarica and Thailand. The readers are invited to perfect the table content.

The pioneer of the modern ozone therapy: Professor VELIO BOCCI

Roberto Quintero Marino

Resumen

The sensibilities for the sick people and looking for the best available and less expensive means to cure them, has been one constant features of the Italian Professor Velio Bocci, to the point that most of his entire life has been devoted to helping those in need of scientific medical assistance. In a similar way as his Siena ancestor countryman Giacomo Sansedoni did. A picture of this prominent physician is at the walls of the Siena Santa Maria della Scala Museum painted by the Siena Baroque painter Bernardino Mei (XVII Century).

Soon contact with the death

Son of a very religious mother and an artistic father, Professor Bocci first direct and cruel contact with the death occurred when he was about 14. He saw his best friend dying of miliary TBC, incurable at that time; a few years later his partner in collecting fossilized fishes to clarify the crucial role of evolution on Earth and living species, the experienced biologist Professor N. Benacchio died for an acute peritonitis on July 1944. Actually these tragic events impelled him to study and become a physician.

Physician vocation and meeting the love

His interest for the medicine was so high that although he had been awarded a disliked accountant degree, he enroled as a medical student at the University of Siena. From the very beginning he excelled being the first of his course to be awarded the Medical Doctor degree in July 1954 with 110/110 cum laude.

Based on his solid education and always looking for ways how to improve his knowledge and provide a much better services to his patients, he was awarded a fellowship for specializing (September 1955) in Respiratory Diseases at the famous Sanatorium in Rome, named to Carlo Forlanini, the inventor of pneumothorax in 1882.

In addition to his great qualities, Professor Bocci was lucky enough because in the same Sanatorium he met the physiotherapy specialist Helen Carter Balston getting married in August 1959. Since then she has been his only love, along with his daughter a music teacher at the Siena Conservatory Erica Margaret, and his son the associate professor of art at the Georgetown University in Washington, DC. Roberto. Professor Bocci keeps saying that he “has been very fortunate to always have Helen, Erica and Roberto always standing by him and encouraging his research work.”

A journey devoted to the knowledge, research and teaching

His two most difficult years in the research area started by the end of 1957, when he became an assistant in the Institute of Physiology at the University of Siena. He had to learn and perfect the method of the isolated heart perfusion by trial and errors. It was a worthwhile effort because he learnt that any time one can understand his mistake, it is a step ahead.

During three years (1959-1961) he worked in Biophysics, with A.S. MacFarlane at the National Institute for Medical Research in London.

Having been awarded a NATO fellowship he worked with H. McIlwain in Biochemistry at the Maudsley Institute in London (1964-1965) and he fondly remember a few Sunday’s walking in the London parks with Helen and children.

With the interest of learning more and knowing how important and stimulating is to work with the best scientists, he and his family went to the University of Buffalo from 1967 to 1969. Prof. R. Winzler awarded him a Buswell and Fullbright fellowship and he enjoyed very much to do research in an excellent Biochemistry department. He is very glad to remember how Helen and the children enjoyed to go and see the nearby Niagara Falls.

His studies, work and research abroad practically ended in 1971, when was appointed Professor of General Physiology at the University of Siena, Italy and from 1978 to 2002, Director of the Institute at the Faculty of Pharmacy. He spent brief periods in Biochemistry at the University of Uppsala (1972) and in Neurochemistry at the University of Gottingen in 1976. Owing to the fact that he felt that blood is a wonderful fluid, he also specialized in Clinical Hematology at the University of Florence (1975).

On the whole Professor Bocci fields of research include important subjects such as plasma protein separation by different methods, radioisotope-labeling and then studies of plasma proteins turnover, neurochemistry of isolated neuronal cells and several aspects of erythrocyte metabolism.

perfusing organs such as liver, kidney, lungs and heart, during the period 1967-1990 he became the world leader on the metabolism, pharmacology and physiological significance of interferons. The achieved results have been highly cited in many international journals and Encyclopedia.

More recently, he became attracted by the possibility of inducing an endogenous production of interferons and other cytokines using ozone. He has written that he felt “a lucky man because towards the end of my academic life, in 1988, by mere accident, I stumbled on the ozone problem that although quite controversial, is a real trovel.” Since 1991, he has contributed crucial research papers by clarifying the basic mechanisms of action of ozone regarding its biological effects aiming at making ozonetherapy a truly scientific endeavor.

He has personally contributed to develop three clinical trials, of which two at the Siena University Polyclinic: the first regarding age-related macular degeneration (dry form) (1996-2001) and the second regarding chronic limb ischemia (2002-2005). Both studies, reported in international journals, have well clarified the great advantage of ozonetherapy in comparison to orthodox treatments. A third study (1998- 2000) was performed at the hospital at San Patrignano (Rimini) to evaluate the effect of ozonated autohemotherapy in HIV infection. An improvement of the quality of life was noted but the infection was not modified.

Moreover, he has gratuitously practiced ozonetherapy in a charity clinic (Misericordia at Taverne D’Arbia, Siena) from 2005 up to March 2008: While excellent results were achieved in various ischemic diseases, with the exception of a transitory feeling of well-being, preterminal cancer patients with liver and lungs metastasis, previously heavily treated with chemotherapy, did not show any improvement.

Dissemination of the ozonetherapy

Professor Bocci has given seminars on problems related to interferons and ozonetherapy in several Italian, English, Belgian, Dutch, Greek, Swiss, German, Russian and American

Universities and has participated during numerous international and national Congresses as session chairman and speaker.

He is the author of about 480 publications and monographs, mostly published in international, peer-reviewed journals including a book on Interferons (1993) and three books on oxygen-ozone therapy (2000, 2002, 2005). The last two are in English: “Oxygen ozone therapy. A critical evaluation”, pag 1-440, 2002, Kluwer Academic Publishers Dordrecht, The Netherlands and the second: “Ozone. A new medical drug”, pag. 1-295, 2005, Springer, Dordrecht, The Netherlands. The second edition of the latter book has been just printed. So far, these books have been translated into Chinese, Japanese and Greek .

Triumphs obtained

In 1995, he was awarded the Hans Wolff prize for innovative researches in the field of ozonetherapy. By considering him the top expert of ozonetherapy, the International Ozone Association (Zurich) invited him to hold the lecture on “Ozone in Biology and Medicine” at the International Ozone Symposium (Basel, October 21-22 1999) during the 200th Anniversary of the birth of the ozone discoverer C.F. Schönbein. He was awarded the “Stramezzi” prize for his books on ozonetherapy by the Academy of History of Medical Art in Rome (October 2003)

The Ministry of Education has nominated (May 2003) him Emeritus Professor at the Department of Physiology, University of Siena.

Difficulties and obstacles: Permanent companions of the pioneer.

Professor Bocci achievements in the research and dissemination field have been accompanied by disappointments and obstacles of different sorts. In his own city, – Bocci wrote in 2006 – the Siena hospital chief doctor was always concerned about the legal aspects of the ozonetherapy, because “if the patient dies he will be accused of having used a non-validadted therapy. The Ethical Committee also refuses to give permission for a trial because there is not yet any prospect that ozone therapy could represent a valid support.

” Prestigious journals such as the New England Journal of Medicine and FBRM have not given him the chance of opening a scientific dialogue on ozonetherapy. The World Health Organization (WHO) according to Bocci’s words “has remained disinterested” on the usefulness of biooxidative therapies.

Professor Bocci knows quite well the difficulties in advancing the ozonetherapy because of lack of financial support to conduct enough research. In a paper dated 2005 he clearly expressed the problem for the research: One of the problems of the ozonetherapy “is the lack of financial support for performing controlled and randomized clinical trials, who results are critical and urgently needed to prove the validity and atoxicity of ozone therapy in various diseases. Objective results from clinical studies represent the unique possibility of convincing the biased opponents of this approach.

The private ozone therapist, or even the small existing national associations, in comparison to the pharmaceutical industries that can register an annual profit of 340 billion dollars, have no financial power and how can an ant compete with an elephant?”

In his presentation at the International Meeting of Ozone Therapy Schools organized by AEPROMO in Madrid in 2010 the Professor Bocci said: “It is unpleasantly surprising that in the field of complementary medicine oxygen–ozonetherapy is not even mentioned because it is a recent development but mostly because it has no sponsors. Although the development of this topic has clearly shown to be well within the classical biochemistry and pharmacology, in contraposition to homeopathy, acupuncture, aromatherapy, Ayurveda and Chinese medicine, it remains unknown.”

Professor Bocci is currently a retired person from the academic field and has recently said that he is very disappointed for the extremely slow clinical progress and the minimal, if any, recognition of the validity of ozonetherapy within orthodox Medicine. However, he continues in the path of continuing fighting for the ozonetherapy recognition. Instead of going to enjoy a well deserved retirement, he has put aside time to continue helping the development of the ozonetherapy and has willingly accepted the Presidency of the International Scientific Committee of Ozonetherapy (ISCO3). Dr. Bocci hopes to be able to continue working with the expectation to see one day ozonetherapy included among the orthodox medical armamentarium. However, to achieve this goal controlled and well performed clinical trials remains of vital importance.

For his satisfaction he has warmly welcomed the legal advances done by the ozonetherapy in Russia, Cuba and Spain (in eleven out of 17 of its States) where this therapy has been regularized by the health authorities. In his own country, ozonetherapy has been also the object of regularizations at the Regions (States) of Cremona, Lombardia and Marche and by rulings of the Administrative Court in the Region of Lazio. He continues encouraging ozonetherapists to devote time and knowledge to regularize the ozonetherapy in their own countries.

The legacy of Professor Bocci is clear: “The antagonism of Health Authorities is responsible for delaying the application of ozone therapy to billions of patients and we must do the maximal effort to break this situation.”

Role of the women in the world

One feature not well known from Professor Bocci is his own research on women. He has published two books in English on social problems regarding the role of women in the modern society. He felt the absolute need of writing these two books: the first one entitled: “Only women can avoid the Extinction of the Human Race” (Aracne Ed. Rome, 2nd Ed. 2009, pp:1-264), describes the tragic history of mankind. Based on scientific data, it is proposed to re-evaluate and support the role of women in our society.

The second book entitled: “Women at the Helm” (Arena Books, Bury St. Edmunds, UK, 2009, pp:1-156); describes a road map for human survival from a scientific perspective. Crucial genetic, hormonal and brain differences, with the added factors of pregnancy, lactation and child rearing, have made women not superior to men but quite different. If women will have the chance to be a real guide, mankind will have a future, affirms Professor Bocci.

Basic publications of Professor Bocci on ozonetherapy

The following five papers briefly give a fair idea of the basic biology and usefulness of ozonetherapy in Medicine:

1. Scientific and medical aspects of ozone therapy: State of the art. Archives of Medical Research, 37 (2006) 425-435.
2. Is it true that ozone is always toxic? The end of the dogma. Toxicology and Applied Pharmacology, 216 (2006) 493-504.
3. The case for oxygen-ozonetherapy. British J. of Biomedical Science, 64 (2007) 44-49.
4. Basic Biological and Therapeutic effects of Ozonetherapy in Human Medicine, Review published by UNESCO-EOOLS Encyclopedia, 2008.
5. The ozone paradox: ozone is a strong oxidant as well as a medical drug, Medicinal Research Reviews.29, (2009) 646-682. All the other papers can be traced in PubMed. The second edition of his book “A new medical drug”, 2nd ed., 2011, XXI, 315 p. 25 illus., Hardcover, is available at Springer: (http://www.springer.com/medicine/book/978-90-481-9233-5?changeHeader)

Revista Española de Ozonoterapia, vol. 1, nº 1. pp. 93-98, 2011

II International Medical Ozone Federation Congress. IMEOF III Mexican Ozonetherapy Association Congress. AMOZON “For the Integration of Ozonetherapy into the Conventional Medicine” Abstract Book

Preface
The committee of this Congress in collaboration with IMEOF-AMOZON gives the warmest welcome to those professionals who practice Ozone Therapy.

This third Mexican Congress of Ozone Therapy and the second Congress of IMEOF under the slogan: “For the Integration of Ozone Therapy in Conventional Medicine” will raise different medical applications of Ozone-Oxygen Therapy in different pathologies as well as the legal aspects related with its use, looking for its integration and acceptance by the Scientific and Conventional Medicine.

This meeting will include interesting pre-congress workshops in charge of recognized specialists in each one of their fields which will contribute to enrich the correct and professional use of this therapeutic tool.
This congress will also raise important and relevant topics from today’s world, having the presence of national and international high public figures in the Ozone Therapy field, which at the same time will promote the international academic, scientific and social collaboration and exchange.

The high scientific level of the national and foreign speakers and the wide spectrum of nowadays specialties, justify the execution of this important event that will show the present state and development of Ozone Therapy in the different topics that will be raised.

We appreciate your trust and interest for the organization of this International Congress IMEOF-AMOZON and we would like to show our gratitude to those National and Foreign Companies which have chosen this event as framework for the presentation, promotion and marketing of these products.

Finally, but not less important, we would also like to invite you to enjoy the beautiful city of Cancun, one of the most important and international touristic attractions and the main destination in Mexico. It’s fantastic beaches, archeological history, cultural infrastructure, friendliness and, above all, services that it provides, will allow this event to take place in the best environment of kindness, brotherhood and friendship for its great organization and development.

Treatment for Radicular Compression and Spondylodiscitis by Ozone Therapy. First Experience in Bolivia
Alvarado Ramiro, M.D. Police Hospital and Arco Iris Hospital, La Paz, Bolivia.

This study reports the first experience in Bolivia from August 2003 to June 2011. on treatment of 492 patients with herniated discs in cervical thoracic and lumbar level and 14 patients with spondylodiscitis (disc space infection). Patients (492) were treated with radicular compression at cervical, thoracic and lumbar level 285 males and 207 females. At first an intra discal injections of ozone at 30 micrograms was performed, followed by 15 or 20 paravertebral injections at 20 micrograms and 14 cases of spondylodiscitis (disc space infection) five cases post surgical infection and 9 of spontaneous origin.

Among the 492 patients with radicular compression, it was observed that sensory and motor dysfunction were completely abolished in 335 patients (68 %), improved in 98 patients (20 %), with poor results and the dysfunction remained unchanged in 59 patients 12 %, some of them underwent surgical treatment. As a whole 433 patients, 88% obtained excellent and good results. Among the patients treated for spondylodiscitis, all of them obtained very good results. With the treatment of ozone therapy it is possible to obtain excellent and good results in 88 % of the cases. Ozone is a useful alternative in its effectiveness. Using this minimal invasive method, complications like fail back syndrome can be avoided.

Tratamiento de la Compresión Radicular y la Espondilodiscitis con Ozonoterapia. Primera Experiencia en Bolivia

Se realizó la primera experiencia de Ozonoterapia en Bolivia desde Agosto de 2003 a Junio 2011, con 492 pacientes portadores de hernias discales a nivel cervical, torácico y lumbar también catorce pacientes con espondilodiscitis (infección del espacio intervertebral). Se trataron 492 pacientes con compresión radicular a nivel cervical, torácico y lumbar. 285 varones y 207 mujeres Primero se realiza inyección intradiscal de mezcla de oxigeno-ozono a 30 microgramos, seguidas de 15 a 20 inyecciones paravertebrales metaméricas de ozonoterapia a 20 microgramos y 14 casos de espondilodiscitis, cinco infecciones post quirúrgica y 9 espontaneas.

El la compresión radicular de los 492 se observo que las alteraciones motoras y sensitivas fueron abolidas en 335 pacientes 68%, mejorados 98 pacientes, 20 % y sin ningún resultado en 59 pacientes 12 %, algunos de este grupo fueron intervenidos quirúrgicamente, lo que equivale a un 88% de buenos resultados con la Ozonoterapia. En los pacientes con espondilodiscitis la evolución fue satisfactoria en los 14 pacientes. Con el tratamiento de Ozonoterapia, se consigue excelentes y buenos resultados en un 88 %, de los casos la efectividad del uso de este nuevo método mínimamente invasivo, no tiene complicaciones, retorno rápido a la actividad laboral, de bajo costo evitando la intervención quirúrgica en la mayoría de los casos y sus secuelas como la fibrosis, columna inestable y el temido síndrome de columna fallida.

Treatment of Neuropathic Pain by Ozone Injections
Dr. Jaime Rebeil Félix
Head of Pain Clinic of General Hospital in Hermosillo, Sonora, Mexico

With the purpose of knowing about ozone effectiveness in neuropathic pain, we studied the use of ozone injections in neuropathic pain patient attending our Pain Clinic. The pain syndromes treated were the following: Carpal tunnel syndrome, cubital tunnel syndrome at the elbow, posterior tarsal tunnel syndrome, anterior tarsal tunnel syndrome, traumatic brachial plexus injuries, Pancoast syndrome, complex regional pain syndrome, narrow cervical canal, narrow lumbar canal, diabetic neuropathy, acute herpes zoster pain, post herpetic neuritis, trigeminal neuralgia, esphenopalatin neuralgia and occipital neuralgia. Ozone 10 µg / mL was injected directly at the pathologic process site, such as carpal tunnel or cubital tunnel, 3 to 5 mL volume. In the case of brachial plexus pathology either posttraumatic or compressive (Pancoast syndrome) ozone was injected directly in the brachial plexus by the inter scalene approach, 20 mL volume.

In the painful pathologies caused by nerve root compression at the cervical level by herniated disc or narrow cervical spinal canal, ozone was applied at the epidural interlaminar thoracic level, T1-T2 or T3-T4, 20 mL volume or directly on the brachial plexus by the inter scalene approach, 20 mL volume. In the cases of lumbar root pain caused by herniated disc or narrow lumbar spinal canal, we used the epidural caudal approach, 20 a 40 mL volume or the lumbar para vertebral approach, 20 mL directly over the nerve root or a combination of both techniques. In the cases of herpes zoster pain or diabetic mono neuropathy, ozone was applied according to the neuropathy location.

Example at the thoracic level we injected the ozone by the thoracic para vertebral approach directly over the affected nerve root, 10 mL volume or at the intercostal space, 10 mL volume. When the neuropathy affected cervical roots, we injected the ozone directly over the brachial plexus by inter scalene approach, 20 ml volume. In the case of trigeminal neuralgia, ozone was injected directly over the affected branch 5 mL volume and in the case of sphenopalatine neuralgia ozone was injected in the sphenopalatine fossa, 5 mL volume. Patients benefited from ozone application between 75 % and 90 % of cases, varying according to the pathology treated. We achieved pain relief over 70 % according to visual analog scale for more than six months. There were no serious complications.

Tratamiento del Dolor Neuropático Mediante Inyecciones con Ozono
Dr. Jaime Rebeil Félix Jefe de la Clínica del Dolor del Hospital General del Estado Dr. Ernesto Ramos Bours, Hermosillo, Sonora, México.

Con el objetivo de conocer la utilidad del ozono en el alivio del dolor neuropático. Se estudió el uso de inyecciones con ozono para el tratamiento de dolor neuropático en pacientes que asisten a la Clínica del Dolor. Los síndromes dolorosos tratados fueron los siguientes: Síndrome del túnel del carpo, síndrome del túnel cubital a nivel del codo, síndrome del túnel del tarso posterior, síndrome del túnel del tarso anterior, lesiones traumáticas del plexo braquial, síndrome de Pancoast, síndrome de dolor regional complejo, conducto espinal cervical estrecho, conducto espinal lumbar estrecho, neuropatía diabética, dolor por herpes zoster agudo, neuritis pos herpética, neuralgia del trigémino, neuralgia del esfenoplatino y neuralgia occipital. El estudio se realizó en los pacientes de la Clínica del Dolor que cursaban con dolor neuropático, a los cuales se les inyectó ozono 10 µg / mL directamente en el sitio donde se encontraba el proceso patológico, ej.

En el túnel del carpo, o el túnel cubital, un volumen de 3 mL a 5 mL. En el caso de patologías del plexo braquial, ya sea postraumática o compresiva (síndrome de Pancoast), se utilizó infiltración directa sobre el plexo braquial utilizando la vía interescalénica, un volumen de 20 mL. En la patología dolorosa por compresión de raíces nerviosas a nivel cervical por hernia de disco o conducto cervical estrecho se aplicó ozono por vía epidural interlaminar torácica a nivel de T1-T2 o T2-T3, un volumen de 20 mL o bien directamente sobre el plexo braquial por vía interescalénica 20 mL.

En los casos de dolor radicular lumbosacro por hernia discal o conducto lumbar estrecho se utilizó el abordaje epidural por la vía caudal, 20 mL a 40 mL, o el abordaje paravertebral, 20 mL, directamente sobre la raíz nerviosa afectada, o bien una combinación de los dos. En el caso de dolor por herpes zoster o mono neuropatía diabética la aplicación se realizó de acuerdo a la ubicación de la neuropatía; por ej.: a nivel torácico utilizamos un abordaje paravertebral torácico directamente sobre las raíces afectadas, un volumen de 10 mL o bien en el espacio intercostal, 10 mL.

Cuando la neuropatía era de raíces cervicales realizamos una aplicación directa sobre el plexo braquial por vía interescalénica, 20 mL. En el caso de la neuralgia del trigémino la inyección se aplicó directamente sobre la rama afectada, 5 mL y en el caso de la neuralgia del esfenopalatino inyectamos el ozono directamente en la fosa esfenopalatina, 5 mL.

Los paciente se beneficiaron con las aplicaciones de ozono entre el 75 % a 90 % de los casos, variando de acuerdo a la patología tratada, logrando un alivio del dolor superior al 70% de acuerdo a la Escala Visual Análoga, por un periodo mayor de 6 meses.
No se presentaron complicaciones serias. El ozono demostró ser un recurso terapéutico muy valioso en el manejo del dolor neuropático periférico, donde se logró alivio del dolor en la mayoría de los pacientes, con un mínimo de efectos secundarios y con un bajo costo económico.

Application of Ozone in the Interventional Treatment of Pain. Cuban Experience.
Carlos Amador Cobas Santos – Director, Pain Management Unit and palliative care, Ozone therapy department.
– Assistant Professor of Anesthesiology and Reanimation. Hospital Hermanos Ameijeiras, Havana, Cuba.
The discipline of the study and treatment of the pain is related with the application of the technical pain interventionists, procedure slightly invasive of diagnostic and treatment. The main procedures ozone therapy interventionists carried out in the Hospital Hermanos Ameijeiras of Cuba are the blockades epidurals, disko lysis, nerve blocks and infiltrations of the joint and outlying nerves.

In 3 years they were assisted in consultation 15285 patients, with an average for 23 patients’ consultation, to 19.1% they were carried out procedures, and of them 5.6% was with ozone, the infiltrations knee joint and shoulder stood out; they were carried out 7789 infiltrations paravertebral for affections of the rachis, In the unit surgical low fluoroscopic they were carried out blockades neurolytic using the ozone like half of contrast (107 patients), besides 1624 disklysis procedures with ozone, with 78% of excellent results; procedures like infiltration epidural, sacroiliac joint and spinal facets were treated with ozone (144 patients) with 68% good results.

The main immediate complication is the blackout, the other ones obey errors in the administration technique. The hernias dial them they represent 10% of the assisted cases, and 40% they represent to other spinal illnesses. The diagnostic technology of studies includes the RMN, TAC, electrodiagnostic studies and physical exam. The future of the technical pain interventionists one has to base on the efforts of studies of results validated by the scientific evidence.

Aplicación del ozono en el tratamiento intervencionista del dolor crónico. Experiencia cubana.
Carlos Amador Cobas Santos – Jefe de Servicio. Unidad intervencionista de dolor, cuidados paliativos y del departamento de ozonoterapia. Profesor Asistente. Hospital Hermanos Ameijeiras

La disciplina del estudio y tratamiento del dolor está relacionado con la aplicación de las técnicas intervencionistas de dolor, procedimiento mínimamente invasivo de diagnostico y tratamiento. Los principales procedimientos intervencionistas de ozonoterapia realizados en el Hospital Hermanos Ameijeiras de Cuba son los bloqueos peridurales, discolisis, bloqueos radiculares e infiltraciones de las articulaciones y nervios periféricos.

En 3 años se atendieron en consulta 15 285 pacientes, con un promedio por consulta de 23 pacientes, al 19,1 % se le realizaron procedimientos, y de ellos el 5,6 % fue con ozono, sobresalieron las infiltraciones intrarticulares de rodilla y hombro; se realizaron 7 789 infiltraciones paravertebrales para afecciones del raquis. En la unidad quirúrgica bajo fluoroscopia se realizaron bloqueos neurolíticos utilizando el ozono como medio de contraste (107 pacientes), además de 1 624 procedimientos de discolisis con ozono, con un 78 % de resultados excelentes; procederes como infiltración peridural, articulación sacroileaca y facetas espinales fueron tratados con ozono (144 pacientes) con un 68% buenos resultados.

La principal complicación inmediata es la lipotimia, las demás obedecen a errores en la técnica de administración. Las hernias discales representan el 10% de los casos atendidos, y un 40 % representan a otras enfermedades espinales. La tecnología diagnóstica de estudios incluye la RMN, TAC, estudios neurofisiológicas y examen físico. El futuro de las técnicas intervencionistas de dolor se tiene que basar en los esfuerzos de estudios de resultados validados por la evidencia científica.

Legg-Calvé-Perthes disease. A Case Study
1-5113292. Email: ofirbetancourt@gmail.com / ob_columna@hotmail.com. Web: www.ofirbetancourt.com Legg-Calvé-Perthes disease (LCPD) is a necrosis of the femoral epiphysis that occurs during the growth stage and evolves in consecutive stages with varying degrees of intensity and extension. It is self-limited, caused by ischemia of unknown origin, and involves a complex course, from the time of diagnosis to the decision of providing treatment.

The latter needs to be understood for it to be effective and delay or prevent the occurrence of the pain resulting from the arthrosis that may occur as a sequela. This is a 7-year-old boy who is brought to consultation by their parents with a hip pain and pain when walking. It is therefore performed a physical examination and radiographs (panoramic radiograph of the spine, pelvis bone AP, both coxofemoral), found alterations in the left femoral head, with remodeling of the same, and signal changes in femoral neck.

Once diagnosed, Legg-Calve-Perthes disease, is made a treatment plan with ozone in order to ensure the safety and efficacy of ozone applied rectally, intraarticular and extraarticular, based on one of the beneficial properties of gas “improves circulation and release of oxygen from t the blood.” The protocol consisted of the application of 20 sessions of rectal ozone in doses of 120 cc with a concentration of 20 mcg and 4 sessions of ozone Intra / extra-articular dose of 5 cc at a concentration of10 mcg. The duration of treatment was 3 months.

The therapeutic dosages are divided according to the effect of three (3) types: low (immunomodulation), average doses (stimulatory effect), high dose (immunosuppressive effects). Once the treatment was concluded obtaining images by Rx show a marked improvement in the femoral head, the patient is asymptomatic (without pain or limping) and he can do moderate sports activities. With the application of ozone rectally, intraarticular and extraarticular no adverse reactions, on the contrary, showed that the treatment is effective in these cases, due to improvement of symptoms and radiological imaging of the patient.

Enfermedad de Legg-Calvé-Perthes. Reporte de un Caso

La enfermedad de Legg-Calvé-Perthes (ELCP) es una necrosis de la epífisis femoral en la época de crecimiento, que evoluciona por etapas consecutivas con diferentes grados de intensidad y extensión, por sí misma limitada, causada por isquemia de origen desconocido con evolución compleja, desde su diagnóstico hasta la decisión de tratamiento, que requiere ser entendido, para que sea eficiente y retarde o evite la aparición de dolor causado por la artrosis que puede dejar como secuela.Se trata de un niño de 7 años de edad, quien es llevado a consulta por sus padres por presentar dolor intenso en la cadera y dolor al caminar.

Por consiguiente se realizo un examen físico y estudio radiológico (Rx Panorámica de la columna vertebral, Pelvis ósea AP, ambas coxofemorales), encontrando alteración en la cabeza femoral izquierda, con remodelación de la misma, así como cambios en la señal del cuello femoral. Una vez diagnosticada la enfermedad de Legg-Calvé-Perthes, se realiza un plan de tratamiento con ozono, con el objetivo de comprobar la seguridad y eficacia del ozono aplicado vía rectal, intraarticular y extraarticular, basándose en una de las propiedades benéficas del gas “Mejora la circulación y la liberación del oxigeno de la sangre”.

El protocolo consistió en la aplicación de 20 sesiones de ozono rectal en dosis de 20 µg/mL x 120 mL y 4 sesiones de ozono Intraarticular / Extraarticular en dosis 10 µg/mL x 5 mL. La duración del tratamiento fue de 3 meses aproximadamente. Una vez concluido el tratamiento se realizó Rx, obteniendo imágenes que evidencian una notoria mejoría de la cabeza del fémur, concluidas las consultas de control clínico el paciente se encuentra asintomático (sin dolor, sin cojera) realizando actividades deportivas moderadas. Con la aplicación de la ozonoterapia vía rectal, intraarticular y extraarticular no se presentaron reacciones adversas, por el contrario se evidenció que el tratamiento es eficaz en estos casos, debido a la mejoría de los síntomas e imágenes radiológicas del paciente.
Abstract Book 10th -12th November, 2011 Hotel Great Parnasuss, Cancun, Mexico

Inflammatory Mechanism Involved in Acute Disc Herniation (Hydrated Nucleus Pulpous). A Review.
Dr. Aníbal Grangeat, Dra. Ángeles Erario
Disc herniation (hydrated nucleus pulpous) occurs when nucleus pulpous is exposed to the systemic circulation due to the strain of the annulus. This produces an inflammation process which involves macrophages infiltration promoting activation and differentiation of lymphocytes and its products. Herniated discs produce interleukins 4, 6, 12 and interferon γ. This activates of Th1 lymphocytes. In symptomatic radiculophaty, interleukin 6 can induce allodynia mediated by prostaglandin E2.

Macrophages produces interleukin 12, which stimulate T cells differentiation in Th1 lymphocytes. Th1 differentiated and activated produces interferon γ and stimulate the natural killer cells activity. Interferon γ is antiviral and antitumor molecule, and recluses macrophages in the inflammation site, promoting the adhesion, migration and activation of lysosomes. The interferon expression on symptomatic herniated discs, represents activation of immune response against immune privileged material. Th17 lymphocytes and interleukine 17 take part in disc herniation. This interleukin promotes oxide nitric synthase activity and ciclooxigenase 2. This inflammatory mechanism explains nucleus pulpous resorption and peripheral neuropathy that is manifested on sciatica.

Revista Española de Ozonoterapia Vol.2 Supplement 1 2012, ISSN 2174-3215 II International Medical Ozone Federation Congress. IMEOF III Mexican Ozonetherapy Association Congress. AMOZON “For the Integration of Ozonetherapy into the Conventional Medicine”

Plenary lecture Clinical experience in the treatment of Epidemic Hemorrhagic Conjunctivitis with OLEOZON collyrium
Mirta Copello Noblet1 , Silvia Menéndez2 , Adriana Schwartz Tapia3

Epidemic Hemorrhagic Conjunctivitis (EHC) is a self-limited, conjunctiva inflammation of viral etiology which affects all ages and takes place in epidemic form. Its main symptoms are sensation of foreign bodies, lacrimation, photosensitivity, general discomfort and pain. Its critical signs are subconjunctival hemorrhages, follicular reaction and pre-auricular adenopathy. Also, serous secretion, chemosis, superficial punctate keratitis and palpebral ptosis are observed.

Taking into account the broad spectrum germicide power of OLEOZON (ozonized sunflower oil), as well as its degree of anti-inflammatory character, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of this medication in its collyrium form for the treatment of EHC. In ¨Dr. Salvador Allende¨ Clinical Hospital, 20 patients were treated with EHC in October, 2009.

Twelve of them received treatment with OLEOZON collyrium (one drop twice per day) and 8, making up the control group, received conventional treatment (cold compresses, non steroidal antiinflammatory drugs, yodoxuridine in collyrium or recombinant alfa-2b interferon). All patients treated with OLEOZON underwent a fast evolution toward recovery. In 72 h, they showed signs of great improvement and in 1 week they were totally cured. No patients presented complications. In the control group the evolution was more prolonged, mainly in patients showing complications (3 with keratitis). Treatment of EHC with OLEOZON collyrium provides with very positive results in this disease.

Experiencia Clínica en el Tratamiento de la Conjuntivitis Hemorrágica Epidémica con Oleozon Colirio
Mirta Copello Noblet1 , Silvia Menéndez2 , Adriana Schwartz Tapia 3

La Conjuntivitis Hemorrágica Epidémica (CHE) es una inflamación conjuntival de etiología viral, autolimitada que afecta a todas las edades y cursa de forma epidémica. Sus síntomas fundamentales son sensación de cuerpo extraño, lagrimeo, fotosensibilidad, malestar general y dolor. Sus signos críticos son hemorragias subconjuntivales, reacción folicular y adenopatías pre auriculares. También se observa secreción serosa, quémosis, queratitis superficial punteada y ptosis palpebral.

Teniendo en cuenta el poder germicida de amplio espectro del OLEOZON (aceite de girasol ozonizado), así como su cierto carácter antiinflamatorio, el objetivo de este trabajo fue evaluar la efectividad de este medicamento en su forma de colirio para el tratamiento de la CHE. En el Hospital Docente ¨Dr Salvador Allende¨ fueron atendidos 20 pacientes con CHE en Octubre del 2009. De ellos 12 recibieron tratamiento con OLEOZON colirio (1 gota dos veces al día) y 8 conformaron el grupo control los cuales recibieron tratamiento convencional (fomentos fríos, antinflamatorios no esteroideos, yodoxuridina en colirio ó interferón alfa-2b recombinante). Todos los pacientes tratados con OLEOZON tuvieron una rápida evolución hacia la curación. A las 72 h mostraban signos de gran mejoría y a la semana estaban totalmente curados. Ninguno de los pacientes presentó complicaciones.

En el grupo control la evolución fue más prolongada, fundamentalmente en los pacientes que presentaron complicaciones (3 con queratitis). El tratamiento de la CHE con OLEOZON colirio brinda resultados muy positivos en esta patología.
Tipo de participación: Presentación oral.
Palabras clave: ozone, conjunctivitis hemorrágica epidémica, conjunctiva, Oleozon, aceites ozonizados.

Ozone Therapy Cured a Double External Fistula.
A 42 year old man suffered a sternotomy for coronary bypass operation. On the 10th post-operative day he opened and drained a large abscess emerging from his sternum. He was sent home with two orifices on his skin / chest / sternum, each permanently draining large amounts of pus. The use of ozone therapy (OT) to treat and cure fistulae has been known since the early 1970 decade, when Prof. Dr. Hans Wolff, one of the fathers of modern OT, successfully approached different fistulae locally and systemically with OT.

Some conditions must be satisfied to justify OT for fistula treatment: a) the fistula should be chronic; b) there should be no foreign material in the fistula area, especially orthopedic synthesis material, plaques, screws, pins, etc., or even sequestered bone material; c) the fistula must have at least one external orifice to permit local access for OT; d) “conventional” treatments should already have proven unsuccessful. The fistula must be approached externally and internally (systemically) by ozone therapy.

The external approach aims first the sterilization and later the healing of the fistula. The systemic approach, via major auto-hemotherapy with ozone, aims to improve the patient’s immune response and general condition. The external approach, with ozone insufflations into the fistula, must be done daily in the beginning and may be done 2 to 3 times per week when the fistula seems to be sterile. The sessions of major auto-hemotherapy should be given twice weekly throughout the whole treatment.
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: ozone, fistula, osteomyelitis, chronic infection.

Biofilms in Oral Infection Preventing with Ozone Therapy
Dra. Nora Bazzano Mastelli , 1,2 Dra. Gloria Vitriol, 1 Dr Raul Moggiano. 2
1 AEPROMO, 2 AMAOO.

The natural form of bacterial growth in the oral cavity, is named Biofilm. It causes caries, periodontal diseases and either inside the canal (endodontic infection), periimplantitis and much more, like in the rest of the body, and develops a higher resistance to antimicrobial agents. Therefore, studies should be addressed to show ozone therapy after prophylaxis, penetrating into biofilm and producing enough bactericide action, (when it exist ) or in preventing biofilm development. It will be used like: gas, ozonate oil or ozonate water. At present, in this field we can only find studies that show the efficiency of chlorhexidine mouthrinses and of those with essential oils, but short time action.

With ozone therapy, Biofilm, can be easily disrupted in instants. In order to achieve the best results with the use of the ozone therapy treatment in oral field it is very important to do: endodontics procedures, the profilaxis, the root planning and the scaling and to use at home clorhexidine and brushing as well O3/Oil or O3/water.
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: biofilm, caries, periodontal disease, endodontic treatment, ozone therapy, chorhexidine, higher microbiol resistence.

Prevención de la Formación de Biofilms Oral con la Ozono Terapia
Dra. Nora Bazzano Mastelli , 1,2 Dra. Gloria Vitriol, 1 Dr Raul Moggiano. 2 1 AEPROMO, 2 AMAOO.

El crecimiento de bacterias en la cavidad oral, es llamado biopelicula. El mismo causa caries, enfermedad periodontal, infecciones endodonticas, periimplantitis y muchas otras enfermedades igual que en el resto del cuerpo y ha ido desarrollando una gran resistencia a los agentes antimicrobianos. Diferentes estudios han mostrado que la ozonoterapia después de una correcta profilaxis, penetra en la biopelícula produciendo suficiente acción bactericida cuando esta biopelícula está formada o previniéndola.

En sus formas de uso: como gas, aceite ozonizado o agua ozonizada. Hasta el presente en este campo, solo se relatan estudios que muestra eficiencia de la clorhexidina y aceites esenciales como colutorios pero de corta duración. Con ozonoterapia la biopelícula es fácilmente destruida en instantes, para de obtener mejores resultados con la ozonoterapia oral, es muy importante realizar todos los procedimientos: endodónticos, periodontales: profilaxis, raspado y alisado, y en el hogar cepillado y colutorios de clorhexidina además del aceite ozonizado o agua ozonizada.
Tipo de participación: Presentación oral.

Palabras clave: caries, enfermedad periodontal, endodoncia, ozonoterapia, clorhexidina, alta resistencia microbiana
Hotel Great Parnasuss, Cancun, Mexico Organizer: Mexican Ozonetherapy Association (AMOZON)
Revista Española de Ozonoterapia Vol.2 Supplement 1 2012, ISSN 2174-3215 II International Medical Ozone Federation Congress. IMEOF III Mexican Ozonetherapy Association Congress. AMOZON “For the Integration of Ozonetherapy into the Conventional Medicine”

Advanced Clinical Procedures for Remediation Head and Neck Infection Utilizing Oxygen/Ozone Therapy. Part 1 and 2
Phill Mollica and Robert Harris

American College of Integrative Medicine and Dentistry
Remediation of Head and Neck Infection is a complex anatomical, physiologic and biochemical process. Mixed multifocal infection of the head and neck dictates utilization of essential neurovascular pathways for the infusion of oxygen/ozone to have maximum effect. Therapeutic infective remediation of the head and neck must be approached in a comprehensive integrative fashion. In addition sequencing of infusion procedures is essential for induction of the patient’s own physiology and biochemistry to up-regulate and support the healing process. This two-part presentation will review current procedures and guidelines utilized therapeutically on patients.

Key: PL24 ENG PL25 ENG
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: ozone, hear, neck, remediation
Revista Española de Ozonoterapia Vol.2 Supplement 1 2012, ISSN 2174-3215
II International Medical Ozone Federation Congress. IMEOF
III Mexican Ozonetherapy Association Congress. AMOZON
“For the Integration of Ozonetherapy into the Conventional Medicine”
Abstract Book 10th -12th November, 2011 Hotel Great Parnasuss, Cancun, Mexico Organizer: Mexican Ozonetherapy Association (AMOZON) Page 54 of 121
Plenary lecture

Modulation of Oxidative Stress by Ozone Therapy: Innovation and Harmony in the Integrated Treatment of Skin Malignancies
José Carlos Jiménez Ortega
Departamento de Biología Molecular Médico Aplicada. Centro Médico Nacional de Biología Molecular A.C

To evaluate the efficacy of ozone therapy in patients with skin malignancies unresponsive to chemotherapy and /or conventional radiation therapy. In order to achieve this, the following aspects were taken into account: 1) To evaluate by resistance, impedance and reactance, the changes in cell membranes during the application of major autohemotherapy with ozone. 2) Quantify and assess whether major autohemotherapy in the therapeutic doses used, causes a negative change in the level of cellular oxidative stress in patients. 3)

Demonstrate by photo monitoring, the morphological changes undergone by the tumor masses treated with ozone therapy. Prior to treatment with ozone therapy the patients were evaluated by medical staff specialized in oncology and medical radiotherapy. Those patients who showed resistance to treatment with radiotherapy were sent to the Medical Applied Molecular Biology Unit to be treated with ozone therapy. In such patients resistance, impedance, reactance and phase angle before, during and after treatment with ozone therapy were measured to determine the level of oxidative stress and cell behavior.

Medical ozone treatment was performed by major autohemotherapy and ozone bag for 15 days. Finally, patients went back to the Oncology Unit to continue their conventional medical treatment. The ozone generator used was the OL80A/DL. To measure resistance, impedance, reactance and phase angle, the equipment used was QUANTUM IV. The materials used during the treatment with ozone therapy were those recommended by the Mexican Association of Ozone Therapy. Studies of resistance, impedance and reactance, showed that major autohemotherapy with ozone significantly change the behavior of cell membranes. These changes did not significantly modify the phase angle that was used to indirectly measure the levels of cellular oxidative stress.

Meanwhile, the tumor presented a significant cell damage accompanied by significant morphological changes. The application of major autohemotherapy with ozone significantly changed the conditions of the cell membrane. However, these changes did not affect the oxidative stress levels of the patient. This finding was promising since the manipulation of oxidative stress during the pro-oxidant therapies should not be changed significantly to reach its therapeutic power. Finally, the photographic monitoring of the tumor mass showed a significant deterioration in it.
Summarizing, we can state that ozone therapy can be an interesting therapeutic alternative in the integrated treatment of patients with skin malignancies resistant to conventional treatments.
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: Oxidative Stress, Ozone therapy, Skin malignancies (neoplasm).

Plenary lecture
Blood-Borne and Sexually Transmitted Diseases Managed with Ozone Therapy
Héctor Enrique Velázquez González
Genetics and Immunology Clinic, Mexicali BC, Mexico

One of the major health problems of the last 20 years is the management of Blood-Borne and Sexually Transmitted Diseases, particularly the Human Immunodeficiency virus (HIV,1981) and hepatitis C virus (HCV,1987). Is the use of antiretroviral the only method of control? The use of Ozone-therapy both rectal combined with Ultraviolet light and venous (Fotox), has allowed through 8 years an appropriate outcome for an important number of patients that have maintained their health quality even without the use of antiviral.

The key is not just the Ozone, it is also reducing or avoiding high risk behaviors, maintaining a healthy lifestyle, good nutrition, exercise, but after all a positive attitude and without the fear these type of infections generate. The experience focuses on 10 Fotox sessions combined with rectal in accumulative concentrations from 15 g/mL to 40 g/mL, repeating in 5 weeks, with a frequency of every 6 months, the values of viral count for both conditions have a significant change in addition to the enzymes that are studied to evaluate the illness control. Continuous evaluation and a multidisciplinary approach are the foundation for success.

Key: PL27 ENG
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: ozone, Sexually Transmitted Diseases, HIV, VHC

Enfermedades de Transmisión Sexual y por Sangre Manejados con Ozonoterapia Héctor Enrique Velázquez González

Uno de los grandes problemas de salud en los últimos 20 años es el manejo de enfermedades de transmisión sexual y por sangre, en especial por el Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH, 1981) y el Virus de la hepatitis C (VHC, 1987. Es el manejo antirretroviral la única forma de control? El manejo mediante ozonoterapia tanto por vía rectal como la combinación de luz ultravioleta y venosa (Fotox), ha permitido a lo largo de 8 años un manejo adecuado en un número importante de pacientes que han mantenido su calidad de vida aun sin el empleo de antivirales.

La clave no es únicamente el manejo con ozono, sino reducir o evitar las conductas de alto riesgo, llevar una vida sana que incluya buena alimentación y ejercicio pero ante todo una actitud positiva y sin el miedo que ha generado el padecer estas infecciones. La experiencia se centra en el manejo de 10 sesiones de Fotox combinado con ozonoterapia rectal en concentraciones acumulativas de 15 μg/mL a 40 μg/mL, repetidas en 5 semanas y con una frecuencia de 6 meses, los valores de carga viral para ambos padecimientos tienen un cambio significativo además de las enzimas que se estudian para valorar el control de la enfermedad. Una valoración continua y un manejo multidisciplinario son la base del éxito.

Key: PL27 SPA
Tipo de Presentación: Oral
Palabras calve: ozono, Enfermedades de transmisión sexual, HIV, VHC

Prolozone: Regenerating Joints and Eliminating Pain
Frank A. Shallenberger, MD, HMD, ABAAM
President, American Academy of Ozonotherapy

Prolozone is a regenerative and pain relieving procedure that involves the proliferative principles of prolotherapy, the cell membrane repolarizing principles of neural therapy, the stem cell stimulation of homeopathic therapy, and the metabolic principles of ozone therapy. The area being treated is first injected with a 10% solution of glucose combined with procaine, B-vitamins, anti-inflammatories, homeopathics, and minerals. A second injection of ozone is then applied. Because ozone is a gas, it extensively distributes throughout tissues. This allows for the treatment of a very wide area with a minimal number of injections. Prolozone is applicable and usually effective in any clinical situation in which there is pain and/or ligament, cartilage, or bone damage.

Key: PL28 ENG
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: ozone, prolozone, pain, tissue regeneration, stem cells

Treatment of Increased Intestinal Wall Permeability (Leaky Gut) and the Associated Immune System Dysfunctions with Colonic Hydrotherapy Followed by Rectal Insufflations and Minor Autohemotherapy with Oxygen- Ozone.
Luis David Suárez Rodríguez MD, Lc Ac. Centro de Medicina Integrativa SANAR, S.C., Playa del Carmen, Q. Roo, México

Autoimmune diseases when considered as a group are the third cause of sickness and death worldwide nowadays. Among the causes of autoimmunity, genetic predisposition, immune regulation abnormalities and environmental factors are considered the key elements for developing such diseases. One of the most relevant environmental factors is the disruption of the intestinal wall, a process known as increased intestinal wall permeability or leaky gut, where the contents of the intestinal lumen penetrate the gut barrier, breaching through tight junctions and desmosomes that glue intestinal wall cells together, and exposing proteins of dietary origin to the immune system within the intestinal wall.

This process is manifested first as food allergies or intolerance, but as it goes on, the increased permeability in the gut allows diet proteins to get into the bloodstream and generate antibodies against our own cells. More than 40 autoimmune diseases have been traced back to predictive auto-antibodies that can be present for more than 7 years before the onset of autoimmunity symptoms and the diagnosis of a specific condition, being the most prevalent ones arthritis, thyroiditis, type I diabetes and celiac disease.

Colonic hydrotherapy –the administration of temperature and pressure controlled water into the colon-, is a very effective therapy aimed at the mechanical removal of immune complexes with dietary proteins nested in the intestinal wall, but the abnormalities in the regulation of the local and systemic immune system are harder to treat.

Oxygen-ozone gas mixture administered by rectal insufflation after the colonic hydrotherapy provides the means to effectively re-establish a healthy immune response in the gut, since ozone has a well-known dose-dependent suppressing or stimulating effect upon the immune system.

Minor autohemotherapy with oxygen-ozone at a high dose (40 µg) has been effectively used as a means to treat allergies and other immune system abnormalities. In this paper we review a series of 20 cases of leaky gut treated in our clinic with a series of 3 to 5 colonic hydrotherapies followed by 20 to 30 rectal insufflations of oxygen-ozone at a concentration ranging from 10 to 35 µg and a volume ranging from 100 to 180 mL.

All the patients also received weekly minor autohemotherapies (4 to 6) with 20 to 40 µg of ozone. 6 of our patients suffered from chronic colitis with abdominal distention, spastic pain and constipation; 3 of them were diagnosed with irritable bowel syndrome; 4 suffered from food intolerances (lactose, seafood, wheat); 5 of these patients showed signs of subclinical hypothyroidism confirmed by lab, and the other two had psoriasis. All of the patients had also electrical evidence –as established by bioimpedance, ESTECK Complex Scanner, LD Technologies, USA- of digestive dysfunction (food allergies or intolerance), thyroid gland electric imbalance and/or elevated function of the immune system.

After the treatment, 15 of the patients had cleared out the digestive dysfunction and the immune system abnormalities both clinically and electrically, 2 of them persisted with digestive dysfunction although they reduced the signs and symptoms of comorbidities and 3 of the patients persisted with both digestive dysfunction and comorbidities. The success rate of the treatment regime (75 %) makes the administration of oxygen-ozone a very effective therapy to normalize the immune system abnormalities both systemically and in the gut, providing a innovative solution to the increasing problem of intestinal wall permeability and the associated autoimmune abnormalities.
Key: PL29 ENG
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: Oxygen-ozone, rectal insufflations, minor autohemotherapy, increased intestinal wall permeability, leaky gut, autoimmunity.

Clarifying Oxidative Stress and Antioxidant Potantials Assays
Dr.Ruhi Cakir

Mediozon Clinics. Turkey
Oxidative Stress is a physilogical process that might be harmfull in living organisms. Ozone is the third strongest oxidant agent (E°=+2.076 V), after fluorine and Persulphate. Medical Ozone which is mixture of very low dose ozone in oxygen can be used as a medical drug in terms of ozone therapy. Oxidation in biological fluids especially in blood that is generated by medical ozone gas results ROS (Reactive Oxygen Species) and LOP (Lipid Oxidation Products) formation. Anti-Oxidants present in blood and other tissues help to prevent negative effect of Oxidative Stress. The balance between oxidation and anti-oxidants is the fundamental for the life. To evaluate effects of ozone therapy, to determine oxidative stress levels and antioxidant potantials might be helpful. To determine those levels several assays can be applied.

Key: PL30 ENG
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: ozone, oxidative stress, antioxidants, Ozone Therapy, ROS, LOP

Ozonetherapy in the Spinal Disc Herniation
Dr. Danilo Ruiz Reyes

The spinal disc herniation represents a 5 % of the spine pathology being the main cause of low back pain or lumbociatalgia. The objective of this study is to demonstrate the therapeutic effectiveness of paravertebral ozone therapy in cases of herniated disks in the lumbar sacral region. A total of 60 patients were collected, between 20-70 years old, diagnosed with Lumbar Disk Herniation at level L4-L5 and L5-S1; with clinically signs of the disease. Paravertebral muscle infiltrations with medical ozone were done at a concentration of 20 μg/ml in volumes of 10 ml, on both sides of the lumbar sacral region; depending on the location of the root disk conflict. This procedure was done one to two times per week for 10 sessions.

The Score MacNab modified was used to determine the therapeutic effect. The scores were: 36 patients reported excellent therapeutic results (60 %), 17 patients had good results (28 %) and 7 had a bad response (12 %). The treatment of spinal disc herniation with ozone therapy is an effective method (88% of cases) and it is minimally invasive for the pathology resolution.

Key: PL31 ENG
Type of Presentation: Oral Presentation
Key words: Disk Herniation, Paravertebral ozone therapy, Lumbar sacral region

Ozonoterapia en la Hernias del Disco
Dr. Danilo Ruiz Reyes
OZONOCENTER.

Las hernias de disco constituyen el 5 % de la patología espinal y pueden ser una causa de dolor lumbar o lumbociatalgia. El objetivo es demostrar la efectividad terapéutica de la ozonoterapia paravertebral en casos de hernias de disco en región lumbo sacra. Se recopilaron un total de 60 pacientes (40 sexo masculino y 20 sexo femenino), edades comprendidas entre 20 a 70 años, con diagnóstico de Hernias Discales Lumbares a nivel L4-L5 y L5-S1, acompañadas de manifestaciones clínicas típicas de esta afección. Se efectuaron infiltraciones musculares paravertebrales con Ozono a una concentración de 20 µg/mL en volúmenes de 10 mL bilateralmente en localizaciones variables en la región lumbo sacra dependiendo de la ubicación del conflicto disco radicular, una o dos veces por semana por 10 sesiones.

Para la determinación del efecto terapéutico se utilizó el Score MacNab modificado. Las calificaciones obtenidas fueron: 36 pacientes reportan excelente resultado terapéutico (60 %), 17 pacientes buen resultado (28 %) y 7 con nula respuesta (12 %). El tratamiento de las hernias discales lumbares con ozonoterapia resulta ser un método efectivo (88 %) y mínimamente invasivo para el tratamiento de esta patología, brindando a los pacientes una resolución de la sintomatología.

Key: PL31 SPA
Tipo de participación: Presentación oral.
Palabras clave: Hernias del Disco, Ozono paravertebral, Región lumbo sacra

Ozonoterapia en el asma bronquial:

Bases terapéuticas para su aplicación

RESUMEN
El asma bronquial es una afección que acapara la atención de amplios sectores de todo el mundo por la alta incidencia de muertes que ocasiona y por los elevados costos hospitalarios que su atención demanda. El ozono es reconocido como un potente agente oxidante capaz de producir efectos adversos cuando es inhalado, y ha sido asociado con la incidencia de crisis asmáticas. Por otra parte, es conocido que cuando el ozono se aplica en dosis adecuadas y por una vía no dañina para el organismo produce variadas acciones biológicas con efectos terapéuticos sin causar reaciones adversas ni daño genotóxico, lo que hace posible su empleo en una gran variedad de procesos patológicos. Existen referencias acerca del empleo de la ozonoterapia en el asma bronquial aunque no se fundamentan los mecanismos fisiológicos mediante los cuales el método propuesto ejerce su acción terapéutica en dicha enfermedad. El presente trabajo pretende explicar los probables mecanismos de acción a través de los cuales la ozonoterapia puede ser efectiva como método terapéutico en el asma bronquial.

ABSTRACT
Bronchial Asthma is a disease that has gained interest from many countries, due mainly to its high death rate and its high hospital costs. Ozone has been recognized as a powerful oxidizing agent, capable of producing adverse effects when it is inhaled and it has also been associated with asthmatic attacks. Conversely it is also known that when ozone is applied to humans in appropriate doses and by a therapeutical way, it produces assorted biological actions with beneficial results without causing adverse reactions or genotoxic damage. In this case, it is possible to use in a great variety of pathological processes. In some papers ozone therapy is discussed as a treatment for bronchial asthma, though the physiological mechanisms are not precisely outlined. This work intends to explain the ozone therapy mechanism, that avoids airways and that can be effective as a therapeutic method in the treatment of bronchial asthma.

INTRODUCCIÓN

Asma bronquial

Clínicamente el asma bronquial es una afección crónica, obstructiva y reversible de las vías aéreas que está caracterizada por una hiperreactividad del árbol bronquial frente a diversos estímulos.1-5 En la actualidad esta enfermedad acapara la atención de amplios sectores de todo el mundo por la alta incidencia de muertes que ocasiona y por los elevados costos hospitalarios que su atención demanda.1 En los Estados Unidos se considera que más de diez millones de personas padecen la enfermedad, contexto en el que se observa un predominio en sujetos de la raza negra.1 La mortalidad anual se ha incrementado por encima del 30% desde 1980 con una mayor incidencia en mujeres y ancianos.5

Aunque la etiopatogenia del asma bronquial ha sido muy discutida e investigada durante décadas,1 hoy día, se reconoce como una respuesta inflamatoria en la cual intervienen mecanismos genéticos, inmunológicos, neurogénicos y farmacológicos.2 Entre ellos, el importante papel que desempeña el mecanismo de respuesta inmunológico.

Desde este punto de vista, se considera que la inflamación de las vías aéreas es el resultado de complejos eventos activados por estímulos inflamatorios interactuando con una numerosa cantidad de células efectoras primarias residentes en el tractus respiratorio. Dentro de este grupo celular se destacan macrófagos, mastocitos, neutrófilos, eosinófilos, plaquetas y linfocitos T (CD4+)2-6 las cuales una vez activadas liberan mediadores de la inflamación que incluyen histamina, enzimas proteolíticas, mediadores lipídicos, citocinas, y especies reactivas del oxígeno, entre otras, los que ejercen variados efectos biológicos sobre el epitelio respiratorio además de contribuir al reclutamiento de nuevos elementos celulares con la consecuente amplificación del proceso inflamatorio.

Ozonoterapia

El ozono que se emplea con fines medicinales es un gas constituído por una mezcla ozono-oxígeno y se obtiene al hacer pasar una corriente de oxígeno puro a través de una descarga eléctrica silente, con lo que se logra una concentración entre 0,05 y 5% (v/v). Químicamente es una molécula triatómica, variedad alotrópica del oxígeno.7

Como el ozono es un gas extremadamente reactivo e inestable, ha sido postulado que los mecanismos de acción de este agente están relacionados con la generación de productos secundarios8 en su interacción con los lípidos que se encuentran en el plasma y en las membranas celulares. La reacción del ozono con los lípidos ocurre casi exclusivamente a nivel de los doble enlaces carbono-carbono presentes en los ácidos grasos poliinsaturados, generándose peróxidos orgánicos y ozónidos9 que en cantidades adecuadas y controladas ejercen diferentes acciones biológicas las cuales le confieren al ozono un conjunto de propiedades terapéuticas.

Estos variados efectos biológicos alcanzan resultados terapéuticos cuando el ozono es aplicado en dosis adecuadas y por una vía no dañina para el organismo. Sólo de este modo no se producen reacciones adversas10 ni daño genotóxico,11 y la amplia variedad de efectos que genera, hacen posible su aplicación en una gran diversidad de especialidades médicas y dentro de éstas, en una disímil variedad de procesos patológicos.

DISCUSIÓN

Aunque no se fundamentan los principios terapéuticos para la utilización del ozono en el asma bronquial,12 existen referencias acerca del empleo de la ozonoterapia en esta enfermedad.

Las posibles acciones terapéuticas del ozono en el asma bronquial pueden fundamentarse en varios aspectos.

Acción immunomoduladora del ozono. Su papel en el asma bronquial.

El ozono ha sido considerado como un agente inductor ideal de citocinas, ya que es atóxico, no antigénico y produce una respuesta inmune positiva sin efectos adversos cuando se emplea con cautela y bajo condiciones controladas.13 Además de lo anterior, esta acción también pueden ser catalogada de tipo moduladora si se tiene en cuenta que:

• a acción inmunológica del ozono sobre la sangre está dirigida fundamentalmente sobre los monocitos y los linfocitos T, los cuales una vez inducidos, liberan pequeñas cantidades prácticamente todas las citocinas y particularmente del interferón gamma (Inf.-γ),14-16 por lo tanto, la liberación de citocinas se produce de forma endógena.
• de manera tentativa, se considera que durante la administración del ozono con fines terapéuticos pueden incrementar la liberación de antagonistas de las citocinas, o de estas como la interleuquina-10 (IL-10) y el factor transformador del crecimiento tipo β1 (TGFβ1), capaces de suprimir la citotoxicidad autorreactiva,15 por lo tanto, la inducción de citocinas no sobrepasaría niveles más allá de los necesarios una vez que se activen los elementos contrarreguladores también éstos de carácter y naturaleza fisiológicos.

Con estos elementos sustenta entonces el término de “acción inmunomoduladora del ozono”.

Específicamente en el asma bronquial, como respuesta al estímulo alérgico se producen grandes cantidades de inmunoglobulina E (IgE) a partir de lo cual, se genera una cascada de eventos que causan activación de células inflamatorias así como la síntesis y liberación de variados mediadores de la inflamación en las vías aéreas.3

Entre las vías de regulación inmunológica comprometidas en la patogénesis de esta enfermedad, dos citocinas muestran particular importancia en el control de la producción de la IgE. Sin la interleuquina-4 (IL-4), la producción de esta inmunoglobulina es inhibida. Por otro lado, el interferón gamma (Inf. -γ) puede disminuir la capacidad celular para la producción de IL-4. Así, la interacción de estas dos citoquinas, determinará la producción de IgE en respuesta al estímulo alérgico.1

Conociendo el efecto sobre regulador Inf.-γ sobre la IL-4 para la producción de IgE, y teniendo en cuenta que mediante la aplicación de la ozonoterapia se produce una elevación en los niveles de Inf.-γ, es posible plantear la hipótesis de que por esta vía pueden disminuir los niveles séricos del IgE, lográndose así una mejoría en la evolución de la enfermedad.

Papel de las especies reactivas del oxígeno en el asma bronquial. Acción del ozono sobre los sistemas enzimáticos antioxidantes

Aunque la producción de especies reactivas del oxígeno en el organismo es parte del metabolismo biológico normal y es además, un fenómeno necesario para el adecuado funcionamiento de un conjunto de procesos vitales (ej. fagocitosis), el incremento no controlad de estos productos está muy estrechamente vinculdo a la patogenia de una amplia variedad de enfermedades,17 así como al envejecimiento.18-19 Específicamente en el asma bronquial se plantea que las especies reactivas del oxígeno producen injuria tisular, contracción del músculo liso, incremento de la permeabilidad vascular, respuesta bronquial exagerada y liberación de mediadores.17

Para contrarrestar los efectos desfavorables que estas especies originan, en el organismo están presentes mecanismos de defensa antioxidante capaces de mantener un adecuado balance frente a estos potentes agentes oxidantes,18 y dentro de los sistemas antioxidantes enzimáticos, las enzimas superóxido dismutasa, catalasa y glutatión peroxidasa constituyen las mayores fuentes de protección. 19,20 Por tanto, la excesiva producción de metabolitos del oxígeno o una inadecuada defensa para contrarrestar su acumulación en el organismo con la injuria tisular consecuente, favorece o acelera el desarrollo de múltiples procesos patológicos.

El ozono posee la propiedad de estimular determinados sistemas enzimáticos antioxidantes protectores contra la acción de los metabolismos del oxígeno.21 Se conoce que el papel del ozono como estimulante de los sistemas antioxidantes, se debe a una importante activación de reacciones oxígeno-dependientes del metabolismo y del ciclo de Krebs, con la formación de grandes cantidades de protones necesarios para restaurar la capacidad amortiguadora de los sistemas de defensas antioxidantes contra los radicales libres del oxígeno y los peróxidos. De esta forma el ozono produce un balance dinámico entre pro-oxidantes y sistemas antioxidantes, los cuales mantienen la estructura de la membrana y el metabolismo celular.22

Investigaciones desarrolladas en Cuba permitieron demostrar en humanos que la ozonoterapia intravascular ejerce un efecto estimulador o activador del sistema de defensa de la glutatión peroxidasa eritrocitaria,21 mientras que de forma experimental se encontró un incremento en la superóxido dismutasa y la catalasa en animales expuestos a tetracloruro de carbono, conocido inductor del daño hepático mediado por especies reactivas del oxígeno.23

Actualmente se reconoce que un estrés oxidativo moderado induce frecuentemente defensa antioxidante enzimática24 por lo que se ha señalado al precondicionamiento oxidativo como un mecanismo capaz de explicar las acciones farmacológicas del ozono en aquellas enfermedades mediadas por especies reactivas del oxígeno.23

Si se toma en consideración la implicación de las especies reactivas del oxígeno en la patogenia del asma bronquial, así como la acción estimulante del ozono sobre los sistemas enzimáticos de protección antioxidante, entonces se puede plantear esta hipótesis como una de la bases de la eficacia de la ozonoterapia en dicha enfermedad. 

Acción del ozono sobre la síntesis y (o) liberación de ciertos autacoides

En la actualidad, en torno al término “autacoides”25 (frecuentemente utilizado para agrupar a un cierto número de sustancias endógenas con determinada actividad farmacológica) se mantiene una gran polémica, y en muchos sentidos, se considera que tal nombre resulta arbitrario.

La palabra autacoide deriva del griego “autos” (propio) y del vocablo “akos” (agente medicinal o remedio), y se considera como tal a un grupo de sustancias con diversas acciones fisiológicas y farmacológicas las cuales participan en muchos eventos normales o patológicos. Normalmente están presentes en el organismo o pueden ser formadas localmente en sitios cercanos al lugar de su síntesis teniendo usualmente una vida media muy breve.

En los pacientes asmáticos los eicosanoides producen variados efectos. Los prostaglandinas pertenecientes a la serie E (PGE) relajan el músculo liso bronquial produciendo dilatación bronquial; lo mismo acontece con la prostaciclina (PGI2), la cual antagoniza la broncoconstricción inducida por otros agentes. Las prostaglandinas de la serie F (PGFs) y la PGD2 contraen la musculatura bronquial e inducen contracción de los bronquios al igual que el tromboxano A2 (TxA2) y los leucotrienos LTC4 y LTD4.

Existen trabajos que refieren la interacción del ozono y los metabolitos del ácido araquidónico cuando el gas es empleado por vía inhalatoria. Se señala a los eicosanoides como uno de los elementos responsables de la toxicidad pulmonar tras la exposición al ozono por esta vía.26 En otros trabajos, sin embargo, no se reportan hallazgos similares.27

Poco ha sido estudiado acerca de los efectos del ozono aplicado por una vía diferente a la respiratoria y el estado de los metabolitos del ácido araquidónico, fundamentalmente en humanos. Scrollaveza y col. en un grupo de caballos que fue tratado con ozono mediante autohemotransfusión encontraron una menor incidencia de complicaciones pulmonares y refirieron la posibilidad de que este efecto pudiera estar relacionado con un mecanismo dependiente de prostaglandinas,28 aunque era necesario la realización de futuros experimentos. Bocci14 ha referido de forma hipotética, que tras la ozonización sanguínea se puede producir la liberación de eicosanoides tales como algunas prostaglandinas de la serie E.

De ser cierta esa hipótesis, el mecanismo de acción del ozono a nivel pulmonar se explicaría a través del sistema de la proteína G que activa a la adenilciclasa con el consecuente incremento de AMPc,29 el cual actúa como segundo mensajero amplificando el efecto de las prostaglandinas e inhibiendo los cales lentos del calcio con la consiguiente broncodilatación.

Estudios preliminares realizados en Cuba30 con pacientes sometidos a terapias con ozono, aplicado mediante insuflación rectal, han permitido conocer cómo influye esta terapéutica sobre determinados autacoides. En cinco pacientes con diferentes enfermedades (asma bronquial, atrofia del nervio óptico, demencia senil, glaucoma y osteoartrosis) se tomaron muestras de sangre previas y posteriores al tratamiento con ozono, observándose que el TxB2 y la relación TxB/6-KetoPGF1 disminuyeron significativamente después del tratamiento.

Sin embargo, los autores consideran que el papel principal del ozono no estaría en mantener el adecuado balance biológico de estos autacoides, ya que de sus funciones depende una gran variedad de eventos del organismo humano. en este aspecto debe profundizarse en futuras investigaciones.

CONCLUSIONES

Los posibles mecanismos de acción terapéutica del ozono en el asma bronquial pueden relacionarse con su efecto inmunomodulador, su acción estimulante sobre los sistemas enzimáticos antioxidantes y su relación con la liberación de determinados autacoides.

VIH-SIDA OZONOTERAPIA DE PERSONAS QUE VIVEN CON VIH-SIDA

Resumen

El ozono es un gas extremadamente reactivo e inestable. Se ha postulado que su mecanismo de acción está relacionado con la generación de productos secundarios, fundamentalmente los peróxidos orgánicos, aldehídos, peróxido de hidrógeno y ozonides que ejercen diferentes acciones biológicas, que confieren una serie de propiedades terapéuticas, cuando se utiliza en cantidades adecuadas y controladas, tales como: mejora la oxigenación de los tejidos, la modulación inmunológica, aumento del sistema de defensa antioxidante, acción germicida, regulación metabólica, entre otros. Se reportan resultados satisfactorios en la aplicación de este método terapéutico para pacientes con enfermedades autoinmunes, así como a otras personas con déficit de sus funciones inmunológicas, como es el caso de pacientes con SIDA. Teniendo en cuenta que hasta ahora no existe cura para los enfermos de SIDA y conocer las posibilidades terapéuticas que el ozono puede ofrece, sin la presencia de efectos secundarios, el objetivo de este estudio es evaluar el efecto de este tratamiento en diferentes biomarcadores relacionados con progresión de la infección y con el estrés oxidativo, así como para determinar la presencia o no de las enfermedades oportunistas y los efectos secundarios. Los criterios de inclusión considera un pacientes VIH-SIDA cuando CD4 + se ha reducido por debajo de 500 células / μL, sin pérdida de peso del 10% en los últimos 3 meses, neurológicas y las condiciones físicas adecuadas para permitir una cooperación del paciente con el fin de evaluar los resultados obtenidos. Todos los pacientes firmaron el consentimiento informado. Cuarenta y cuatro pacientes fueron divididos al azar en tres grupos: grupo control, 15 pacientes tratados con el tratamiento convencional (inmunomoduladores como el interferón y la terapia antirretroviral AZT y como Indinavir); ozono grupo, 14 pacientes tratados con ozono (entre 30 y 40 mg / L y 100 ml) por insuflación rectal, 5 veces por semana durante 6 meses, luego 3 veces por semana durante 6 meses y continuó con, 2 veces por semana durante 6 meses más, para un total de 18 meses de tratamiento combinado y el grupo de 15 pacientes tratados con ambos tratamientos. Para todos los pacientes, el porcentaje de CD4, células T, hemoglobina, hematocrito, eritrosedimentación, leucocitos, linfocitos, glicemia, creatinina y transaminasas fueron medidos al principio y al final del tratamiento. También el diagnóstico de estrés oxidativo se determinó la medición de algunos parámetros bioquímicos (glutatión reducido, glutation peroxidasa, glutation transferasa, superóxido dismutasa, catalasa, ácido tiobarbitúrico materias, el total de hidroperóxidos, conjugad ) y con la ayuda de un programa de ordenador registrado. Los resultados demostraron que en el combinado de ozono y los grupos, los pacientes permanecieron estables, el mantenimiento de los parámetros hematológicos en el rango normal o la normalización de las cifras que presentó patológicos. También mejoró la biomarcadores de progresión de la infección y el aumento de la calidad de vida, con un nivel muy bajo por ciento de las enfermedades oportunistas. Respecto a la prueba de estrés oxidativo, todos los pacientes que participan en este estudio presentado, al comienzo del estudio, grave o muy grave el nivel de estrés oxidativo.

 

OZONO Y ÉBOLA

El OZONO Y LA OZONOTERAPIA PUEDE MODIFICAR LA EVOLUCION DE LA ENFERMEDAD DE EBOLA.

Desde el mes de Julio mantengo una “guerrilla” en pro de que el OZONO debe ser considerado y ensayado al igual que otros tratamientos experimentales. Pero en este caso con la razón añadida de que el Ozono NO POSEE EFECTOS SECUNDARIOS NI CONTRAINDICACIONES.

Defiendo que el OZONO posee argumentos y soporte científico suficiente que lo avalan como un gran estimulante del sistema inmune y antioxidante, además de poseer potentes capacidades germicidas, indiscutibles in vitro y muy potentes in vivo. Y afirmo que el Ozono puede modificar las curvas de letalidad y contagiosidad del EBOLA.

Si el ozono es capaz o no de matar al virus Ebola dentro del organismo es algo que está por demostrar, pero las características del virus y la fase febril prolongada, hace que se pueda presuponer que el virus pueda ser atacado también dentro del organismo por el ozono.

A sabiendas de a quién estoy dirigiendo este mensaje y quien lo va a leer (todos médicos, expertos especialistas en enfermedades infecciosas, microbiólogos, catedráticos, profesores, oncológos, etc, ) formulo a todos la pregunta siguiente:

¿ALGUNO DE USTEDES PUEDE NEGAR Y ARGUMENTAR QUE EL OZONO NO PUEDE TENER EFECTO BENEFICIOSO EN LA ENFERMEDAD DE EBOLA Y POR TANTO NO SIRVE?

Yo afirmo lo contrario y puedo argumentar por qué. ¿Alguien quiere escuchar?. De momento parece que nadie.

Seguramente, muchos entrarán hoy en el Dr. Google. Muchos lo harán con la intención de encontrar razones para estar en contra y otros para estar a favor. Pero seguro que todos encontrarán una coincidencia: EL OZONO NO SE PUEDE ENVASAR NI SE PUEDE PATENTAR. Lamento mucho que ningún visitador médico les haya llevado información de su existencia.

Pero los grandes expertos mundiales y los expertos especialistas en enfermedades infecciosas tienen la obligación, no solo de saber que existe sino también de que sus propiedades y mecanismos de acción lo facultan, a priori, como un tratamiento digno de considerarlo y ensayarlo en la enfermedad de EBOLA. Me da vergüenza de que no sea así.

El día 4 (hace 3 días), mantuve una videoconferencia con los Drs Harold Robins y Robert Rowen, de EEUU. El día 16 estarán en Sierra Leona, llevarán 10 Generadores de Ozono y formarán y entrenarán a médicos nativos, harán 4 grupos de experimentación, con distintas concentraciones y pautas. Ellos también están convencidos de que el ozono modificará favorablemente el curso de la Enfermedad.

http://www.newsmaxhealth.com/Health-News/ozone-therapy-ebola-trial/2014/09/24/id/596709/

Muchos médicos de todo el mundo, como ustedes, de distintas especialidades y categorías, opinan que el ozono debe ser CONSIDERADO Y ENSAYADO. El ozono es también una molécula biológica con acciones biológicas, al igual que los anticuerpos monoclonales, uno de sus objetivos es la estimulación inmune. Pero sin efectos secundarios ni contraindicaciones.

El día 7 de agosto escribí a un compañero de la infancia, compartimos el mismo pupitre del Instituto durante varios años, hoy es el Director-Gerente del Hospital La PAZ, del que también depende el Hospital Carlos III. El mensaje es el siguiente:

De: Juan.Carlos.Perez.Olmedo@sergas.es [ Juan.Carlos.Perez.Olmedo@sergas.es ]

Hola Rafa,

En primer lugar un cordial abrazo. Espero estés disfrutando de unas vacaciones tranquilas y tengas unos momentos para evaluar el contenido de este mensaje. No es para pedirte ningún favor aunque lo parezca.

El motivo de este mensaje es el virus EBOLA. No quisiera extenderme en esta introducción, es solo para centrar tu interés.

Mucho de lo que contiene no lo verás en ningún lado ya que es fruto de mi trabajo. Por ejemplo, este link que te conduce a un video de 7 minutos realizado por mí:

http://www.oxigeno-ozonoterapia.com/index.php?option=com_content&view=article&id=135:tratamiento-de-carcinoma-epidermoide-en-paladar-con-ozono-intraperitoneal-y-bicarbonato&catid=38:ozono-y-cancer&Itemid=64

Disculpa también este breve curriculum. Desde hace 15 años me dedico “monográficamente” al ozono y la ozonoterapia. He desarrollado muchas cosas en este tiempo y he participado como profesor y ponente en diversos CONGRESOSO y Cursos de expertos y Master en Universidades. Recientemente he estado en Colombia invitado por la Fundación Universitaria de Colombia dónde participe como ponente en un Congreso de Medicina Integrativa. Además impartí en Medellín un curso de dos días sobre Ozonoterapia. Acabo de elaborar un artículo que conformará uno de los capítulos de un libro sobre Medicina Integrativa que publicará esta Fundación Universitaria. Son 20 páginas. Te lo adjunto. He sido profesor en el curso de expertos en Ozonoterapia de la Universidad Alcalá de Henares, en el Master de Medicina estética de la Universidad illes Baleares y en Diciembre de 2013 participé también como profesor en el Master de Medicina Alternativas realizado por la Universidad de Santiago de Compostela. A partir de Enero-2014 participaré como profesor en el Master de Ozonoterapia que organiza la Universidad de Sevilla, precisamente para hablar sobre cáncer y ozono intraperitoneal. En Noviembre he sido invitado al Congreso de Ozonoterapia que organiza la sociedad portuguesa de Ozonoterapia, también para disertar sobre lo mismo. Soy socio de Ozoaqua S.L., empresa dedicada a la fabricación de productos de Ozono, todos ellos con registro sanitario y de farmacia. Las cremas y aceites son formulaciones mías. También he diseñado consumibles para administrar Ozono, como el Bexozone, fabricado por Bexen y que recientemente han conseguido la homologación sanitaria con categoría sanitaria IIA, tengo patentes registradas de otros consumibles, basados en investigaciones sobre el enterocus faecalis que desarrollamos en la Facultad de Odontologia de Santiago de Compostela con la profesora Viviana Ludi Etchevarren. Muchos médicos de todo el mundo, de diversas especialidades, acuden a Pontevedra para ver lo que hago, entre otras cosas Ozono intraperitoneal y otras. Son ya más de 80 pacientes con cáncer avanzado a los que hemos realizado ozono intraperitoneal. Recientemente han estado dos profesores de la Universidad de Teherán y han sido entrevistados por la TVG. Realizo técnicas únicas y creo dominar el manejo y los límites del ozono.

No tengo buena relación con mis jefes del Sergas, en particular con el equipo directivo de Pontevedra. He sido sancionado y me han sacado 33000 euros por incompatibilidad por realizar Ozonoterapia. Sin palabras. No es el motivo de este mensaje. Es decir, no son mis jefes de aquí a los que pueda dirigirme para explicar todo esto. En primer lugar porque todo lo que venga de mí no merece atención sino sanción.

El ozono es esencialmente un modificador de la evolución del curso clínico de las enfermedades, de cualquier enfermedad. Es una terapia de amplio espectro, con muchas capacidades. Creo firmemente que el ozono administrado de acuerdo a mis criterios puede actuar favorablemente sobre el curso clínico de la enfermedad por virus EBOLA. Puedo explicar científicamente porqué.

La dramática y rápida extensión de la enfermedad en África es motivo suficiente para que me movilice y pueda despertar interés para que el ozono pueda ser investigado. Hay una razón todavía mucho más poderosa y es que el ozono carece de efectos secundarios y contraindicaciones.

Nada más añadir que puedo aportar, no solo mi voluntariedad, sino recursos propios , equipos y material.

Se me ocurrió escribirte porque quizá puedas hacer llegar esta idea a la persona adecuada.

Un fuerte abrazo

Chicho Pérez Olmedo
658290956
Me contestó el mismo día:

De: xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
Enviado el: jueves, 07 de agosto de 2014 18:54
Para: Perez Olmedo, Juan Carlos
Asunto: RE: CHICHO PEREZ OLMEDO
Carácter: Confidencial

El paciente positivo ha llegado y está estable, la monja es de momento contacto a observar presuntamente negativo.
Yo como comprenderás, no intervengo en su asistencia sino que esta es llevada por médicos especialistas en medicina tropical e intensivistas. De todas formas cuando me llegó el correo estaba en una reunión de la comisión de alerta de la enfermedad por virus Ebola viral, y los presentes se mostraron escépticos en ese tratamiento cuando lo comenté.
De momento es un caso único y lo tratarán con la medicina convencional, yo les dejo tu correo.
Mañana regreso a PONTEVEDRA.
Un abrazo
Rafa
Después le escribí algún mensaje más pero ya no hubo respuesta. Ayer el último, le decía que la auxiliar afecta de EBOLA debería estar informada de que el ozono pudiera ser una posibilidad de tratamiento y que me ofrecía para aplicarlo.

También escribí a MSF, a la ORDEN de San Juan de Dios, al Presidente de la Xunta de Galicia, a un corresponsal de Ondacero porque un colega me dijo que lo hiciera, a responsable de Liberia en la OMS, a Sindicatos y ya estoy pensando que estoy loco ya que nadie ha respondido salvo la Revista DISCOVERY SALUD. Ahora les escribo a todos ustedes.

Le adjunto además un trabajo publicado en el Clinical Cancer Research, en el mes de Julio de este año. Dónde estaca la capacidad que posee el ozono por via intraperitoneal de estimular el sistema inmune. Extraigo un párrafo:

El mecanismo con el que más probablemente el tratamiento O3/O2-PP induce la respuesta tumoricida parece estar relacionado con la estimulación de células inmunitarias como consecuencia del gas oxidativo insuflado en el peritoneo. Aquí probablemente hay que incluir a las células T antitumorigénicas y también a los macrófagos residentes y las células dendríticas (DCs, en inglés).

Sé que la Revista Discovery Salud está preparando un reportaje.

Los médicos tenemos un problema, la SOBERBIA, somos o nos creemos muy listos, yo también, llegamos al punto de esconder nuestros trucos a nuestros colegas, no vaya a ser que nos quite el cliente. Siempre hay que saber más que el otro. Por SOBERBIA desprestigiamos sin argumento.

Nada más y mucho más.

Un saludo a todos y a vuestra disposición.

 

Publicado por: Juan Carlos Pérez Olmedo

Médico

Martes 07.10.2014

 

Caso de Pioderma gangrenoso tratado con ozonoterapia

(C. J. C) (Publicado en la Rivista di Ossigeno-Ozonoterapia. Octubre 2008)

Sumario
El Pioderma gangrenoso es una lesión dérmica catalogada
entre las lesiones necrotizantes con etiología imprecisa y cuya
evolución no tiende a una curación espontánea. Su tratamiento
aceptado como útil es muy agresivo y con efectos secundarios
conocidos (corticoides y antimitóticos- inmunodepresores). Este
caso único se curó con la aplicación del ozono y los factores de
crecimiento plaquetarios propios del enfermo, por lo que abre
una esperanza en la compresión de su etiología, así como en el
modo de tratarlo de forma eficaz.
Las lesiones necrotizantes suelen ser el resultado de infección por una variedad de
microorganismos, aerobios y anaerobios; también se reconocen infecciones similares
causadas por hongos, zigomicetos (antes denominados ficomicetos),
F.L. Meleney describió infecciones necrotizantes por estreptococos beta hemolíticos y
por sinergia bacteriana, y hoy todavía muchos las denominan “gangrena de Meleney” o
“infección sinérgica de Meleney”.
Los síndromes necrotizantes tienden a ocurrir en huéspedes inmuno-comprometidos,
con enfermedades degenerativas y debilitantes, con diabetes o enfermedad vascular, con
neoplasias, o en pacientes que han sufrido trauma o han sido sometidos a operaciones
sobre los tractos gastrointestinal y genital. Sin embargo, también se presentan en
personas sin antecedentes patológicos con trauma mínimo abierto o trauma por
contusión, después de inyecciones hipodérmicas o aún después de operaciones limpias.
Sólo el diagnóstico precoz y una intervención quirúrgica radical de urgencia, unidos a
un excelente soporte de la función orgánica en una buena unidad de cuidado intensivo,
puede salvar la vida del enfermo.
Tipos de lesiones necrotizantes
Dependiendo de donde se instala el germen causante de la infección tendremos: celulitis
, fascitis necrotizantes, mionecrosis. De la misma manera según el germen causante
podremos “clasificar” los distintos tipos de lesiones necrotizantes. Asi tenemos

1. Gangrena bacteriana sinergística o gangrena de Meleney (Estreptococo
   microaerofílico + S. aureus o Proteus)
   2. Celulitis sinergística necrotizante
   3. Celulitis crepitante no clostridiana
   4. Fascitis necrotizante
   5. Pioderma estafilocóccica, celulitis e infecciones estafilocóccicas de la herida
   6. Pioderma estreptocóccica o impétigo, erisipela, celulitis, úlceras y gangrenas, e
   7. infecciones estreptocóccicas de la herida
   8. Pioderma gangrenosum (por flora polimicrobiana)
   9. Gangrena gaseosa (clostridiana)
   10. Mucormicosis cutánea necrotizante

En general, podemos resumir que, usualmente son producidas por estreptococos
aeróbicos, otros cocos Gram positivos, bacilos coliformes aeróbicos y clostridios.
Aunque las lesiones celuliticas suelen ser monomicrobianas, en general son de etiología
polimicrobiana.
El termino gangrena significa necrosis, es decir destrucción de tejidos, pero no toda la
culpa es del agente “causal” encontrado en la lesión;
Tan solo tenemos claro que la supervivencia de estos pacientes depende de un
tratamiento quirúrgico inmediato y agresivo, el cual consiste en la resección o
desbridación amplia y completa de todos los tejidos afectados. Al mismo tiempo se
debe de combatir la infección subyacente con antibióticos y antifúngicos.
El Pioderma gangrenoso
Entre las lesiones gangrenosas descritas antes, está el Pioderma gangrenosum cuya
etiologia es de causa desconocida. Fue descrita en el año 1930 por Brunsting,
Goeckerman y O’Leary.
El Pioderma gangrenosum es una úlcera de rápido crecimiento, de bordes
socavados y eritemato-violáceos, dolorosa, con una pobre respuesta al tratamiento
tópico y una rápida mejoría a la terapia sistémica esteroidal o con sulfonas. Afecta
en 90,9% a mujeres y el resto hombres (9,1%). El promedio de edad, al inicio de la
enfermedad, es de 47,5 años. La localización más frecuente de la lesión cutánea fue
en extremidades inferiores ( 72,7%), también se observaron lesiones en cara,
extremidades superiores y área genital.
Acerca de su etiologia, se afirma estar relacionada con una disfuncion del sistema
inmune, en particulñar de los neutrofilos. Aparece concomitante con enfermedades
sistémicas tales como: Colitis ulcerosa Enfermedad de Crohn; tambien Artritis y
neoplasias hematológicas. También con traumas sufridos, tanto físicos como síquicos
Debido a su baja incidencia son escasos los estudios con series numerosas, y existen
pocos antecedentes sobre el curso de esta enfermedad en el largo plazo.

UN CASO DE PIODERMA GANGRENOSUM (C.J.C.)
En Vacaciones me llama la paciente, me trasmite su preocupación: le ha picado un
mosquito y se le ha “infectado” . Me dice que le da pinchazos, tiene los bordes azulados
y un aspecto horrible……
Una vez en clínica inspecciono la lesión: su aspecto horrible. Bordes elevados color
rojo-violáceo. Fondo aspecto como masa de carne necrótica como de “hamburgesa
cruda” que se deshace al hacer la cura. El aspecto peri-lesional es edematoso, rosado y
muy sensible al tacto (me dice que intolera la venda muy ceñida).
Dada la sensibilidad extrema, decido lavársela con agua ozonizada y aplicar aceite de
ozono con parafina y vendaje flojo. Cuando llega a casa, se lo quita pues no puede
soportar.
Antecedentes
Sufre de colitis ulcerosa desde hace unos 20 años tras sufrir disturbios emocionales en
su ambiente familiar. Desde entonces padece tres a cuatro crisis al año con deposiciones
muco-sanguíneas. Se acompaña de gran cansancio físico hasta el hecho de manifestarse
a nivel bioquímica (proteínas bajas, elevación de las gammaglobulinas, anemia…etc ver
más abajo.).
Me comunica que ya le ocurrió algo igual hace 5 años y se la curó un dermatólogo
oncólogo.

Alzheimer y Ozonoterapia

En la enfermedad de Alzheimer como en prácticamente todas las enfermedades degenerativas se postulan diversas etiopatogénias, como son los factores ambientales y genéticos, además parece existir mayor presdisposición en aquellos pacientes con historia previa de diabetes, traumatismos craneales, embolia cerebral, depresión, parkinson y patologias en las que existe un mayor riesgo vascular.

En las formas de inicio precoz ya han sido identificados genes que parecen relacionados con la enfermedad, como el gen de la proteina precursona de amiloide o los genes presenilinas, que sí tienen un efecto directo causal.
También se barajan diversos mecanismos como la acumulación de amiloide, hiperfosforilación de proteina tau asociada a microtubulos, estrés oxidativo, inflamación y metabolismo del calcio.
Esta cientificamente aceptado que los radicales libres están fuertemente implicados en la fisiopatologia de la Enfermedad de Alzheimer, tal y como ocurre en el envejecimiento y otras enfermedades degenerativas como el Parkinson.
Se postula que la lesión celular presente en la enfermedad de Alzheimer es producto de un exceso de radicales libres en un organismos incompetente para mantener un sistema antioxidante o anti radicales libres que equilibre este exceso de radicales libres y/o especies reactivas del oxigeno, que lleva inexorablemente a la lesión celular.
Por otro lado las celulas nerviosas, las neuronas, son extremadamente sensibles a la actuación de los radicales libres, como ha quedado evidenciado en el examen del tejido verebral de pacientes con Alzheimer dónde se aprecian signos de lesión por radicales libres como en el ADN, oxidación proteica y la peroxidación lipídica.
El beta-amiloide, sustancia fundamental de la placa senil, es altamente sensible a los radicales libres dando lugar a su acumulo y además los antioxidantes reducen la toxicidad del beta amiloide.
La APO-E o gen de la apolipoproteina E, responsable de una mayor susceptibilidad en Alzheimer esporádico o de inicio tardio, es diana de ataque de los radicales libres.
Y por último, al igual que en el envejecimiento, existe un aumento aún mayor de alteraciones mitocondriales,en especial con la citocromo C oxidasa así como una depresión de los sistemas antioxidantes, estas anomalías explican la anormal producción de radicales libres.
La edad es el principal factor de riesgo de la Enfermedad de Alzheimer y es un hecho constatado que el envejecimiento es un fenómeno de oxidación, dónde el stres oxidativo se encuentra desiquilibrado a favor de los elementos oxidativos, es decir radicales libres y especies reactivas del oxigeno.
La teoría de los radicales libres en la etiopatogenia de la demencia senil es aceptada cientificamente y en base a ésta se utilizan desde hace tiempo diversos medicamentos antioxidantes como son la Vitamina E, la selegilina y el extracto de Ginkgo biloba como tratamiento co-adyuvante. No obstante con ninguno de ellos se ha demostrado un beneficio a largo plazo sobre estos pacientes.
El ozono es un modulador del stres oxidativo biológico. La producción de especies reactivas del oxígeno, incluyendo en éstas los radicales libres hidroxilo OH*, el anión superóxido O·2 y otras no radicálicas como el peróxido de hidrógeno o el ácido hipocloroso HOCl, forman parte del metabolismo biológico normal y además son necesarias para una serie de procesos vitales, como por ejemplo la fagocitosis, sin embargo el aumento descontrolado de estas especies reactivas y radicales libres esta directamente relacionado con una amplia variedad de patogenias, incluyendo en éstas el ALZHEIMER y el envejecimiento.
El control de la especies reactivas del oxígeno y radicales libres corresponde en el organismo a los sistemas antioxidantes enzimáticos, fundamentalmente las enzimas superóxido dismutasa, catalasa y glutatión peroxidasa.
Por tanto, un exceso de radicales libres o un fallo de estos sistemas de protección para contrarrestar la sobreproducción conleva indefectiblemente múltiples procesos patologicos.
Existen mecanismos asociados a las transducción de señales que activan o reprimen la transcripción de genes específicos encargados de modular el stres oxidativo.
El ozono posee la propiedad de estimular determinados sistemas enzimaticos antioxidantes protectores contra los metabolitos del oxigeno. Por tanto, la ozonoterapia genera una regulación dinámica entre la actividad pro-oxidante y la actividad antioxidante que genera el organismo, los cuales mantienen la estructura de la membrana y el metabolismo celular.
Ademas de la actividad antioxidante el ozono estimula los mecanismos de transporte y utilización del oxígeno a nivel celular.
Y por ultimo el ozono ha demostrado no provocar reacciones adversas.
Conclusiones del estudio realizado en cuba sobre 250 pacientes afectos de demencia senil dirigido por la Dra. Silvia Menéndez y en el que participaron el hospital clinico quirurgico 10 de Octubre y el hospital clínico de Santos Suárez, Habana-Cuba.
“La ozonoterapia resulta un procedimiento terapéutico eficaz en el manejo del anciano con demencia, especialmente en lo que se refiere a su autonomia que aporta mejores sustanciales (>75%) en los estados médicos y mental con predominio de la demencias multiinfarto (con 81 y 89% respectivamente), así como en la actividades de la vida diaria (76%), sobre todo, en las demencias multinfarto y senil mixtas (con 84 y 83% respectivamente) y en la capacidad de automedicarse (59%) con preferencia en las demencias multiinfarto (79%) NO se reportaron reacciones adversas en ninguno de los casos tratados”
El tratamiento se administra por via rectal o por autohemoterapia. Por via rectal se puede realizar diariamente de Lunes a Viernes, 15 sesiones. En el caso de la autohemoterapia se realizan dos sesiones por semana hasta las 15 sesiones. Luego se van espaciando las sesiones, una por semana, cada 15 dias y mantener después indefinidamente una sesión por mes.

 

Ultima actualización (Viernes 02 de Abril de 2010 19:38)

 

Vivir con Esclerosis Múltiple (EM)

Vivir con Esclerosis Múltiple (EM).

Por Sandra Patricia Ortiz

Médica y Cirujana

Universidad de Antioqua

 

La Esclerosis Múltiple es una enfermedad del sistema nervioso central, que afecta la mielina, cubierta grasa que aísla las fibras de las células nerviosas en el cerebro y en la médula espinal. La mielina facilita una transmisión sin dificultad y a alta velocidad de los mensajes electroquímicos entre el cerebro, la médula espinal y el resto del cuerpo. Cuando hay daño a la mielina por un proceso inflamatorio, la transmisión de los impulsos neurológicos ocurre más lento o queda bloqueada totalmente, lo que conduce a una reducción o pérdida de función que puede ser recuperada parcial o totalmente, dependiendo de la capacidad de remielinización de cada individuo y terapias que faciliten este proceso, pero a largo plazo gran número de pacientes acumula discapacidad, llevándolos a silla de ruedas o postración en cama.

 

La EM puede variar entre relativamente benigna e incapacitante, a medida que se perturba la comunicación entre el sistema nervioso central y otras partes del cuerpo. La EM es catalogada dentro de las enfermedades auto-inmunes específicas de órgano, existen variantes dentro del mismo diagnóstico (Recaída-Remisión, Primaria Progresiva, Secundaria Progresiva y Benigna) y se sabe que el comportamiento de la enfermedad es diferente en cada persona.

Imagen Tomada del sitio WEB de la Federación Internacional de esclerosis Múltiple

http://www.msif.org/es/ms_the_disease/types_of_ms.html.

No se sabe con exactitud que causa la Esclerosis Múltiple, lo que si se ha visto es que es una interacción entre la predisposición de algunas personas a desarrollar la enfermedad y factores medioambientales como infecciones por virus o bacterias comunes, alimentación industrializada, contaminación ambiental, estrés, factor hormonal, entre otros. Esta enfemedad debuta entre los 20 y 40 años generalmente y se presenta en mayor proporción en las mujeres. En nuestro país la prevalencia aproximada es de 6 * cada 100000 habitantes.  Es una enfermedad que no tiene cura hasta ahora, los tratamientos actuales aprovados por la FDA (Food Drug Administration, entidad que regula los medicamoentos en occidente) tienen un efecto menos que modesto sobre el curso de la Esclerosis Multiple, su mejor acción la tienen en la variante Recaída-Remisión en etapas tempranas de la enfermedad pero sin modificar el deterioro neurológico al final.  La ciencia está en busca de tratamientos que sean más prometedores y con menos efectos adversos.  Sin embargo hay mucho por hacer, la rehabilitación física y neurológica brindan bastante al respecto, está científicamente demostrado por diversos estudios que retrasa la evolución de la discapacidad y las posibles complicaciones, así como la mejoría objetiva de las condiciones de los pacientes. Un programa de rehabilitación que se inicie en las primeras fases de la enfermedad puede mejorar el estado general de la persona con EM.  En busca de una mejor calidad de vida una alimentación equilibrada y adecuada a las nuevas condiciones proporciona a largo plazo una mejor respuesta del organismo a la enfermedad y actúa como factor protector hacia otras enfermedades que aumentan su incidencia en la población con Esclerosis Múltiple. Alimentos mas naturales (sin colores, sabores artificiales y preservativos) y la ingesta equilibrada de los grupos alimenticios, disminuyendo el exceso de harinas y azucares refinadas, grasas saturadas, esto contribuye a un metabolismo mas saludable.

 

Por su carácter crónico y falta de una terapia que modifique drásticamente el curso de la enfermedad muchas personas comienzan tratamientos no convencionales pero menos deletéreos. Es necesario que como paciente

se entere de las alternativas de tratamiento que existen, de su efectividad y posibles efectos adversos a largo plazo.  Valore riesgo/beneficio de una manera objetiva, infórmese y pregunte lo que no entienda, ya hay maneras de obtener  información confiable.

 

La  actitud mental que se debe tener cuando comienza a padecer la enfermedad, debe ser positiva y alentadora, entender que con sumergirse en la depresión y pregustarse “por qué a mi” sin dar una respuesta positiva para nada ayuda.  Puede su vida se llene de incertidumbre y angustia sobre el futuro que le espera al darle la noticia de que sufre EM, pero tenga en cuenta que el futuro es incierto para todas las personas.  Mas ahora usted tiene una oportunidad de cambiar su vida, indiscutiblemente necesita hacer modificaciones que le permitan ajustarse a los nuevos comportamientos físicos de la mejor manera posible y para ello necesitará fe, y fuerza de voluntad, para trabajar con el objetivo de que su calidad de vida disminuya lo menos posible.

 

Es recomendable aprender a diferenciar las molestias permanentes de la enfermedad de los signos de una recaída, hay síntomas con los cuales usted debe aprender a vivir como es el caso de la fatiga que le obligará a distribuir mejor su energía.     Usted decide, si quedarse lamentando su pérdida y ver como se deteriora su organismo o luchar con todo lo que pueda para posibilitar una mejor recuperación después de cada recaída y con un estilo de vida saludable mejorar la calidad de su existencia.

 

Mantenga un cerebro activo, estimulado y una actitud mental positiva, un descanso adecuado, responda a los estados de estrés de una manera positiva que le faciliten superar con menos traumas eventos difíciles, tenga relaciones satisfactorias con otras personas, evite drogas que debiliten su sistema inmune y hábitos como fumar y abusar del alcohol que empeoran la evolución de la enfermedad.  No se compadezca, trate de hacer su vida lo más normal posible, así, le demande mucho más esfuerzo.

 

Hay dimensiones del ser que son propias de cada quien, porque usted decide en que cree y como lo hace, pero hay experiencias acerca de la fortaleza que encuentran algunas personas enfermas en la fe, la esperanza y el amor, queriendo aprender lo mejor posible de lo que están viviendo, agradeciendo cada día por lo que tienen y pueden hacer para mejorar y no dándose golpes de pecho por lo que ya se perdió.

 

“Cosas por las que estoy agradecido: estoy agradecido por tener una pierna, cojear no es una desgracia, si bien no puedo ser el primero, todavía puedo correr la carrera.  No son las cosas que uno no puede hacer lo que hacen que uno no sea lo que es,  es hacer bien lo que uno puede lo que enciende el lucero del alba”.

 

Johnny hart y Creators Syndicate

Trate de identificar que le ayuda a mejorar su estado de salud y que le perjudica, propóngase cada día a ser más independiente física y emocionalmente, piense que puede ofrecer mucho de usted y que el enfrentarse a una circunstancia como esta le da la experiencia necesaria para ayudarle a otros que vienen detrás.

Y Por último, como paciente de que me he beneficiado?

Como Inició la  enfermedad?

Eso fue en 1998

• Pérdida visual por el ojo izquierdo en dos ocasiones.
• Pérdida del equilibrio por más de una semana con compromiso de la marcha
• Pérdida motora del lado izquierdo que imposibilitaba el traslado
• Desvanecimientos con pérdida motriz, sin pérdida  de la conciencia.
• Atrofia muscular y disminución de peso
• Visión doble
• Fatiga
• Urgencia Urinaria
• Sensación de quemazón en hombros
• Piernas inquietas

Como era yo antes de la enfermedad?

Mujer de 28 años, fuerte, activa, vital:

Entrenaba alterofilia

Estudiaba biología

Trabajaba en un instituto de estudios regionales

Madre de una niña de 8 años

Y con todo el mundo por delante, para mí lo más importante era mi fortaleza física y trabajaba mucho por eso, Pesaba 56 kg, con una talla 1,64. Buen tono muscular, me levantaba 100 kg en sentadilla, 65 kg en arranque y 85 kg en envión.  Cuando todo empezó mi mente no aceptaba mi pérdida física, estuve un año muy enferma, mi cuerpo no era el mismo y mi alma desfalleció.

Que exámenes me hicieron para el diagnóstico:

Luego de muchas visitas al médico e inclusive vista por psiquiatra, descartaron HIV, deficiencia de Vitamina B12, lupus , Trastorno de pánico y en estudios para Esclerosis Múltiple, tuve potenciales evocados visuales alterados bilateralmente en dos ocasiones, bandas oligoclonales en liquido cefaloraquídeo, IgG anticardiolipinas elevadas,  resonancia magnética sin placas de desmielinización.

Por criterio clínico y exámenes positivos se me hizo un diagnóstico de Esclerosis Múltiple probable.

 

 

Que Hice para mejorar mi estado de salud?:

1. Acercarme a Dios por medio de su hijo Jesucristo: Con el alma desfallecida reconocí mi vulnerabilidad e imperfección, tanto física como mental y con un espíritu prácticamente muerto, arrodillada le rogué a Dios que me ayudara, acepte que necesitaba de su perdón por tantos años de lejanía y soberbia y que lo necesitaba para mi tránsito a través de la muerte, hacia la vida eterna.  Esto es lo más maravilloso que me ha pasado y puedo ahora valorar cada segundo que Dios me da en esta tierra dándole primero la gloria a él..
2. Ozonoterapia: Decidí  no aplicarme interferón beta que es lo que ofrece la medicina aprobada en occidente para esta enfermedad..

Durante mi formación como médica me dedique a leer sobre los beneficios de este medicamento en la esclerosis múltiple no encontrando una justificación válida para usarlo. Entonces buscando algo alternativo pero como primera línea para mi tratamiento encontré la ozonoterapia.  Fui hasta Cuba donde aprendí esta medicina e inicié tratamiento yo misma en el 2005, para mi rompía con todo paradigma aprendido en mi universidad pero la ida a Cuba fue impactante ver como miles de paciente de aquella isla ven en la ozonoterapia una opción de tratamiento que ayuda a sus problemas de salud y con toda la razón,  el ozono es una molécula especial, cargada de mucha energía, mejora la circulación, oxigenación, tiene efecto desinflamatorio y analgésico y es modulador de la respuesta inmune.  Hay muchos artículos científicos sobre los beneficios de la ozonoterapia.  Ahora estoy estable, sin recaídas hace más de 4 años, con una funcionalidad al 100%, gloria a Dios y gracias a la herramienta terapéutica que me posibilitó (La Ozonoterapia). Con potenciales evocados visuales que muestran mejoría del lado izquierdo y sin efectos adversos importantes tras 5 años de uso del ozono médico.  No solo yo me he beneficiado de esta buena terapia, sino que mi familia también. Pero como toda terapia no es única y requiere de manejo integral para posibilitar recuperación en pacientes con EM.

 

3. Alimentación saludable: Evitar grasas saturadas, azucares refinados, harina refinada, aumentar el consumo de verduras y frutas, suplementar con Whey protein, Acido alfalipoico, primrose oil, vitamina D, vitamina B1, B6 y B12, acidophillus, en tiempo de pérdida de peso marcado con atrofia muscularme he aplicado decanoato de nandrolona[1]a dosis muy espaciadas para mejorar el metabolismo de las proteínas, carbohidratos y grasas y ah sorpresa… hace

[1] Un análogo de la testosterona sin los efectos hepatotóxicos tan marcados.  Usado en recuperación de pacientes en convalecencia, niños desnutridos, osteoporosis y paciente con VIH

poco salió el beneficio del tratamiento con testosterona en hombres con EM,  porque hombres?.  Porque en ellos se hizo el estudio.

http://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00405353

4. 4. Actividad física:Caminar, bailar, fortalecimiento muscular (pesas), esgrima, judo todo dentro de mis posibilidades físicas sin dejar un día de moverme a pesar de la fatiga que en ocasiones es tan acentuada que quisiera estar acostada todo el tiempo.

5: Mente activa: Dios me dio la oportunidad de estudiar medicina, después de tener el diagnóstico de la enfermedad y estoy segura que ello potencio lo sano y minimizó el efecto deletéreo en lo dañado a nivel cognitivo.  Logre mis metas en mi tiempo, tuve fé, fortaleza y templanza apoyada en la roca fuerte (Jesucristo).  Conozca su cuerpo proporciónele lo que necesita para estar activo, eso sí no se quede “lamiendo” la llagas porque ahí es donde pierde mucho tiempo, decae el ánimo y se deteriora la vida.

Si usted sufre de esta enfermedad no se deje, eche para delante, cambie de actitud.  Haga un freno en el camino, mire al creador y como yo quiera aprender de él, que de ahí emana todo lo bueno del hombre.  Y si desea puede comunicarse conmigo.

Ah, recuerde la ozonoterapia es una buena alternativa de tratamiento para mejorar y mantener su calidad de vida, eso sí en combinación con estilos de vida saludable y si decide hacerse este tratamiento consiga un buen profesional en la materia.

Sandra Patricia Ortiz

alexien_30@instruction.com

Ultima actualización (Viernes 20 de Abril de 2012 17:46)

Valoración del Estres oxidativo. Fras 4

Como valorar bioquímicamente el estrés oxidativo de una manera rápida, fiable y económica?.  Fras 4

Dr. Eugenio Luigi Iorio

 

El estrés oxidativo es, por definición, la consecuencia directa de la acción dañina ejercida por cantidades irregularmente elevadas de radicales libres sobre las células y sobre los tejidos de nuestro organismo.

 

¿Pero qué son los radicales libres? ¿Cómo actúan?
Los radicales libres son átomos o agrupaciones de átomos capaces de reaccionar con cualquiera molécula de la célula (incluso el ADN), dañándola, con consecuencias a menudo desastrosas, alteraciones funcionales, alteraciones estructurales y/o muerte celular.
El daño es debido al hecho de que los radicales libres son agentes muy “ávidos de electrones” para buscar  estabilidad, pierden su potencial lesivo sólo cuando logran arrancar los electrones de las moléculas con las que contactan (acción oxidante).
Una pequeña cantidad de radicales libres también es producida en condiciones normales, a causa del metabolismo celular. La producción de algunas hormonas, por ejemplo, implica la generación de radicales libres, algunos glóbulos blancos,  por ejemplo, producen radicales libres para  matar  bacterias, ayudando a nuestro organismo a defenderse de las infecciones. Desde éste punto de vista, los radicales libres han sido justamente definidos “insustituibles compañeros” de la vida celular. Sin embargo, en particulares condiciones, la producción de radicales libres puede ser tan copiosa que constituye una seria amenaza para la integridad de las células.
¿Cuáles son las causas que inducen un aumento de  producción de los radicales libres?
Las causas pueden ser externas o internas al organismo. Entre las causas externas, recordamos algunos agentes físicos, ej.  Las radiaciones ultravioletas, numerosos agentes químicos, ej. Hidrocarburos,  herbicida, contaminantes comestibles, fármacos) y  agentes infectivos, ej. Virus y bacterias. Entre las causas internas del organismo hay que citar la aceleración exagerada del metabolismo celular (por ejemplo, después de un esfuerzo físico intenso y dilatado, sin adecuado entrenamiento, y numerosas enfermedades, ej. obesidad, diabetes etcétera).

 

En condiciones de buena salud, nuestro organismo logra  prevenir el daño de radicales libres gracias a  los sistemas naturales de defensa que son denominados con el término de antioxidantes, justo porque contrarrestan la acción oxidante de los radicales libres.
Los antioxidantes, por tanto, son agentes capaces de neutralizar la acción perjudicial de los radicales libres. Algunos antioxidantes, ej. Sistemas enzimáticos como las enzimas superóxido dismutasa  y  catalasa, son endógenos, es decir son producidos por nuestro organismo del que son parte integrante. Otros, en cambio, por ejemplo los vitaminas C y E, son exógenos, es decir tienen que ser introducidos desde el exterior, por ejemplo con un correcta alimentación.
En nuestro organismo, pues, existe un delicado equilibrio entre producción, externa o interna, y “eliminación” de los radicales libres, por parte de los sistemas antioxidantes. La rotura de este equilibrio provoca la manifestación de lesiones celulares que, si se agrava con la prolongación del tiempo de rotura del estrés oxidativo, conduce a una aceleración del envejecimiento y a la manifestación de numerosas enfermedades.

 

A la luz de estas consideraciones ahora podemos definir con más exactitud  estrés oxidativo como una condición patológica causada por la presencia en nuestro organismo de cantidades excesivas de radicales libre y otras especies reactivos del oxígeno (ROS), debido a una excesiva producción de estos agentes y/o a una reducida eficiencia de los fisiológicos sistemas de defensa antioxidantes.
Parece evidente que no es posible tener una idea exacta del estrés oxidativo y, en particular de la cantidad de radicales libres producidos y del grado de eficiencia de los sistemas de defensa, si no se valoran ambos  miembros que continuamente se enfrentan en nuestro organismo, o sea,  los que favorecen la oxidación (radicales libres) y los que la combaten (sistemas antioxidantes).
Nace de estas simples consideraciones el concepto diagnóstico: valoración global del estrés oxidativo, hoy realizable gracias al nuevo sistema FRAS 4, que permite ejecutar y realizar   dos simples determinaciones analíticas, Test d-ROMs  y Test BAP.
El d-ROMs  aparece como la única prueba actualmente disponible para valorar  el estrés oxidativo, mientras el BAP permite la determinación del poder antioxidante del plasma.
Hoy, gracias a la tecnología del FRAS 4, es posible valorar de manera global el nivel de estrés oxidativo, ejecutando sobre una pequeña muestra de sangre obtenidas a través de la punción en la yema del dedo, dos pruebas diagnósticas sumamente innovadoras, capaz de proveer no sólo informaciones precisas y fiables sobre los “agresores”, los radicales libres, por el d-ROMs test, sino también sobre nuestras capacidades de “defensa”, el poder antioxidante plasmático, por el BAP test.
La oportunidad de ejecutar una o ambos test depende de la finalidad que se busque: si se trata de investigar sujetos sanos, de pacientes con enfermedades relacionadas con estrés oxidativo  o de sujetos sometidos a tratamientos  que favorecen un desequilibrio en sentido pro-oxidante del balance oxidativo.
En los sujetos aparentemente sanos, la finalidad de la valoración es identificar una eventual condición desconocida de estrés oxidativo y, por lo tanto, prevenirles de  las consecuencias indeseadas: envejecimiento, enfermedades, etcétera. Si los sujetos en cuestión no están expuestos a factores específicos capaces de aumentar la producción de radicales libres, es suficiente realizar solo d-ROMs test. En realidad a este test deberían someterse, periódicamente, todos los sujetos sanos, porque no existe individuo que no esté expuesto al riesgo de producir.  -en sentido absoluto o relativo-.  Cantidades excesivas de radicales libres. En efecto, todos, desafortunadamente, contra nuestra voluntad, estamos expuestos, aunque con frecuencia variable, a las radiaciones solares, a los contaminantes atmosféricos, a los contaminantes comestibles, a las infecciones etcétera. En los sujetos,  aparentemente sanos, pero que están expuestos más constantemente, por razones diferentes (estilo de vida inadecuada) actividad profesional etcétera), a factores que favorecen el estrés oxidativo, hace falta hacer una distinción preliminar. En efecto, si el factor al que está expuesto el sujeto predominantemente actúa favoreciendo la producción de radicales libres, ej.: ejercicio físico excesivo sin adecuado entrenamiento, sobrepeso, humo de cigarrillo, consumo excesiva de bebidas alcohólicas, etcétera,  es suficiente sólo ejecutar el d-ROMs test como prueba de “screening.” Si, viceversa, el factor de riesgo al que se ha expuesto predominantemente actúa reduciendo las “defensas antioxidantes”, ej.  vida sedentaria, régimen alimenticio inadecuado, reducida absorción de principios nutritivos por patologías gastro intestinales, excesivo “consumo” de antioxidantes con respecto de la cuota introducida, etcétera,  está, indicada la ejecución tanto del d-ROMs test como el     BAP test.
Por todo aquellos pacientes con diagnóstico de enfermedad relacionada con el estrés oxidativo, ej. m. de Alzheimer, ictus, infarto, etcétera, la finalidad de la valoración global con ambos test son:

1. a)Monitorizar el estrés oxidativo y prevenir de sus consecuencias.
2. b)Monitorizar la eficacia de la terapia precisa sobre la patología actual y, aspecto no irrelevante:
3. c)Monitorizar la eficacia de la terapia específica combinada con  la terapia antioxidante sobre el estrés oxidativo asociado a la patología actual.

Concerniente a esta última finalidad, hace falta subrayar que en muchas  patologías de curso crónico, el estrés oxidativo tiende a configurarse como un factor de riesgo adicional y, como tal, tiene que ser controlado para obtener  óptimos resultados de la terapia. En otras palabras, la evidencia, por el FRAS 4, de una condición de estrés oxidativo constituye un índice de control incompleto de la enfermedad y, por tanto, le sugiere al médico un enfoque terapéutico integral, donde encuentren no sólo adecuada selección de fármacos o las intervenciones quirúrgicas tradicionales, sino también la corrección del estilo de vida y, eventualmente, la asociación de antioxidantes, cuya eficacia puede ser adecuadamente monitorizada con el BAP test.

 

Por fin, por todos los pacientes subordinados a intervenciones terapéuticas, sea de tipo farmacológico, (ej. quimioterapia, analgésicos, etcétera) , quirúrgicos , (ej. trasplantes de órgano, bypass, etcétera), comprendiendo la diálisis, capaz de comprometer el balance oxidativo en sentido pro oxidante, las finalidad de las dos pruebas son identificar y prevenir el estrés oxidativo y sus consecuencias y, en particular, monitorear la eficacia de eventuales  medidas antioxidantes  llevadas a la práctica para prevenir el daño tisular del estrés oxidativo

 

Una vez ejecutados las pruebas, d-ROMs y BAP, es necesario para el médico  interpretar y administrar los resultados conseguidos sea con el empleo del solo d-ROMs que con la combinación de las dos pruebas.
Sobre la base de los resultados de más de 200 estudios sobre las susodicha prueba hasta ahora publicados es hoy posible trazar una serie de líneas conducentes a una correcta interpretación y gestión de los resultados.
Tales líneas  constituyen un indispensable soporte para el médico porque permiten obtener un diagnóstico más exacto  de estrés oxidativo y, por tanto, de
optimizar el tratamiento  específico y/o antioxidante, cuando está indicado.

Las respuestas están contenidas en las líneas guía.

 

Y por fin disponible para médicos y otros operadores sanitarios el FRAS 4, un sistema integrado que permite de valorar de manera global el estrés oxidativo por la ejecución de dos pruebas, el d-ROMs  y el BAP.
El d-ROMs permite determinar la concentración hemática de los metabolitos reactivos del oxígeno (ROM) y, en particular,  de los hidroperóxido, marcadores y amplificadores del daño celular de radicales libres.
El BAP prueba permite determinar la eficiencia del barrera antioxidante plasmática en términos de actividad hierro-reductor.

 

Gracias a estas dos pruebas es posible poner un diagnóstico de estrés oxidativo extremadamente preciso y confiable, donde las dos miembros contrapuestos, aquel pro – y anti-oxidante pueden ser valorados distintamente. En otras palabras, es posible establecer en tiempo real si el estrés oxidativo es debido a una aumentada producción y/o a una reducción de la capacidad para eliminar los radicales libres. De este modo también la monitorización de la terapia antioxidante puede apoyarse sobre bases más sólidas y salir de la fase empírica en que a menudo viene a encontrarse.
Todos deberían someterse a la valoración del estrés oxidativo, también en condiciones de buena salud y, a mayor razón, si se ha expuesto de manera no
episódica a factores pro-oxidante, ej. modos de vida insaludables, contaminantes en el entorno de trabajo, etc.,  o se sufren patologías crónicas degenerativas, ej. diabetes, aterosclerosis, neoplasias, demencia,  Parkinson, artritis reumatoide, etc, o esta sometido a procedimientos terapéuticos fuertemente oxidantes como diálisis, by-pass, trasplante de órganos, píldora, radioterapia, quimioterapia, etc.
Sólo gracias a esta valoración será posible optimizar terapias específicas y monitorizar la real eficacia de formulaciones antioxidantes, demasiado a menudo
asumidas sin que una prueba haya documentado su eficacia.

Ultima actualización (Viernes 20 de Abril de 2012 17:45)

 

La ozonoterapia en el antienvejecimiento

PAPEL DE LA OZONOTERAPIA EN EL ANTIENVEJECIMIENTO

Por Juan Carlos Pérez Olmedo

 

Denhan Harman en 1956 lanzó la teoría de que el envejecimiento era el resultado de las lesiones producidas por los radicales libres.

Los radicales libres se generan mayoritariamente en el metabolismo aerobio, durante la respiración celular, en la mitocondria. En ésta, durante la reducción univalente del oxígeno es dónde se producen los RL. El ión superóxido, el peróxido de hidrogeno, el oxigeno singlete y el radical hidroxilo son los RL principales relacionados con el envejecimiento acelerado y las enfermedades relacionadas.

 

El daño oxidativo prolongado, sin control, conduce irremediablemente a una aceleración del envejecimiento cronológico y además a la asociación de enfermedades,  influenciadas también por factores genéticos y del entorno.

Mas de 3×10⁹ moléculas de Peróxido de Hidrogeno generan a la hora las células humanas.

La sobreproducción sin control de RL conduce a daño en todas las macromoléculas del organismo, las proteínas oxidadas de los animales viejos representan entre el 30-50% de todas las proteínas celulares por lo que la actividad enzimática con la edad decrece; el DNA es lesionado cada día por los RL  en más de 10.000 lesiones. La organela que sufre el mayor ataque de los RL es la mitocondria, que es precisamente dónde se producen los radicales libres y la consecuencia del ataque masivo y descontrolado incide sobre la producción de energía en forma de ATP, reduciéndose y, por tanto, alterando los procesos químicos celulares, entre otros los de reparación.

Para restringir la producción de RL la restricción calórica es un mecanismo adecuado y así quedó demostrado en experimentación animal dónde los animales sometidos a restricción calórica mostraban un descenso significativo de ión superóxido y peróxido de hidrogeno con respecto a los alimentados normalmente.

Pero el control de la sobreproducción de RL corresponde a los sistemas antioxidantes y en primer lugar a los endógenos o enzimáticos: superóxido dismutasa, catalasa y el sistema glutatión peroxidasa. La actuación conjunta de todos ellos, incluidos los no enzimáticos como son los exógenos (Vit C ), los tocoferoles (Vit. E) o los antioxidantes extracelulares como la transferrina o ceruloplasmina, estos últimos encargados de secuestrar iones metálicos del plasma como el Hierro o Cobre, (el peróxido de hidrogeno al reaccionar con el Hierro por la reacción de Fenton produce radical hidroxilo )  es evitar la formación del temible radical hidroxilo, radical indestructible una vez formado y que provoca daño mientras exista. Por lo que la estrategia defensiva es evitar su producción. Es por tanto vital que todos los sistemas antioxidantes funcionen de forma coordinada, como si se tratara de una cadena. El disbalance entre la sobreproducción de RL y/o el fallo de los sistemas antioxidantes conduce al llamado ESTRÉS OXIDATIVO.

Muchos estudios de investigación en animales han demostrado que la sobre-expresión de SOD o catalasa tiene como resultado menos lesiones en las proteínas y un aumento de la longevidad máxima en más de un tercio. En gusanos nematodos, a los cuáles se les modifica un único gen, el age-1, muestran una longevidad mayor del 70% posiblemente como consecuencia de la producción elevada de SOD y Catalasa que presentan estos Nematodos mutantes. Otro estudio con el gusano C. Elegans a los que administraron SOD demostró una esperanza de vida superior al 50% con respecto al grupo control.

La radiación ultravioleta es el factor exógeno más importante de producción de RL afectando especialmente a la estructura y función de la piel; de todos es bien sabido que la exposición aguda da lugar a quemadura solar o eritema y descamación cutánea. En el foto-envejecimiento el fenómeno cutáneo más común es la elastosis, dónde el colágeno se degrada y se acumula elastina en la dermis.

Todo apunta que el estrés oxidativo juega un papel básico: el hierro en ratas se eleva tras exponerse a radiación UV, como habíamos dicho el peróxido de hidrogeno puede reaccionar con el Fe y formar radical hidroxilo.

Fibroblastos expuestos a radiación UV generan radical hidroxilo. También en keratinocitos se han demostrado RL.

Pero posiblemente la acción más estudiada de las radiaciones es la generación de oxígeno singlete, el cual tiene gran capacidad de dañar ácidos nucleícos, hasta el punto que se utiliza experimentalmente para modificar el DNA  en cultivos celulares. El oxígeno singlete también lesiona lípidos y proteínas. Se demuestra el aumento de 8-OHdG (8 hidroxi 2 deoxiguanosina) como marcador del daño al DNA después de exposición a radiación UV.

La generación de RL por efecto de la luz es un hecho científicamente probado y constatado en diversas observaciones, como por ejemplo la enfermedad de los pavos, conocida como ceguera del ojo derecho, enfermedad debida a que  los pavos dan vueltas sobre un foco de luz siendo afectado el ojo expuesto.

Es lógico pensar que la mejor lucha contra el estrés oxidativo radica en una estrategia que consista en evitar la formación de RL, una vez producidos que existan adecuados mecanismos de control del exceso de producción y además que existan sistemas de reparación eficaces una vez producido el daño. Además de la evitación de la formación de RL a cargo de medidas dietéticas y de vida saludable, la existencia de un buen sistema antioxidante, fundamentalmente enzimático, coordinado con la ayuda de los antioxidantes extracelulares, como la transferrina o ceruloplasmina, así como antioxidantes exógenos como las Vit. C, E, B-carotenos.

Existen diferentes autores que proponen la asociación de varios antioxidantes, sin embargo es posible, como ocurre en el caso del ozono que, pueda existir una competencia a favor de antioxidantes de menor valor en detrimento de los sistemas enzimáticos antioxidantes, que son precisamente los que ejercen una potencia antioxidante fotoprotectora de mayor entidad, al impedir precisamente la formación del letal radical hidroxilo.

Los diferentes modelos experimentales tanto en animales como en humanos realizados con ozonoterapia han otorgado al ozono una papel fundamental en la activación y/o estimulación endógena de la superóxido dismutasa, catalasa y glutatión peroxidasa, de manera tal que estimulaciones periódicas y repetidas con ozono provocan un controlado estallido respiratorio capaz de iniciar señales activadoras de distintos mecanismos y que de forma asombrosa dotan a la ozonoterapia de una mecanismo de acción diverso convirtiéndola en una terapia de amplio espectro muy poderosa al actuar no solo como oxigenante, antiinflamatorio, germicida, inmunomodulador sino como un potentísimo activador de los sistemas antioxidantes enzimáticos.

Precisamente, la mejor terapia Antienvejecimiento es aquella que no teniendo ni efectos secundarios ni contraindicaciones pueda no solo mantener una buena actividad antioxidante sino luchar a la vez contra las enfermedades asociadas.

Figura 1

Figura 1: Modelos experimentales que han demostrado la capacidad del ozono como agente estimulante o activador de sistemas antioxidantes enzimáticos. Todas esas situaciones patológicas provocan daño en distintos órganos por sobreproducción de radicales libres. En los experimentos diversos realizados con animales, a los grupos de animales a los que antes de ser sometidos al agente tóxico  (cisplatino, adriamicina, CCL4, LPS, etc) o al procedimiento estresante (quemadura, isquemia, etc) fueron pre acondicionados con ozono mostraron menos daño a órganos y tejidos, menor cantidad de marcadores de daño oxidativo y mayor elevación de sistemas antioxidantes enzimáticos (SOD, Catalasa y sistema glutatión peroxidasa).

Ozonoterapia en AntienvejecimieOzonoterapia, cuando la contaminación beneficia nuestra piel.

por Camila Essus 13 octubre, 2012

El ozono es uno de los enemigos más fuertes del medioambiente pero un gran elemento para aprovechar si se trata de belleza cosmética. Este oxidante funciona a la perfección retrasando el envejecimiento, aplicación que en Chile cuenta cada día con más adeptos.

Aunque en Chile es un procedimiento bastante novedoso, su origen nos remonta al siglo pasado, cuando tras la Primera Guerra Mundial, el uso de ozono se utilizó ampliamente para curar las heridas de guerra que presentaban los soldados. Debido a la sorprendente inmediatez de sus resultados, el mundo de la cosmética no tardó en reaccionar frente a sus efectos y se comenzó a usar en pequeñas dosis, induciendo a las defensas antioxidantes del organismo.

Tal como funcionan las vacunas, el ozono, poderoso oxidante, es añadido a una muestra de sangre del paciente, de tal forma que el organismo al recibirlo, genere un mecanismo de defensa aumentando la cantidad de antioxidantes, sustancias que se van perdiendo a lo largo de la vida y promueven la juventud celular, mejorando “la cualidad de todas las funciones del organismo”, explica el médico cirujano italiano Lamberto Re, que se encuentra en nuestro país para capacitar a profesionales chilenos en este método.

Al usar esta mezcla de oxigeno medicinal y ozono en nuestro organismo, este produce una verdadera cascada de reacciones benéficas , cuyos resultados conocidos son el producir una acción oxigenarte, energizante, revitalizante, inmunomodulador, antiradicalar, cicatrizante, analgésico, antiinflamatorio, y germicida. – Ozonoterapia.cl

Lo mejor de la suministración de este gas, es que debido al gran desarrollo con que cuenta hoy en día, funciona en varios planos más que sólo la estética “por ejemplo se pueden reducir todos los daños del envejecimiento, se puede reducir los dolores, la respuesta del organismo es muy buena…ahora se va a utilizar para mejorar los traumatismos en el deporte, para el dolor artrósico en general”, agrega el especialista.

La masificación de este proceso, se debe en parte a la longevidad que presentan los adultos de hoy. Según el doctor Re, es necesario garantizar la calidad de vida, pues hoy hay muchísima gente que vive hasta edades avanzadas y perfectamente puede hacerlo de buena forma mediante otros métodos distinto de los medicamentos. “la ozonoterapia puede ser un recurso muy interesante porque naturalmente cuesta menos que los medicamentos de los que dispone el mercado farmacéutico que son muy elevados”, señala Lamberto, lo cual podría beneficiar a muchos bolsillos dada la crisis económica que probablemente repercutirá también en Chile.

APLICACION Y DOSIS

Primero, se saca una muestra de sangre y se trata con ozono, luego la misma sangre ozonizada se vuelve a introducir al organismo, haciéndose una transfusión de la misma sangre. La idea del procedimiento es sacar una pequeña cantidad de sangre, por ejemplo, extraer un centímetro cúbico de sangre por cada kilo. Así, si uno peso 50 kilos, se sacan 50 cc de sangre.

El problema ha estado en la preparación de los médicos que lo realizan. La ozonoterapia es una terapia que todavía no es conocida por todos los organismos mundiales de sanidad pública, y ahí es precisamente donde se produce una confusión en si el médico está realmente preparado para hacerlo. Sin embargo, el especialista menciona “creo que aquí los médicos cirujanos están muy bien preparados y tienen una noción científica muy elevada y la atención sobre esta terapia será muy buena así como la respuesta de la población”.

 

CUBETAS DENTALES PARA LA APLICACIÓN DE OXIGENO-OZONO

 Juan Carlos Pérez Olmedo (Médico de Familia, Medicina Biológica. Unidad de Ozonoterapia Sanatorio Marescot. Pontevedra

Viviana Ludi Etchevarren, Odontóloga-Tutora Clínica de Patología y Terapéutica dental de la Facultad de Odontología de la USC

 

El ozono ejerce una fuerte actividad oxidante, fuertemente germicida en el primer punto de contacto. Para tratar amplias zonas debemos asegurarnos que el ozono llega por igual a las partes interesadas : Si queremos realizar tratamientos periodontales o de blanqueamiento necesitamos la máxima superficie expuesta al inicial contacto directo del ozono.

 

Retinosis Pigmentaria y Ozonoterapia

Ceguera nocturna o Retinosis Pigmentaria es una enfermedad hereditaria evolutiva que se inicia a cualquier edad, algunas generaciones la padecen otras no, los enfermos van viendo menos en su entorno, su campo visual se reduce. El mundo exterior se va convirtiendo en una especie de túnel con la luz al final, luz cada vez más distante y difusa. Cada vez la luz es más molesta y al final sobreviene la ceguera previsiblemente si se la deja seguir su curso.

 

Así era el proceso evolutivo de la enfermedad, pérdida de visión concéntrica paulatina y ceguera. Hasta mediados de los años 80 el resultado era inevitable. Sin embargo la coyuntura creada en Cuba con la caída y abandono del protector comunista ruso fustigó a la administración cubana a estimular a sus científicos en la búsqueda de nuevos proyectos médico-científicos que paliaran de alguna manera la falta de medios en la sanidad cubana. Un grupo de entusiastas investigadores, cuyo exponente principal es Silvia Menéndez importó a Cuba una terapia que durante años se venia desarrollando en determinados países de Europa pero que en los EEUU estaba prohibida y desarrollaron numerosos trabajos y experimentos con el ozono. La labor realizada en Cuba es seguida y reconocida en todo el mundo y sus trabajos son considerados básicos en el trabajo con la ozonoterapia. La Retinosis Pigmentaria fué una diana terapéutica para el ozono. Miles de pacientes de todo el mundo siguen acudiendo a Cuba para recibir tratamientos de ozono para su RP. Algunos desconocen que desde cerca de su residencia pueden recibir estos tratamientos. Así son las razones que justifican el tratamiento:

La Retinosis Pigmentaria es una afección grave de la retina dónde aparecen numerosos pigmentos en el fondo del ojo, de ahí su nombre de retinosis pigmentaria. Se lesionan las capas de la retina dónde están los bastones y los conos.

Los bastones permiten la visión nocturna o de baja iluminación y la periférica; los conos la diurna y la visión central. Al comenzar la enfermedad –a cualquier edad- primero se lesionan los bastones y más tarde, progresivamente, los conos. El campo visual se va reduciendo concéntricamente hasta llegar a ser tubular, como cuando se mira por el cañón de una escopeta, por último la pérdida de visión es total.

El daño a ésta células, bastones y conos, no se sabe exactamente porqué se produce pero sí existen diversas claves en la etiopatogenia de esta enfermedad:

1º La mayoría de los pacientes presentan alteración de las propiedades reológicas de la sangre. La velocidad sanguínea a ese nivel es menor y la presencia de hematíes en pilas o rouleaux de monedas es casi constante.

2º Como consecuencia de este enlentecimiento se produce una insuficiencia vascular ocular que trae como consecuencia un déficit de nutrición y fundamentalmente de oxigenación.

3º La presencia de la disminución de calibre de los vasos debida a la ateroesclerosis también es un hallazgo cuasi constante en los adultos afectos de RP.

A la luz de estos hallazgos las conclusiones de los investigadores del ozono de que la ozonoterapia pudiera ser el tratamiento más adecuado para frenar o combatir la enfermedad era cuestión de sentido común:

1º Todos los estudios, trabajos y experimentos demuestran que el ozono cumple todos los requisitos del medicamento ideal: seguro, eficaz, fácil de administrar, exento de efectos secundarios, mejor todavía : con efectos secundarios positivos.

2º El ozono aumenta la flexibilidad de las células sanguíneas rojas: los glóbulos rojos son más flexibles y pueden así pasar por los capilares más estrechos y sinuosos. La reología sanguínea se acelera, por consiguiente:

3º El aporte de oxigeno, transportado por la hemoglobina contenida en lo glóbulos rojos, se mejora y producto del aumento de la reología sanguínea también mejora la nutrición.

4º Los realeaux o formación de pilas de monedas son revertidas también por la acción del ozono al destruir los enlaces de unión entre hematíes.

5º El descenso de los niveles de colesterol está también constatado en los tratados con ozono y en diversos experimentos.

6º El ozono es antioxidante una vez ingresa en el organismo, por lo tanto inhibe la actuación de radicales libres al activar sistemas enzimáticos como la superóxido dismutasa, catalasa y glutatión.

7º Además es germicida (oxidante) e inmunomodulador.

Los efectos causales por un lado de la Retinosis Pigmentaria y los efectos terapéuticos del ozono abrieron una esperanza a la detención del proceso y así lo avalan los resultados: el 80 % de los pacientes tratados con ozono estabilizó la enfermedad y no progresa, el 15& mejoran y el ritmo evolutivo decrece notoriamente y el 5% no refiere mejoría.

Hoy en día se reconoce que no existe ninguna contraindicación, salvo el favismo, para el tratamiento con ozono. Que el ozono manejado por médicos expertos, que manejen las vías sistémicas a las concentraciones y dosis adecuadas, es un tratamiento eficaz y complementario a cualquier otro en al RETINOSIS PIGMENTARIA. Es lamentable  que todavía  la existencia de la ozonoterapia es desconocida para muchos oftalmologos y que sigan manifestando que no tiene tratamiento; algunas vitaminas, dicen, por decir algo y sin saber que dan las vitaminas por su actividad antioxidante, uno de los efectos del ozono precisamente. Si hay glaucoma operar el glaucoma, si cataratas las cataratas, etc. PUES SI, EXISTE ALGO QUE PUEDE AYUDAR: LA OZONOTERAPIA.

 

Ultima actualización (Viernes 02 de Abril de 2010 19:26)

 

 

Ozonoterapia en degeneración macular

Hospital Provincial Manuel Ascunce Domenech CAMAGÜEY

 Eficacia del ozono en la degeneración macular relacionada con la edad (Seca).

Autores: Dra. Alicia Alonso Garcia. * Dra. Íris Chávez Pardo ** Dra. Maritza Palma López *

* Especialista 1er Grado en Oftalmología. ** Especialista 2er Grado Oftalmología.

RESUMEN Se realizó un estudio descriptivo transversal, con el objetivo de evaluar la efectividad del ozono en pacientes con Degeneración Macular Relacionada con la Edad (DMRE) seca, atendidos en la consulta de retina del Hospital Provincial Manuel Ascunce Domenech de la provincia Camaguey, en el período comprendido desde octubre del 2005 hasta abril del 2006.

El universo de estudio en coincidencia con la muestra estuvo constituido por 50 pacientes que cumplirán los criterios establecidos de inclusión establecidos, a los que se les aplicó dos ciclos de 20 sesiones cada tres meses, vía rectal. En los resultados el sexo femenino (66%) y la raza blanca (52%) fueron de mayor incidencia. los síntomas mas frecuentes, la disminución de la agudeza visual la metamorfosia, que mejoraron en todos los pacientes después del tratamiento. Los factores de riesgo y ambientales que predominaron, fueron: la edad, hipertensión arterial y el hábito de fumar. Palabras clave: Degeneración Macular/ diagnostico. Ozonoterapia/ tratamiento Antioxidante/ terapéutica.

INTRODUCCIÓN

La degeneración macular senil (DMAE) es una entidad clínica frecuente. Desafortunadamente, llegar a este diagnóstico significa por lo general que el paciente este perdiendo en forma gradual e irreversible la agudeza visual central. Se caracteriza por lesiones degenerativas progresivas de la mácula, una pequeña área en el centro de la retina (1,2). Afecta a personas mayores de 50 años, aunque la incidencia se dispara a partir de los 70. Se estima que un 30% de la población comprendida en este grupo de edad tiene alguna forma de DMAE (3-4). Su patogénesis no esta claramente definida desde hace varios años se reconoció su origen multifactorial, se plantea una predisposición genética con la contribución de determinados factores ambientales aun no identificados con los que se desencadenan las lesiones celulares que consisten, básicamente, en cambios degenerativos en el epitelio pigmentario de la retina y la membrana de Bruch, que originan la aparición de drusas (5).

La degeneración macular se clasifica en dos tipos: seca (no-neovascular) y húmeda o con neo-vascularización coroidea (6-9). Aunque esta última es la menos frecuente, es la responsable de la mayor parte de las cegueras legales (visión inferior al 20%) que se producen en las personas mayores.

Se han identificado diferentes factores ambientales y de riesgo que parecen estar relacionados con la DMRE; factores genéticos, tóxicos y nutricionales, como su nombre lo indica, el primer factor de riesgo es la edad. El hecho de que afecte a algunos pacientes no especialmente mayores (a partir de los 50 años), se debe a que el envejecimiento de la retina en ellos va por delante; es decir, se desgasta o envejece de forma prematura, esto puede ocurrir por una predisposición genética ante la que no puede hacerse nada o por agresiones evitables como los factores ambientales como el tabaco, el segundo factor de riesgo, que genera neurotoxicidad al disminuir el aporte de oxígeno a los tejidos. La arteriosclerosis produce un engrosamiento de la membrana de Bruch en la DMAE. Diferentes estudios constataron que la arteriosclerosis y el tabaco unidos potencian su efecto neurodegenerativo (9). La hipertensión es otro factor que agrava el pronóstico de la enfermedad, que afecta especialmente a la raza caucásica, ya que cuanto más pigmentada es la persona, menor es el riesgo de padecer la enfermedad. Recientemente se habla de otros factores de riesgo como el color claro del iris (ojos azules), opacidades del cristalino, afaquia e hiperopia, exposición a la luz, exposición laboral a productos químicos y la obesidad. Los factores nutricionales, entre los que se encuentran los antioxidantes (que podrían proteger los conos, captando radicales libres y oxigeno libre) que han despertado mucho interés en la actualidad. Muchos autores explican la DMRE y las maculopatía como el resultado de un ataque foto-oxidativa, por lo que los nutrientes con propiedades antioxidantes han sido muy estudiados. Aunque el resultado de los estudios realizados no descarta un efecto de algunas sustancias como la vitamina A o los carotenoides vegetales, el tocoferol, la vitamina C y el zinc o selenio, tampoco se han encontrado efectos protectores significativos en la mayor parte de los estudios. (10). Desde hace varios años se ha tratado infructuosamente de individualizar algunos factores implicados en la patogénesis de esta enfermedad, con el propósito de poder ofrecer un mecanismo terapéutico apropiado.

La ozonoterapia está basada en los efectos benéficos del gas en el organismo que son muy variados. El ozono actúa como antioxidante; inmunomodulador, además a nivel de los glóbulos rojos se incrementa la liberación de oxígeno generando un mayor transporte de oxígeno a las células, mejorando la función celular y la circulación en general. La ozonoterapia se utiliza con mayor frecuencia en las situaciones en que la medicina alopática no encuentra los efectos deseados. La ozonoterapia no es una medicina alternativa, sino que es considerada una medicina natural. Los tratamientos son rápidos, eficaces y económicos. El ozono es un gas inestable que se descompone fácilmente a una velocidad que depende de la temperatura. Por eso, no deja residuos tóxicos ya que dentro del organismo se transforma en oxígeno. Es por todos los beneficios y ventajas anteriores que hemos empleado este método para el tratamiento en la degeneración macular senil, siendo el propósito de este trabajo evaluar su eficacia.

MÉTODO

Se realizó un estudio descriptivo trasversal con el objetivo de evaluar la efectividad del ozono como terapia antioxidante en pacientes con Degeneración Macular relacionada con la edad (seca) evaluados en la consulta de retina del Hospital Provincial Manuel Ascunce Domenech de Camagüey; en el periodo comprendido desde octubre del 2005 hasta abril del 2006. El universo de estudio en coincidencia con la muestra lo conformaron 50 pacientes, a los que se les aplicó ozono por vía rectal a razón de 200 ml y concentración de 40 mg/L, durante 20 sesiones en dos ciclos cada tres meses período en que no consumieron ningún otro tipo de medicamentos empleados tradicionalmente en esta enfermedad. En todos los casos los pacientes cumplieron con los criterios de inclusión y o exclusión establecidos en la investigación Para la recolección de los datos como fuente primaria se confeccionó un formulario según criterio de especialistas que incluyeron las siguientes variables:

• Factores de riesgo y ambientales
• Evaluación de síntomas y signos antes y después del tratamiento.

Los datos se procesaron de forma computarizada, presentándose en cuadros y gráficos para darle soporte al trabajo y poder evaluar la efectividad del ozono en pacientes con DMRE seca.

Criterios de inclusión:

• Pacientes con DMRE seca con afectación de la agudeza visual entre 0.3 y 0.8.
• Pacientes que mostraron conformidad al proponerle el método previo consentimiento informado.
• Pacientes que decidieron incorporarse al estudio y suspender todas las terapias anteriormente utilizadas.

Criterios de Exclusión:

• Pacientes con enfermedades hematológicas y trastornos de la coagulación.
• Pacientes que no estuvieron de acuerdo en participar en el estudio. Criterios de Salida del Estudio:
• Pacientes que incumplieron las normas establecidos en la investigación.
• Inasistencia a tratamiento por más de 5 ocasiones.
• Abandono por cualquier causa. Definiciones Operacionales: Ciclos de tratamiento: Cada ciclo consta de 20 sesiones y se repite a los 3 meses hasta completar 2 ciclos Evolución del paciente según los ciclos de tratamientos.
• Excelente: Todos los pacientes que incrementaron la agudeza visual en 0.3 dioptrias.
• Bueno: Aquellos pacientes en los que se incrementó la agudeza visual 0.2.dioptrias.
• Regular: En pacientes con incremento de la agudeza visual del 0.1.dioptrias.
• Mal: Pacientes en los que no se experimentó ningún incremento de la agudeza visual después del tratamiento.

Control semántico: Ozonoterapia: El método terapéutico donde se utiliza una mezcla de oxígeno-ozono, obtenida a través de una descarga eléctrica de alto voltaje y alta frecuencia; resultando un gas terapéutico que en concentraciones adecuadas produce cambios fisiológicos beneficiosos al organismo.

RESULTADOS

El cuadro 1 muestra la distribución según grupos de edades, donde existió un predominio de las edades comprendidas entre 50 y 70 años, con 29 casos para un 58% (Grafico 1).

En el cuadro 2 podemos apreciar como el sexo femenino predominó con 33 pacientes para un 66% (Gráfico 2).

En el cuadro 3 se recogen los resultados del comportamiento de la raza, el 52% del total representó la raza blanca, 14% la negra y 34% la mestiza (Gráfico 3).

En el cuadro 4 se aprecia que el 100% de los pacientes refirieron como síntoma fundamental la disminución de la agudeza visual, 14 para un 28% (Gráfico 4).

En el cuadro 5 se observa los factores ambientales y de riesgo de mayor incidencia en nuestro estudio, refirieron hábito de fumar 27 pacientes para un 54%, hipertensión arterial 12 para un 24%, 14 del total eran obeso lo que represento un 28%, ojos claros tenían solo 4 pacientes que representó el 8% y déficit nutricional 10 pacientes (Gráfico 5).

EN el cuadro 6 se muestra el comportamiento de la agudeza visual antes del tratamiento, del total de pacientes 11(22%) tenían una disminución de la agudeza visual entre 0.3 y 0.4 mientras 46 pacientes tenían una disminución entre 0.5 y o.6, en 14 pacientes la agudeza visual se comportaba entre 0.7 y 0.8 para un 28%.

De igual forma apreciamos la evaluación de los pacientes luego del tratamiento, excelente 30%, buena 44% y regular 26% (Gráficos 6 y 7).

DISCUSION

Nuestro estudio en coincidencia con la bibliografía estudiada, muestra mayor incidencia de la DMRE en pacientes mayores de 55 años aunque algunos autores plantean que puede verse un alza de esta enfermedad a partir de los 70 años (11). Corroboramos que el sexo femenino fue el mas afectado y a pesar de que no tenemos una explicación a ello si esta en correspondencia con lo planteado por otros autores (12 ). Es la raza blanca, con un total de 26 pacientes, la mayor incidencia lo que puede explicar el posible efecto nocivo de la luz en el epitelio pigmentario, de ahí que los pacientes con menor proporción de melanina son más sensibles a desarrollar DMRE seca. Se, observó que es la disminución de la AV el síntoma más frecuente, por el que acuden los pacientes, coincidiendo con otros autores (13) ,aunque algunos hablan de metamorfopsias, con una significación importante (14), no se mostró del todo así en nuestro trabajo donde solo el 28% la refirieron. Estudios de prestigiosos autores coinciden en que los factores ambientales y de riesgo ya sean de orden genético, nutricionales o tóxicos son trascendentalmente importantes en la aparición y progresión de esta enfermedad (15). En los resultados de nuestro trabajo fueron de mayor incidencia el mal hábito de fumar, la hipertensión arterial y la obesidad. En cuanto a la exposición a la luz a pesar de que no muchos pacientes la refieren como importante nosotros valoramos que las características de nuestro clima tropical y los cambios atmosféricos con el incremento progresivo de las temperaturas por la incidencia solar debido a el debilitamiento de la capa de ozono, no estamos exentos de las consecuencia a pesar de una relativa protección.

El ozono posee la propiedad de estimular determinados sistemas enzimáticos antioxidantes protectores contra la acción de los metabolitos del oxigeno. De esta forma, la ozonoterapia puede generar una relación dinámica entre la actividad perioxidante y la actividad antioxidante de defensa que genera el organismo, los cuales mantienen la estructura de la membrana y el metabolismo celular. Esto se ha podido demostrar tanto en modelos animales como en ensayos clínicos (16-17 ). Como se muestra en el Cuadro 6 que evalúa el comportamiento de la agudeza visual los pacientes objeto del estudio, tenían una afectación de la agudeza visual que variaba desde o.3 hasta 0.8 dioptría, luego de tratamiento con ozono, 15 pacientes evolucionaron de forma excelente, en 22 se incremento la agudeza visual hasta 0.2 dioptría, por lo que se consideró una buena evolución, el 13 pacientes la evolución fue regular. Todos los pacientes tuvieron algún incremento de la agudeza visual después del tratamiento. Nuestros resultados son muy satisfactorios y alentadores a pesar de que en la literatura revisada no encontramos trabajos similares para comparar los resultados.

CONCLUSIONES

Los grupos de edades estudiados mostraron, que las edades comprendidas entre 50 y 70 años fueron los más afectados, el sexo femenino y la raza blanca otros factores de riesgo igualmente importantes fueron el hábito de fumar, la Hipertensión Arterial y la obesidad, los síntomas mas referidos la disminución de la agudeza visual y la metamorfopsia, la evolución de la agudeza visual y la repercusión social de los pacientes, sin reacciones adversas nos da elementos para plantear la eficacia del ozono en la DMRE.

RECOMENDACIONES

Continuar trabajando en el uso de la ozonoterapia a pacientes con Degeneración Macular Relacionada con la Edad por los beneficios de esta terapia bioxidante, por su rápida recuperación e incorporación a la sociedad , bajo costo al paciente y aporte de una mejor calidad de vida.

BIBLIOGRAFIA

1) Algvere PV, Libert C, Lindgärde G, Seregard S. Transpupillary thermotherapy of predominantly occult choroidal neovascularization in age-related macular degeneration with 12 months follow-up. Acta Ophthalmologica Scandinavica, (2003), Vol. 81 Issue 2, p110-118 (ref.4)

2) M La Cour, JF Kiilgaard, MH Nissen. Age-Related Macular Degeneration Epidemiology and Optimal Treatment. Drugs Aging 2002; 19 (2): 101-133 (ref. 6)

3) Hooper CY, Guymer RH. New treatments in age-related macular degeneration. Clínicas & Experimental Ophthalmology, Oct2003, Vol. 31 Issue 5, p376-392 (ref.2).

4) E Weir: Age-related macular degeneration: armed against ARMD. Canad. M.A.J (2004) 170 (4): 463-464

5) Evans JR, Henshaw K. Antioxidant vitamin and mineral supplementation for preventing age-related macular degeneration. Cochrane Database Syst Rev 2000; 2:CD000253.

6) Dentchev T, Milam AH, Lee VM, Trojanowski JQ, Dunaief JL. Amyloid-beta is found in drusen from some age-related macular degeneration retinas, but not in drusen from normal retinas. Mol Vis 2003; 9: 184-190.

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8) Araiz Iribarren J. Triamcinolona intravítrea. Arch Soc Esp Oftalmol 2004; 79: 583-585.

9) Wormald R, Evans J, Smeeth L, HenshawK. Photodynamic therapy for neovascular age-related macular degeneration (Cochrane Review). Cochrane Database Syst Rev 2001; 3:CD002030.

10) Votruba M, Gregor Z. Neovascular age-related macular degeneration: present and future treatment options. Eye 2001; 15(Pt 3):424-9.

11) Sainz C. Estudio de la prevalencia degeneración macular asociada a la edad en una población navarra institucionalizada y su relación con los factores de riesgo conocidos [Tesis Doctoral].Pamplona: Universidad de Navarra; 2000

12) G Wolf, Lipofuscin and Macular Degeneration. Nutrition Reviews, Oct2003, Vol. 61 Issue 10, p342-352 (ref.3).

13) Fine SL, Berger JW, Maguire MG, Ho AC. Agerelated macular degeneration. N Engl J Med2000; 342(7):483-92.

14) Oneill C, Jamison J, McCulloch D, Smith D.Age-related macular degeneration: cost-of-illnessissues. Drugs Aging 2001; 18(4):233 – 41.

15) . Menendez de Lucas JA, Morcillo LaizR. Cuestiones Médicos-Legales sobre los fármacos Actualmente Empleados en el Tratamiento de la DMAE. Archivos de la Sociedad española de Oftalmología. N. º 7 – Julio 2006

16) Albers H., Kromhardt H.: « Zur Frage der therapeutischen Beeinflussung oxidativer Nachwirkungen im Zuge der HOT nach Wehrli ». F. Med. Clin., 55, 108, 1960.

17) Mattassi R.: « Ozonoterapia ». Organizzazione Editoriale Medico Farmaceutica, Milano, 1985.

 

Ultima actualización (Jueves 24 de Febrero de 2011 10:18)

Eficacia del uso de ozonoterapia, magnetismo y electroestimulación en pacientes con retinosis pigmentaria y glaucoma

ARTÍCULO ORIGINAL

Effectiveness of the ozone therapy, magnetism and electrostimulation in patients with pigmentary retinosis and glaucoma

MsC. Sarah María García Espinosa,¹ Dra. Rásife Freyre Luque,² MsC. Sonia Rafaela Fernández Pérez,³ MsC. Melek Dager Salomón⁴ y MsC. Idalmis García Mayet⁵

¹Especialista de II Grado en Oftalmología. Máster en Medicina Bioenergética y Naturalista Cuba. Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria, Santiago de Cuba, Cuba.
²Especialista de I Grado en Oftalmología. Instructora. Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria, Santiago de Cuba, Cuba.
³Especialista de II Grado en Oftalmología. Máster en Urgencias Médicas. Profesora Auxiliar. Hospital General Docente “Dr. Juan Bruno Zayas Alfonso”, Santiago de Cuba, Cuba.
⁴Especialista de I Grado en Genética. Máster en Atención Integral al Niño. Instructora. Hospital Infantil Sur, Santiago de Cuba, Cuba.
⁵Especialista de I Grado en Oftalmología y Medicina General Integral. Máster en Medicina Bioenergética y Naturalista. Instructora. Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria, Santiago de Cuba, Cuba.

 

RESUMEN

Se realizó un estudio de evaluación de la eficacia terapéutica en 21 pacientes con retinosis pigmentaria asociada a glaucoma, atendidos en la Clínica de Retinosis Pigmentaria de Santiago de Cuba desde mayo del 2008 hasta igual mes del 2009. Los valores de agudeza visual, campo visual y tomografía del nervio óptico permitieron medir la eficacia de los tratamientos con ozono, magnetismo y electroestimulación, al comparar los resultados de las cuantificaciones visuales obtenidos al mes con los efectuados antes de iniciar la terapéutica. Prevalecieron el glaucoma crónico de ángulo abierto y la retinosis típica de herencia autosómica recesiva, así como los procedimientos consistentes en trabeculectomía y cirugía revitalizadora temporal, respectivamente, con mejorías o estabilidad del cuadro clinico, confirmadas a través de las modificaciones en los parámetros luego de aplicada la triple terapia. Se produjeron cambios favorables en la mayoría de los integrantes de la casuística.

Palabras clave: retinosis pigmentaria, glaucoma, glaucoma crónico de ángulo abierto, retinosis típica con herencia autosómica recesiva, agudeza visual, campo visual, tomografía del nervio óptico, ozonoterapia, magnetismo, electroestimulación

ABSTRACT

A study of evaluation of the therapeutic effectiveness in 21 patients with pigmentary retinosis associated to glaucoma was carried out. They were assisted in the Pigmentary Retinosis Clinic of Santiago de Cuba from May, 2008 to May, 2009. The values of visual acuity, visual field and tomography of the optic nerve allowed to measure the effectiveness of the treatments with ozone, magnetism and electrostimulation, when comparing the results of the visual quantifications obtained within a month with those made before beginning the therapy. The chronic glaucoma of open angle and the typical retinosis of autosomal recessive inheritance prevailed, as well as procedures such as trabeculectomy and revitalizing temporary surgery, respectively, with improvements or stability of the clinical pattern, confirmed through the modifications in the parameters after having applied the triple therapy. Favorable changes took place in most of the members of the case material.

Key Words: pigmentary retinosis, glaucoma, chronic glaucoma of open angle, typical retinosis with autosomal recessive inheritance, visual acuity, visual field, tomography of the optic nerve, ozone therapy, magnetism, electrostimulation

INTRODUCCIÓN

La retinosis pigmentaria (RP) se incluye entre las enfermedades que causan grave discapacidad visual y es considerada como la cuarta causa de ceguera en el mundo.

Se denomina retinosis pigmentaria a un conjunto de degeneraciones progresivas, con gran heterogeneidad clínica, genética y evolutiva, que afecta en su forma primaria las funciones de los fotorreceptores y el epitelio pigmentario de la retina y, en su forma asociada, otros tejidos, órganos y sistemas, para constituir los llamados síndromes de carácter hereditario, los cuales comprenden todos los tipos de herencia mendeliana, la herencia mitocondrial y la mutación digénica.¹

El glaucoma, neuropatía óptica basada en diversos mecanismos como el aumento de la presión intraocular, la isquemia y la cascada de eventos químicos que producen lesión y muerte celular en las personas que poseen un mensaje genético establecido, constituye la segunda causa de ceguera irreversible.²

Son innumerables los planteamientos acerca de las etiopatogenias de ambas entidades clínicas. Algunos presentan variables en común como las teorías vascular y bioquímico-metabólica y de que la muerte de las células ganglionares podría relacionarse con la apoptosis. ^{3, 4} También existen similitudes en cuanto a las alteraciones del campo visual, la mala visión nocturna, la presencia de cataratas patológicas y a que las 2 enfermedades son hereditarias. Resulta ser mucho más amplia la herencia de RP que se muestra con todos los tipos de herencia mendeliana, además de la mitocondrial y la mutación digénica.^5,6

Según la línea de la escuela cubana, en los pacientes con retinosis pigmentaria se utiliza el tratamiento combinado o multiterapéutico que consta de medicamentos farmacológicos, ozono, magnetoterapia, electroestímulo y cirugía revitalizadora (CRV); esta última mejora en 10 % el campo visual de los pacientes, conjuntamente con las cirugías que se requieran para la compensación de la presión intraocular en los casos de glaucoma. Esto se ha demostrado mediante estudios complementarios: medición de la agudeza visual (AV) y de la presión intraocular (PIO), estudios del campo visual (CV) y tomografía del nervio óptico (HRT).⁶

La atención a los pacientes con retinosis pigmentaria y glaucoma está encaminada a tratar de conservar la visión y el campo visual que el paciente presenta en el momento de su diagnóstico y a reducir la presión intraocular a niveles en que la progresión de la enfermedad se detenga. Dicho efecto se puede llevar a cabo mediante tratamiento médico o quirúrgico.

No siempre se logra el resultado deseado y la asociación de estas 2 enfermedades puede ocasionar importantes repercusiones invalidantes en la visión (su evolución natural es hacia la ceguera), así como la irreversibilidad de los daños anatómicos y funcionales. Se cuenta con un tratamiento que puede enlentecer su evolución al combinar el uso de la terapia de base de estas entidades clínicas con la medicina alternativa necesaria para mantener estables las funciones visuales en los pacientes que presenten ambas afecciones. El objetivo de este estudio fue mostrar la repercusión de la ozonoterapia, los campos magnéticos y la electroestimulación, como tratamientos alternativos, en la asociación de la retinosis pigmentaria y el glaucoma.

MÉTODOS

Se realizó un estudio de evaluación de la eficacia terapéutica en 21 pacientes con retinosis pigmentaria asociada a glaucoma, atendidos en la Clínica de Retinosis Pigmentaria de Santiago de Cuba desde mayo del 2008 hasta igual mes del 2009. Se seleccionaron las variables socio-demográficas y clínicas. Se evaluó la eficacia del tratamiento mediante los siguientes parámetros visuales: agudeza visual (AV), campo visual (CV) y tomografía del nervio óptico (HRT).

Los datos necesarios fueron recolectados de las historias clínicas y encuestas, confeccionadas en forma de planillas, y guardados en una base de datos. Los estudios de agudeza visual, campo visual y HRT fueron realizados antes de comenzar la terapia y luego a los 15 días de concluida esta, es decir, al mes del primer examen de los parámetros visuales.

Se aplicó ozono diariamente durante 15 días, obtenido con el equipo Ozomed, por vía rectal mediante la introducción de una sonda fina a través del ano: 200 cm³ en adultos, programado el equipo a 3 L/min y 100 V a concentraciones de 42 mg/mL.

El magnetismo se usó directamente a los ojos con el equipo Geo-200. Esto se realizó diariamente por 10 días y durante 20 minutos. Los primeros 10 minutos, se aplicaron dosis de 40 Gauss de forma continua y los 10 minutos siguientes de 100 Gauss de forma discontinua.

La electroestimulación fue aplicada en las regiones cervical y plantar de los pacientes mediante el equipo estabilizador EQ-1604 con intensidades de corriente aceptadas de acuerdo a las características individuales de cada paciente, que oscilaron entre 20-70 miliamperes con un voltaje fijo de corriente sinusoidal de baja frecuencia (50-60 Hz) y por un período de 10 minutos. Esto se hizo diariamente durante 10 días.

Este triple tratamiento se efectuó de manera simultánea y se mantuvieron, además, los medicamentos indicados para el glaucoma en cada paciente.

RESULTADOS

Se tomó de la Escuela Cubana de la Retinosis Pigmentaria la clasificación de la enfermedad, según sus características, en típica, atípica y asociada y, en cuanto al tipo de herencia, en autosómica recesiva (AR), autosómica dominante (AD) y la no definida (ND), que fueron las que se presentaron en asociación con el glaucoma.

De 507 pacientes con retinosis pigmentaria, solo 21 (4,1 %) presentaban asociada una glaucomatosis. En la serie se evidenció un predominio del grupo etario de 41 a 60 años.

Teniendo en cuenta la Clasificación Cubana de Retinosis Pigmentaria, ⁷ en el estudio prevaleció la forma típica de esta enfermedad, con 57,1 % (tabla 1). Los tipos de glaucoma encontrados fueron el glaucoma primario de ángulo abierto (GPAA) y el glaucoma crónico de ángulo cerrado (GCAC) y de estos se observó una primacía del GPAA, con 61,9 %. No se encontraron otros tipos de glaucomas asociados a la retinosis pigmentaria.

En los pacientes con retinosis pigmentaria que tenían las herencias AR y ND, se presentó con mayor frecuencia el GPAA (tabla 2). A menudo el GPAA es hereditario, probablemente de forma multifactorial. En los que tenían herencia AD prevaleció el GCAC.

Les fueron aplicados diferentes tratamientos quirúrgicos a los 21 pacientes (tabla 3), teniendo en cuenta el estadio de la retinosis, la evolución del glaucoma y la compensación de la presión intraocular con tratamiento médico. Con ello se trataba de controlar y mejorar el estado ocular, que se encontraban en estado grave.

En los pacientes, antes de iniciar la triple terapia, la agudeza visual (AV) que predominó fue la de 0,0 a 0,3 (38,1 % en el ojo derecho y 47,6 % en el izquierdo. De las cirugías realizadas para el glaucoma, predominó la trabeculectomía (TBT) con 3 afectados.

Al realizar el examen de cada ojo por paciente y en cada uno de los grupos etarios, una vez concluida la terapia, se observó que en el grupo de 21-40 años hubo un incremento de la visión en 1 ojo izquierdo, que se incluyó en las comprendidas entre 0,4 y 0,6. En las agudezas visuales enmarcadas entre 0,4-0,6 en estas mismo grupo etario, se halló ascenso en la visión de 1 ojo derecho y 1 izquierdo a agudezas comprendidas entre 0,7 y la unidad de visión. En los pacientes con edades entre 41-60 años, que presentaban AV entre 0,0 y 0,3 antes de la terapia, la visión mejoró en 1 ojo derecho y 1 izquierdo, y pasaron a una visión entre 0,4 y 0,6. También en este mismo grupo etario, se encontró incremento de la visión en 1 ojo izquierdo que, del grupo de 0,4-0,6, aumentó a entre 0,7 y la unidad. En los pacientes con más de 60 años, no se constataron recuperaciones de la visión por ojos.

Cuando se compararon los resultados en porcentajes de las visiones en conjunto , se observó que el mayor porcentaje inicial, comentado anteriormente, fue encontrado en las visiones de 0-0,3 y luego de transcurridos 15 días del tratamiento con ozono, campos magnéticos y electroestimulación, cambiaron a visiones que oscilaron entre 0,4 y la unidad de visión, para representar 38,1 % en el ojo derecho (OD) y 42,9 % en el ojo izquierdo (OI). Dichos progresos tuvieron lugar en los pacientes con edades entre 21 y 60 años.

El aumento de la visión fue en algunos casos de la visión central y en otros a través de la apertura o ampliación de ventanas o lagunas de visión en su campo temporal gracias a las cuales los pacientes mejoraron su estado ocular.

La tabla 5 muestra los resultados relacionados con el campo visual de los pacientes después de aplicada esta terapia. En los afectados que tenían constricción de todas las isópteras, antes de iniciar el tratamiento, se suscitaron cambios (2 ojos derechos y 2 izquierdos) que abrieron ventanas temporales, lo cual constituye una ayuda para el desempeño social en personas que sólo tienen campos restringidos, centrales, pues les integra a su entorno social.

De los ojos que presentaban campos tubulares en el estudio campimétrico inicial, se abrieron ventanas temporales en 5 ojos derechos y 5 izquierdos. A su vez, otros 5 ojos derechos y 5 izquierdos, que tenían en la exploración anterior ventanas en sector temporal de su campo visual, mostraron ampliación de esas ventanas hasta en 5 y 10 grados por encima de su extensión preliminar, todo lo cual contribuyó a la orientación de los pacientes al trasladarse y en su vida, en general. Se observaron rehabilitaciones del CV en 57,1 % de los 42 ojos examinados.

Debido al deterioro tan marcado de las funciones visuales de estos pacientes, con 2 enfermedades tan invalidantes, existieron limitaciones en cuanto a la realización del HRT a todos, por fijaciones excéntricas o mala agudeza visual.

Como se ha detallado en el estudio, se realizó el análisis de cada ojo por separado en cada uno de los pacientes. Del total de ojos, solo se pudo explorar mediante el HRT, 7 derechos y 9 izquierdos.

De acuerdo con la valoración que realiza el programa del equipo HRT , se observó afectación por segmentos de la papila que pueden ser de daño establecido o de sospecha de daño, además de la anormalidad en las cifras de los parámetros. En la evaluación inicial de los pacientes, se encontró daño grave (cuando existió afectación de más de 3 segmentos) en 5 ojos derechos y 7 izquierdos, y moderado, 2 ojos derechos y 2 izquierdos (que son aquellos con menos de 3 segmentos dañados del nervio óptico, pero donde se encontró afectación en las cifras de los parámetros en los segmentos aparentemente normales).

Ese grupo se presentó con daño grave al inicio y al realizar la evaluación mediante el HRT, una vez efectuada la terapia, se observó que 2 ojos derechos y 2 izquierdos cambiaron a daño moderado (que se clasificaron como mejorados), mientras que 3 derechos y 5 izquierdos se incluyeron entre los estables, al mantenerse con las mismas afectaciones que antes de recibir la terapia.

Los ojos con daño moderado en su inicio (2 OD y 2 OI), fueron examinados una vez practicada la terapia y se encontró normalización de cifras de los parámetros estereométricos en el HRT, lo que llevó a declararlos como mejorados.

Un análisis exhaustivo de los resultados de la tomografía del nervio óptico para determinar la eficacia del tratamiento aplicado, reveló mejorías por ojo o estabilidad en 100,0 % de los examinados (7 OD y 9 OI) o ambas.

Al investigar los ojos que experimentaron alguna mejoría en cada paciente, con los exámenes de cambios en la agudeza, campo visual y análisis del daño del nervio óptico (HRT), se consideraron 8 pacientes como estables, para 38,0 % y 10 (48,0 %) como mejorados. Teniendo en cuenta que el pronóstico de la asociación de estas 2 enfermedades es la ceguera, el apreciar cambios no favorables en algunos de los parámetros visuales, no implica que los pacientes puedan ser considerados como empeorados sino como que siguieron el curso de la enfermedad. Se encontraron 3 pacientes (14,0 %) donde no existió empeoramiento, pero si se encontraban sus funciones visuales en los límites más graves desde el inicio y no hubo variación hacia mejoría una vez concluida la terapia.

Con esta terapia se lograron diversos cambios favorables en 38 ojos (sin tener en cuenta la estabilidad) de los diferentes parámetros visuales evaluados (AV, CV y HRT), lo cual representó 90,47 %. El comprender la gravedad de estas 2 entidades clínicas, que causan marcada discapacidad visual, hace reflexionar en la cifra obtenida después de aplicado esta terapia. Debe tenerse en cuenta cualquier tratamiento que beneficie alguna de las funciones visuales de estos pacientes, ya sea agudeza o campo visual o ambas; además debe existir constancia en su aplicación y el chequeo periódico de sus resultados, pues una sola sesión no muestra lo que podría resultar de la continuidad del tratamiento, tanto en estas enfermedades por separado, como asociadas.

DISCUSIÓN

La cantidad de pacientes con retinosis pigmentaria asociada al glaucoma fue de 4,1 % en la casuística. Estos resultados son similares a los referidos por otros autores, ^{3, 4} quienes plantean en los estudios que el porcentaje oscila entre 3,2 y 5,4 %.

En la serie predominó el glaucoma primario de ángulo abierto, lo que coincide con la bibliografía consultada, ^{3, 4} donde se plantea que este tipo de glaucoma es el más prevalente de todos y afecta aproximadamente a 1 de cada 200 personas de 40 años de edad; su prevalencia aumenta con la edad. Otras fuentes bibliográficas refieren que es el tipo más frecuente y llega a representar 60 % de esta entidad clínica. ^{2, 5, 6}

Se cree ⁶ que el gen responsable muestra una falta de penetrancia y variación en la expresividad en algunas familias. Se ha comprobado que la presión intraocular, el drenaje y el tamaño del disco óptico están genéticamente determinados. Sin embargo, en los que tenían herencia AD predominó el GCAC.

Se aplicó mayormente la cirugía revitalizadora temporal (CRVT) de la Escuela Cubana de Retinosis Pigmentaria, ^7-10fundamentada en la teoría vascular.

El aumento de la visión fue en algunos casos de la visión central y en otros a través de la apertura o ampliación de ventanas o lagunas de visión en su campo temporal gracias a las cuales los pacientes mejoraron su estado ocular.^5,11,12

Al valorar a estos pacientes integralmente, de acuerdo con las características individuales de la enfermedad en cada uno de ellos, se observó que se derivaron efectos de recuperación en la visión, los cuales son atribuibles a diversos mecanismos relacionados con las propiedades terapéuticas del ozono, los campos magnéticos y la electroestimulación, tales como: aumento del suministro de oxígeno a los tejidos oculares y de nutrientes que mejoran el trofismo de estos, así como a la activación del metabolismo celular, en especial del oxígeno por sus propiedades hemorreológicas, y estimulación de sistemas enzimáticos protectores contra procesos degenerativos.^13-16

Igualmente, otras de las propiedades de estas terapias se definen como mejoría de la microcirculación e hidrodinámica ocular, en especial el sistema de drenaje en el glaucoma, y facilitar la recuperación funcional nerviosa, al menos parcialmente. Esto también está relacionado con sus efectos en regulación de la síntesis con aumento de su concentración y degradación del ATP, también llamada molécula de la vida por proporcionar energía, en este caso, fundamentalmente en las estructuras oculares mejorando sus funciones. También se plantea el efecto de estas terapias sobre la foto-transducción, es decir, la despolarización y repolarización de los fotorreceptores o células visuales, al favorecer la remodelación de las estas.^17-20

Se pudo constatar además, que los cambios que se alcanzan con estos procedimientos de rehabilitación son hacer efectivas y estimular las capacidades adaptativas del sistema nervioso central conocida como neuroplasticidad, por medio de la cual se disminuyen los efectos de lesiones, en este caso del nervio óptico y las células fotorreceptoras, al inducir a cambios que modifican su estructura y función, tanto en el medio interno como en el externo. Los cambios plásticos ocurren a cualquier edad y las ganancias funcionales continúan por años después de la lesión. No obstante, debe tenerse en cuenta que la estimulación de estas propiedades y mecanismos debe realizarse de forma sistemática con la aplicación de terapias tales como el ozono, campos magnéticos y electroestímulo, entre otras.

La afectación del campo visual en los estudios iniciales se presentó como constricción de todas las isópteras hasta reducción del campo entre 10 y 5 grados y en otros casos con sólo visión residual temporal, como es planteado por otros autores.^5,11

El desarrollo de las técnicas de exploración imagenológica ha constituido uno de los elementos de mayor progreso en el diagnóstico médico en los últimos años, entre estas técnicas se encuentra el HRT II o láser confocal de barrido que permite estudiar el nervio óptico y analizar el anillo neurorretiniano y la excavación papilar. También facilita datos sobre el espesor y la sección de la capa de fibras nerviosas, construye imágenes tridimensionales mediante un barrido láser de la retina posterior centrada por el nervio óptico, no obstante posee varios criterios de exclusión: defectos refractivos de más de 12 dioptrías, presencia de nistagmus, forias y todo tipo de trastornos de la motilidad ocular, además de fijaciones excéntricas.

En este contexto la valoración de la papila mediante una tomografía papilar realizada por el HRT-II ha demostrado en numerosos estudios ser útil en el diagnóstico de estos cambios estructurales.

La rehabilitación en sus estadios iniciales tiene como ventajas que evita el deterioro de la función visual y permite incorporar al hombre a sus actividades sociales y laborales, si se tiene en cuenta que estas enfermedades afectan al individuo en etapas de la vida donde está en plenas capacidades física e intelectual.

Su aplicación en estadios avanzados de la enfermedad mejora la calidad de vida del ser humano (en Cuba, la esperanza de vida alcanza ya los 76 años) y permite en un alto porcentaje, su reincorporación a la vida social activa. La eficacia de esta triple terapia en la asociación de estas 2 entidades clínicas tan riesgosas desde el punto de vista visual, se ve reflejada en la mejoría o estabilidad de cualquiera de los parámetros visuales y aunque estos cambios aparentemente no sean de gran envergadura, si son considerados de gran repercusión para las personas que padecen estas enfermedades.

El empleo de técnicas de medicina natural y tradicional como el ozono, los campos magnéticos y el electroestímulo, constituye una terapia eficaz complementaria en la rehabilitación visual de los pacientes con asociación de retinosis pigmentaria y glaucoma.

La aplicación de esta triple terapia en la retinosis pigmentaria constituye una norma, por lo que se recomienda que su uso sea generalizado y establecido en el tratamiento habitual del glaucoma.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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11. Vidal Fernández A, González Hernández M, García Sánchez J. Primeros hallazgos en perimetría en pacientes hipertensos oculares. Arch Soc Esp Oftalmol 2004; 77:321-6.
12. González de la Rosa M, Abreu M, Pareja Ríos A. Clasificación topográfica del campo visual glaucomatoso. Arch Soc Esp Oftalmol 2004; 81:87-95.
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    <http://www-rayos.medicina.uma.es/rmf/radiobiologia/revista/Numeros/RB4(2004)89-93.pdf
    > [consulta: 18 diciembre 2009].
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20. Lai H, Singh NP. Magnetic-field-induced DNA strand breaks in brain cells of the rat. Environ Health Perspect 2004;112(6):687-94.

Recibido: 21 de diciembre de 2009
Aprobado: 26 de enero de 2010

MsC. Sarah María García Espinosa. Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria, Centro Gallego No.5, Ampliación de Terrazas, reparto Vista Alegre, Santiago de Cuba, Cuba.
Dirección electrónica:  MsC. Sarah María García Espinosa

Ultima actualización (Viernes 20 de Abril de 2012 17:44)

 

 

Osteoporosis y ozono

COMPORTAMIENTO CLÍNICO DE LA OSTEOPOROSIS DURANTE EL TRATAMIENTO DE OZONO. CENTRO PROVINCIAL DE RETINOSIS PIGMENTARIA. 2006.

CAMAGUEY.

 

 

AUTORES:  Lic. Eulalia Recio del Pino

                     Lic. Iraida Cuesta Guerra.

                     Lic. Cristina Harris Ramírez.                     

                     Dra. Yadira Betancourt Camargo.

                     Dra. Maritza Palma López

                      Dra. Yolanda Mapolon  Arcendor.

 

 

RESUMEN:

 

Las terapias bioxidantes aceleran el metabolismo del oxígeno, estimulan la liberación de los átomos desde la corriente sanguínea hasta  las células, teniendo propiedades analgésicas, antinflamatorias e inmunomodulador, entre otras. Se realizó un estudio cuasis experimental con el objetivo de conocer el comportamiento clínico de la osteoporosis durante el tratamiento de ozono en  el  centro Provincial de Retinosis Pigmentaria, Camagüey de Enero – Junio 2006. El universo: 53 pacientes, la muestra 50 casos que cumplían los criterios de inclusión: pacientes con osteoporosis, aquellos que estuvieron de acuerdo en participar en el estudio previo consentimiento informado y que decidieron incorporarse al estudio suspendiendo o eliminando las terapias anteriormente utilizadas. Se les aplicó ozono por vía rectal 20 sesiones en 2 ciclos al año. El dato primario es del registro control, confeccionando  un formulario como dato secundario que incluye las siguientes variables: grupos etáreos y sexo, evaluación de signos y síntomas, distribución según ocupación, evolución clínica según ciclos, variación del tratamiento medicamentoso y repercusión social y económica. Los datos se procesaron con ayuda de una computadora Pentium 5, presentándose en  cuadros y gráficos para darle soporte al trabajo. Las edades predominantes: 31-40 y + 41 años con 16 (32%) y 21 (42%) respectivamente, el síntoma principal el dolor los 50 (100%), la ocupación: los trabajadores: 42 (84%), a las 20 sesiones habían mejorado 38 (76%), los 50 (100%) disminuyeron la dosis de medicamentos. Los pacientes se incorporaron en menor tiempo a la sociedad mejorando su estado Bio-psico-social con un ahorro de $ 5550.00.

 

 

Palabras clave:

 

–          Ozono. Bioxidantes. Pacientes. Osteoporosis.

 

 

 

INTRODUCCIÓN:

 

Con  el correr de los tiempos el hombre con su afán de conocimientos y de aplicación a las nuevas investigaciones modificó la estructura molecular del oxígeno transformándola en trivalente (O3), el cual es una variedad alotrópica del oxígeno cuya existencia fue reportada en 1785, por el químico   Holandés M. Van Marum, en 1840 otro químico la identifica por primera vez como ozono, en 1912 David la utilizó para tratar las peritonitis tuberculosa, Wolf en la potabilización de las aguas y desinfección de las heridas en la guerra y en 1972 se comienza ha usar en nuestro país hasta la actualidad. (1-2).

 

Las terapias bioxidantes aceleran el metabolismo del oxígeno y estimulan la liberación de los átomos del mismo, desde la corriente sanguínea hasta las células; cuando se incrementan estos niveles disminuyen el potencial de enfermedades, por lo que fluyen grandes cantidades de oxígeno dentro del cuerpo, al mismo tiempo las células sanas no solo sobreviven, sino que además son capaces de multiplicarse; como resultado se logra un sistema inmunológico  general mejor, (3-5).  El ozono es muy tóxico en su estado puro (vía inhalatoria ) pero se ha demostrado y comprobado que es seguro y efectivo cuando está diluido al nivel terapéutico para su uso médico siendo un modulador biológico del estrés oxidativo cuando su administración es a dosis y concentración adecuada, ésta no es una medicina alternativa sino que es considerada  como una medicina natural, la cual, sobre la base de todos los conocimientos que requiere la aplicación del gas, instrumenta los tratamientos con ozono, independientemente de la utilización de otros fármacos específicos. Desde este punto de vista no tiene consecuencias colaterales con otros tratamientos, no compite, sino que es aleatorio a cualquier otra aplicación médica (6-7).

 

La osteoporosis es un estado de reducción de la masa ósea por unidad de volumen, con un cociente normal de mineral a matriz. La edad, la raza y el sexo influyen notablemente en la masa esquelética. Un individuo padece la enfermedad si su masa esquelética es significativamente inferior al valor normal particular (8).

 

La etiología puede ser múltiples entre las que se encuentran:

1-    Causa desconocida o idiopática:

• Primaria (senil, post menopausia).
• Juvenil (2-3 años antes de la pubertad).

2-    Anomalías endocrinas:

• Exceso de glucocorticoides (enfermedad de cushing)
• Tirotoxicosis.
• Diabetes mellitus.
• Hipogonadismo (síndrome de Turner).

3-    Neoplasias:

• Mieloma múltiple.
• Leucemia.
• Linfoma.

4-    Inmovilización.

5-    Anomalías congénitas en la síntesis de colágeno óseo:

• Homocistenuria.
• Síndrome de Ehler- Danlos.
• Osteogénesis imperfecta.

6-  Heparinoterapia.

Los factores responsables en la osteoporosis ideopática no han sido hasta la fecha identificados, combinándose múltiples factores para desencadenar la enfermedad (9-10).

Por los beneficios descritos anteriormente de las terapias bioxidantes nos trazamos la siguiente hipótesis:

¿ La ozonoterapia es efectiva en la osteoporosis?

Por tanto nos motivamos a conocer el comportamiento clínico de la osteoporosis durante el tratamiento de ozono, identificar la incidencia según grupos etáreos y sexo, evaluar signos y síntomas, determinar ocupación, valorar evolución clínica y variación del tratamiento medicamentoso y demostrar su efecto social y económico.

METODO:

Se realizó un estudio cuasis experimental con el objetivo  de conocer el comportamiento clínico de la osteoporosis durante el tratamiento de ozono en el        Centro  Provincial  de Retinosis Pigmentaria Dr. “Orfilio Peláez Molina” de Camagüey en el período comprendido de Enero – Junio 2006, se tuvo en cuenta un grupo estudio con 50 pacientes que cumplían con los criterios de inclusión y que llevaban tratamiento convencional sin lograr mejoría de sus síntomas, procedentes de las consultas de ortopedia, Medicina interna y endocrinología de las distintas áreas de salud de la provincia. Al grupo estudio se les aplicó el ozono por vía rectal 200 mg/L a un flujo de 1 litro, voltaje de 100 y concentración de 40 mg/L, durante 20 sesiones en ciclos de 1-2 veces al año, dependiendo de la evolución general del paciente.

Para la recolección de los datos como fuente primaria es del registro control confeccionándose un formulario según criterio de especialistas que incluyeron las siguientes variables como dato secundario:

1-    Edad y sexo.

2-    Evaluación de síntomas y signos.

3-    Distribución según ocupación.

4-    Evolución clínica.

5-    Variación del tratamiento medicamentoso.

6-    Repercusión social y económica.

Los datos se procesaron con ayuda de una computadora Pentium 5, presentándose en cuadros y gráficos para darle soporte al trabajo.

CRITERIOS DE INCLUSIÓN:

• Pacientes con osteoporosis (causa 1).
• Aquellos que estuvieron de acuerdo en participar en el estudio previo consentimiento informado.
• Todo paciente que decidió incorporarse al estudio y suspender todas  las

Terapias anteriormente utilizadas.

CRITERIOS DE EXCLUSIÓN:

• Pacientes con enfermedades hematológicas y trastorno de la coagulación.
• Aquellos que no estuvieron de acuerdo en participar en el estudio.

CRITERIOS DE SALIDA DEL ESTUDIO:

• Pacientes que no cumplieron los requerimientos del estudio.
• Inasistencia a tratamiento por más de 2 ocasiones.
• Fallecimiento del paciente.

DEFINICIONES OPERACIONALES:

• Ciclos  de tratamiento: Cada ciclo consta de 20 sesiones y se repite cada 6

Meses mientras el paciente presente síntomas y signos propios de la enfermedad.

• Evaluación del paciente según los ciclos de tratamientos.

–          Mejorado: Todos los pacientes que eliminen los síntomas y signos con que comenzaron el tratamiento.

–          Discreta mejoría: Aquellos casos que disminuyen o eliminan algunos de los síntomas pero aún persisten otros.

–          Igual: Mantienen  los síntomas o signos igual que al comenzar el tratamiento sin referir cambio alguno en los síntomas y signos con respecto al cuadro inicial.

CONTROL SEMÁNTICO:

• Osteoporosis: Formación de espacios anormales en el hueso (poros) o la descalcificación de sus conductos.
• Ozonoterapia: Mezcla oxígeno- ozono a través de una descarga eléctrica

De alto voltaje y alta frecuencia, produce un gas terapéutico que con concentraciones adecuadas produce cambios beneficiosos al organismo.

RESULTADOS:

• Cuadro y gráfico 1: Los  grupos etáreos con mayor predominio fueron las

Edades entre 31-40 años 16 (32%) y 41 años 21 (42%) y el sexo femenino con 31 (62%).

• Cuadro y gráfico 2:El dolor fue el síntoma más significativo con 50 (100%).
• Cuadro y gráfico 3:Los trabajadores fueron los de mayor  incidencia 42 (84%) .
• Cuadro y gráfico 4:A las 20 sesiones 38 casos (76%) habían mejorado.
• Cuadro y gráfico 5:Los 50 pacientes  (100%) disminuyeron la dosis de medicamentos.
• Cuadro 6:El costo de los medicamentos al iniciar el tratamiento se elevó a

$ 6 800.00, Partiendo de la cantidad de medicamentos que tienen que tomar, su prolongado uso y elevado costo. El costo del ozono es $ 1250.00, reportándose un ahorro de $ 5550.00.

DISCUSIÓN:

El cuadro 1 coincide con la bibliografía estudiada, donde el mayor  porciento de pacientes con osteoporosis corresponde al sexo femenino precedido en estas a la menopausia acelerándose tras la misma por el déficit  de estrógenos  (11-12).

El dolor agudo sobre la región afectada se produce fundamentalmente por fracturas  por aplastamiento vertebral (sin producirse a veces traumatismos), ejercicios prolongados ó exceso de peso (coincidiendo con Jowsey y Offord)

Página 357 (13-14).

Al analizar la ocupación los trabajadores están más expuestos a factores predisponentes: genéticos y dietéticos por su actividad cotidiana (15).

En la evolución clínica los pacientes con tratamiento de ozono mejoran ya que aumenta la oxigenación a los tejidos dañados (hueso), es inmunomodulador, por tanto disminuye el potencial de enfermedades, es antinflamatorio y se puede administrar aleatorio a cualquier otra terapia potencializando su acción  (guardando relación con otros autores)(16-17), y al tener esas propiedades disminuye el consumo de medicamentos (18).

Repercusión social y económica:

Como efecto social podemos decir que pacientes que estaban limitados por esta afección sin poder acudir al trabajo evolucionaron en menor tiempo, mejorando su esfera psíquica, eliminando o disminuyendo el consumo de medicamentos sin llegar a producirse fracturas en los casos estudiados, logrando recuperar la función de la masa ósea, llegando a la conclusión que el ozono desde el punto de vista Bio-psico-social aumenta la calidad de vida en sentido general de cada enfermo, por lo que podemos plantear que constituye una alternativa viable en las condiciones actuales de la economía

de nuestro país.

RECOMENDACIONES:

• Continuar trabajando en el uso de la ozonoterapia en pacientes con osteoporosis  por los beneficios de esta terapia Bioxidantes, por su rápida recuperación e incorporación a la sociedad, bajo costo al paciente y aporte de una mejor calidad de vida.
• Explicar a cada paciente la ingestión de calcio dietético superior a 1 gramo por día y prevención de las fracturas.

Ozonoterapia en Traumatología

Sobre la discólisis con ozono

El tratar las hernias discales de cualquier tipo realizando ozonoterapia intradiscal es una moda peligrosa, en absoluto recomendable y que puede producir muchísimos y graves efectos secundarios (discólisis entre otros). Además de encarecer innecesariamente, el tratamiento: quirófano, sedación, anestesista, …

Por qué se permite?. Lo ignoro. Supongo que será un intento de convertir el uso de ozono médico en un terreno “acotado” para ciertos especialistas.

Lo cierto y verdad es que esta moda de la discólisis con ozono no ha conseguido acercarse, ni de lejos, a la técnica más sencilla y muchísimo más efectiva de las infiltraciones paravertebrales. Y por supuesto, carente de efectos secundarios indeseables.

Lo único que se precisa para hacer bien una tratamiento de hernia discal con ozono es:

– saber qué es lo que haces.

– saber determinar donde debes hacer las infiltraciones (conocer “algo” de anatomía de espalda).

– estar entranado en el uso de ozono.

Dr. Calabuig Díaz

Ultima actualización (Jueves 24 de Febrero de 2011 10:39)

Discolisis o paravertebrales con Ozono

Discolisis o Paravertebrales con oxígeno – ozono

Juan Carlos Pérez Olmedo

La discolisis es una técnica que no representa ninguna ventaja para el tratamiento de la hernia discal comparada con la paravertebral asociada a ozonoterapia por vía sanguíniea o rectal. No existe ningún trabajo que demuestre esta ventaja.

Por otro lado, la ozonoterapia es una terapia dosis acumulativa que alcanza su mejor efecto a través de la estimulación periódica del organismo, por eso se plantean los tratamientos en ciclos de 15 o 20 sesiones, con una frecuencia miníma de dos veces por semana. Una sesión o dos de discolisis han demostrado su ineficacia en un porcentaje elevado de pacientes y así nos encontramos ya con que hay quien realiza un pretratamiento con 4 sesiones paravertebrales y otras cuatro seciones paravertebrales post discolisis con ozono, otros hacen menos y otros incluso más, pero siempre la discolisis por el medio. Todos aquellos que practicamos ozono sabemos que muchas veces nos encontramos que la primera sesión de paravertebrales arroja resultados sorprendentes, incluso con desaparición de la clínica dolorosa, lo normal es que entre la 4ª y 7ª el paciente experimente una frnca mejoría, pero es posible que no sea así y se precisen más sesiones, incluo más de 15 o de 20 o de 30. Personalmente creo que el ozono funciona con todos y que es cuestión de sesiones. Hemos tenido pacientes a los que les han hecho discolisis y no les ha funcionado y sin embargo la programación de un cilco de sesiones paravertebral asociado a vía sistémica si ha resultado. Lo cierto es que es falso que la mezcla de oxígeno-ozono sea capaz de eliminar una hernia discal, a lo sumo es posible que reduzca su volumen, pero este hecho también puede darse sin tratamiento, tampoco la discolisis no hará desaparecer la hernia discal. El problema de fondo, el que provoca dolor local y radicular, es el fenómeno inflamatorio que abarca a los tejidos vecinos a la hernia discal, es posible que sustancias que libera el disco herniado favorezcan esta inflamación, por ejemplo, el TNF alfa, además, como en cualquier proceso inflamatorio la zona se ve comprometida en su oxigenación, existen fenómenos oxidativos a ese nivel, alteración de la homeostasis de las citocinas y alteraciones inmunológicas, también existe un compromiso nutritivo para el disco. El ozono logra eliminar el proceso inflamatorio activando todo un complejo de sistemas como son el aumentar la transferencia de oxígeno, activar citocina anti-inflamatorias, sistemas antioxidantes y modular una respuesta inmunológica, todo ello lleva una mejor homeostasis de la zona inflamada, mejorar la nutrición del disco al mejorar las propiedades reológicas sanguíneas, etc. Todo este conglomerado de acciones no se realizan de un día para otro o de un momento para otro, como cuando se administra un analgésico o un anestesico, sino que más bien sucede como cuando administramos un SYSADOA o un antidepresivo, es decir dando tiempo a que el organismo, estimulado por el ozono, active mecanismos y sistemas que logran eliminar el proceso inflamatorio. El tratamiento es definitivo y el paciente pasará a formar parte del 70% o 75% de la población normal que es portadora de una hernia discal y realiza vida absolutamente normal, es decir se ha solucionado su problema, el proceso inflamatorio, que es que hay que combatir, y persistirá su hernia que por otro lado, no tiene poprque provocarle mayor limitación que si se hubiera sometido a una intervención quirurgica o a cualquier otro procedimiento. En nuestra experiencia, aquellos pacientes que han tenido una recaída, si acuden en las primeras 24 a 72 horas, bastará una o dos sesiones para resolver el problema. El tratamiento con ozono no es ninguna vacuna pero sí es un tratamiento resolutivo para cualquier proceso inflamatorio, sobretodo si es agudo.

La discolisis es un técnica inncesaria, no porque no funcione, sino porque es inferior en resultado a la técnica paravertebral, es inferior en costo, y lo más fundamental es inferior en riesgo. La técnica paravertebral no tiene ningún riesgo, ninguna contraindicación. ¿Porqué se debe anestesiar – sedar, utilizar radioscopia, un quirofano e introducir un aguja en una zona, el disco, cuando es innecesario? ¿Cuál es el interés?. Acaso creen algunos que el tratamiento de la patologia dolorosa de la columna pertenece exclusivamente al especialista y hay que marcar distancias.

Sí al ozono han llegado eventos adversos graves han sido traídos de la mano de la discolisis. A continuación algunos ejemplos.

1. Spine (Phila Pa 1976). 2007 Feb 1;32(3):E121-3.

Fulminating septicemia secondary to oxygen-ozone therapy for lumbar disc
herniation: case report.

Gazzeri R, Galarza M, Neroni M, Esposito S, Alfieri A.

Department of Neurosurgery, Ospedale San Giovanni Addolorata, Rome, Italy.

Comment in:
Spine (Phila Pa 1976). 2007 Aug 15;32(18):2036-7; author reply 2037.

STUDY DESIGN: A case report and clinical discussion.

OBJECTIVE: To describe a rare but fatal complication secondary to oxygen-ozone therapy for the treatment of herniated lumbar disc.

SUMMARY OF BACKGROUND DATA: Previously reported complications secondary to oxygen-ozone therapy are rarely reported. Septic discitis and epidural abscesses have been reported after myelography, lumbar puncture, paravertebral injections, epidural anesthesia, acupuncture, and
intradiscal therapy with chymopapain. We report the first case of a local infection with systemic fatal dissemination secondary to this treatment.

METHODS: A 57-year-old man previously treated with oxygen-ozone therapy presented low back
and bilateral pain. The lumbar computed tomography revealed the presence of L4-L5 and L5-S1 herniated discs. RESULTS: Three days after admission in the hospital, the patient developed a fulminant septicemia. An abdominal-pelvic and chest computed tomography and blood culture led to the diagnosis of pyogenic lumbar muscle involvement, accompanied with septic pulmonary embolism secondary to Escherichia coli infection.

CONCLUSIONS: This case report identifies a rare and  fatal complication of oxygen-ozone therapy in the treatment of a herniated lumbar disc. Acute fatal septicemia should be considered among the major complications of the oxygen-ozone therapy in the treatment of a herniated lumbar disc.

PMID: 17268255 [PubMed – indexed for MEDLINE]

1. Am J Ophthalmol. 2004 Jul;138(1):175-7.

Acute bilateral vitreo-retinal hemorrhages following oxygen-ozone therapy for lumbar disk herniation.

Lo Giudice G, Valdi F, Gismondi M, Prosdocimo G, de Belvis V.

Department of Ophthalmology, University of Padua, Via Giustiniani 2, 35100 Padua, Italy. gvofta@libero.it

PURPOSE: To describe a case of acute bilateral intraocular hemorrhages occurring after injection of oxygen-ozone (O(2)O(3)) mixture.

DESIGN: Observational case report.

METHODS: A 45-year-old woman complained about acute bilateral visual loss after intradiscal and periganglionic injection of gas mixture (O(2)O(3)) for lumbar disk herniation. Detailed phthalmologic examination; magnetic resonance imaging (MRI) of brain and spinal cord; and neodymium:yttrium-aluminum-garnet (Nd:YAG) laser membranotomy in the left eye was performed.

RESULTS:
Ophthalmoscopy revealed a premacular hemorrhage involving the left macula. In the right eye multiple, flat, retinal hemorrhages around the optic disk and the posterior pole were observed. The MRI scan for intracranial hemorrhage was unremarkable. Drainage of the left premacular hemorrhage by pulsed Nd:YAG laser was obtained a few weeks later.

CONCLUSIONS: Retinal hemorrhages seem to be an uncommon but significant complication of intradiscal O(2)O(3) infiltration, and we suggest that it should be carefully considered when recommending this procedure.

PMID: 15234314 [PubMed – indexed for MEDLINE]

1. Surg Neurol. 2006 Dec;66(6):619-20; discussion 620-1.

Ventral and dorsal root injury after oxygen-ozone therapy for lumbar disk  Herniation.

Ginanneschi F, Cervelli C, Milani P, Rossi A.

Department of Neurological and Behavioral Sciences, Unit of Clinical
Neurophysiology, University of Siena, 53100 Siena, Italy. ginanneschi@unisi.it

BACKGROUND: O2O3 therapy has become a largely diffused treatment for lumbar disk
herniation; this procedure is considered generally risk-free.

CASE DESCRIPTION: We report a case of ventral and dorsal root injury occurring after transcutaneous intradiscal infiltration of O2O3 for L4-L5 disk herniation.

CONCLUSIONS: Until randomized controlled trials on efficacy and short-term safety have been carried out, we think that physicians should be informed about the risk of potential  complications when recommending this procedure.

PMID: 17145327 [PubMed – indexed for MEDLINE]

1. Spine (Phila Pa 1976). 2009 Apr 15;34(8):E298-304.

A pyogenic discitis at c3-c4 with associated ventral epidural abscess involving c1-c4 after intradiscal oxygen-ozone chemonucleolysis: a case report.

Bo W, Longyi C, Jian T, Guangfu H, Hailong F, Weidong L, Haibin T.

Department of Neurosurgery, Sichuan Provincial People’s Hospital, Sichuan
Province, People’s Republic of China.

STUDY DESIGN: A case report and clinical discussion. OBJECTIVE: To describe an unique case of purulent discitis at C3-C4 and an anterior C1-C4 epidural abscess secondary to oxygen-ozone therapy for the herniated cervical discs.

SUMMARY OF BACKGROUND DATA: Previously reported complications secondary to ozone therapy are rarely documented. No cases of pyogenic discitis with associated epidural abscess after oxygen-ozone therapy have been reported to date. To our knowledge, this is the first such case reported in literature.

METHODS: A 57-year-old female patient with nuchal stiffness was previously treated with ozone therapy at the discs of C3-C4, C4-C5, and C6-C7. Five days later, she presented with an attack of neck pain and fever followed by progressive quadriplegia with sudden onset of dyspnea and was referred to our hospital. On admission, physical examination revealed a temperature of 38.8 degrees C, evident neck tenderness, marked global weakness (grade 1-2/5 MRC) in bilateral upper-limb, and a modest global weakness in bilateral lower-limb (grade 4/5 MRC). Laboratory findings showed a significantly elevated WCC, ESR, and CRP. Blood culture was negative. Enhanced-MR imaging demonstrated a purulent discitis at C3-C4 and a ventral C1-C4 epidural abscess with homogenous enhancement indicative of a solid phlegmonous granulation tissue.

RESULTS: We formulated a 3-stage treatment involving C1-C4 multilevel decompressive laminectomies, subtotal unilateral C3-C4 facetectomies, and tissue sampling for culture with application of a corset after surgery, followed by a delayed secondary posterior thorough drainage of epidural liquid pus using a suction-irrigation drainage, after the abscess had turned to a necrotic liquid abscess, on the basis of findings of enhanced-MR imaging, by 10-day duration of
intravenously antibiotic therapy tailored to Streptococcus bovis isolated from  infected tissue. Over the next few weeks, the patient made an excellent neurologic recovery. However, she did not consent to undergo further occipitocervical fusion until the follow-up MR imaging at 8 months demonstrated postlaminectomy kyphosis. After surgery, the patient remained clinically satisfactory in neurology without evidence of a recurrence of spinal infection. A slight improvement in the cervical spine curve was demonstrated in the follow-up radiograph at nearly 4-month postoccipitocervical fusion.

CONCLUSION: This case report illustrates a rare but life-threatening complication of oxygen-ozone
therapy for the cervical disc herniation. Infection is a common risk for any invasive spinal techniques involving puncture, so attention should be paid to the sterility during the procedures. A high index of suspicion along with reliance on enhanced-MRI is essential to diagnose the condition and institute appropriate treatment on an individual basis.

PMID: 19365239 [PubMed – indexed for MEDLINE]

DEFENSOR del PACIENTE

C/ Carlos Domingo nº 5 – 28047 Madrid

Tf./Fax: 91 465 33 22 – 629 208 643

defensorpaciente@telefonica.net

www.negligenciasmedicas.com

Jueves, 10 de Diciembre de 2009

COMUNICADO: Un Juzgado de Madrid homologa acuerdo indemnizatorio de 180.000 Euros para una paciente, vecina de Conil (Cádiz), por motivo de la infección hospitalaria que adquirió en quirófano del Hospital Ruber Internacional durante una operación de Ozonoterapia.

Informamos que el Juzgado de Primera Instancia nº 86 de Madrid ha dictado Auto de 3/12/09, tramitado por los Servicios Jurídicos de El Defensor del Paciente, por el que homologa judicialmente el acuerdo alcanzado por la paciente Doña Isabel Z. D. con el traumatólogo Don Jaime B. G. y su Aseguradora WR Berkley España, indemnizándola en la cantidad de 180.000 Euros.

Dª. Isabel Z. D., de 51 años de edad sufría terribles dolores en la columna cervical y en los lumbares, de los que venía siendo tratada por traumatólogos de la Seguridad Social y todos le decían que ese tipo de dolencia no tenía tratamiento quirúrgico. Conoce al Traumatólogo Dr. D. Jaime B. G., quien le habló de la “maravillas de la ozonoterapia”, indicándole que se trataba de una operación quirúrgica mínimamente invasiva, que se podía realizar con unas inyecciones de agujas intradérmicas, y que tan sólo requería de anestesia general, pero que lo bueno que tenía era que no quedaría ingresada, sino que dormía en su casa.

No le habló de que la Comunidad Científica, y concretamente el Comité de Terapias Alterantivas sobre Ozonoterapia en patología de la columna vertebral, desaconseja este tipo de tratamientos por los enormes riesgos y complicaciones que presenta, concretamente pérdida de la visión binocular, y espondilodiscitis infecciosas por gérmenes comunes (estafilococo aureus) debido a la poca o nula asepsia del procedimiento.

Para colmo tampoco le recogió consentimiento informado para la operación de ozonoterapia, sino tan solo un consentimiento informado para la anestesia.

Fue operada en la Clínica Ruber el 29/08/05 y se le realizó nucleosis con Ozonoterapia bajo control radioscópico C5-C6 C6-C7 con 2,5 cc de Oxígeno.-Ozono a 36 mcg por ml. Se le realizó la intervención en cuatro espacios en columna lumbar mediante rizólisis y ozonoterapia. Y se fue a dormir a casa.

Al día siguiente, presentaba un malestar general y fiebre acentuada que fue degenerando hasta el punto de que tuvo que ser reingresada nuevamente en la clínica Ruber desde el 1 al 5 de Septiembre durante 4 días, donde tras practicarle varias pruebas preoperatorias (Resonancia de Columna Cervical, análisis de sangre y gammagrafía con galio) descartan la discitis incipiente (infección de discos). Y le dan de alta sin diagnosticar.

A su llegada a su lugar de residencia en Conil (Cádiz), el cuadro infeccioso se había disparado e inmediatamente tuvo que ser ingresada en el Hospital Universitario Puerta del Mar donde se somete hasta 3 intervenciones quirúrgicas. La primera el 9/09/05, en el que se le realiza una cervicotomía anterior, evacuándose un gran absceso paravertebral. La segunda, el 15/11/05, para reconstrucción de vértebras, injerto de pala ilíaca y colocación de prótesis de titanio y la tercera, el 8/06/06 para corregir que el injerto había cedido por la destrucción de las vértebras por infección y estabilizar la columna (cifosis angular cérvico-dorsal).

Finalmente, constatada la extensión y alcance de la infección y del daño, el asunto fue expertamente peritado por el traumatólogo D. Fernando L. A. y por la Microbióloga Dª Marta M. R., concluyendo la existencia de una pésima asistencia médica en el transcurso de la operación.

Sirva como botón de muestra, que el traumatólogo había devuelto a la paciente, incluso, los honorarios suyos, y de todos los intervinientes en el quirófano, así como los gastos de quirófano, consciente como era de su mal hacer.

La paciente presentó demanda de responsabilidad civil por mala praxis médica y por parte de los tres demandados se contestó a la demanda, finalmente, antes de Juicio y con expresa autorización de la familia, se ha realizado acuerdo extrajudicial por importe de 180.000 Euros asumiendo su pago exclusivamente el traumatólogo D. Jaime B. G. y su compañía Aseguradora WR Berkley España, siendo a continuación homologado judicialmente por el Juzgado de Primera Instancia nº 86 de Madrid que es igual que si de una Sentencia se tratase.

La defensa del caso, ha sido tramitada por los servicios jurídicos de El Defensor del Paciente.

DEFENSOR del PACIENTE

Ultima actualización (Viernes 20 de Abril de 2012 17:39)

Ozonoterapia paravertebral. Ensayo clínico. Revista Spina

Intramuscular Oxygen-Ozone Therapy in the Treatment of Acute Back Pain With Lumbar Disc Herniation: A Multicenter, Randomized, Double-Blind, Clinical Trial of Active and Simulated Lumbar Paravertebral Injection.

Intramuscular oxígeno Ozonoterapia en el tratamiento de dolor agudo de espalda con hernia discal lumbar: un estudio multicéntrico, aleatorizado, doble ciego, ensayo clínico de activos y la inyección paravertebral lumbar simulado

Active and Simulated Lumbar Paravertebral Injection

Marco Paoloni, MD; Luca Di Sante, MD; Angelo Cacchio, MD; Dario Apuzzo, MD; Salvatore Marotta, MD; Michele Razzano, MD; Marianno Franzini, MD; Valter Santilli, MD

Authors and Disclosures

Posted: 07/29/2009; Spine. 2009;34(13):1337-1344. © 2009 Lippincott Williams & Wilkins

Resumen

Diseño del estudio: Multicéntrico, aleatorizado, doble ciego, ensayo controlado con tratamiento simulado en una cohorte de pacientes con dolor agudo de espalda baja (LBP), debido a una hernia de disco lumbar (LDH).
Objetivo: Para evaluar el beneficio de las inyecciones intramusculares paravertebrales-de un oxígeno-ozono (O₂O₃)

Métodos: Sesenta pacientes que sufren de lumbalgia aguda causada por la LDH se asignaron al azar a ozonoterapia  intramuscular O₂O₃ o a grupo control. Se observaron los pacientes para evaluar la intensidad del dolor, la discapacidad relacionada con dolor lumbar, y el consumo de drogas 15 y 30  días después del inicio del tratamiento, y 2 semanas  y 3 meses  y 6  de finalizado el tratamiento).

Resultados: Una diferencia significativa entre los 2 grupos en el porcentaje de casos que se había convertido sin dolor (61% vs 33%, P <0,05) se observó a los seis meses. Los pacientes que recibieron O₂O₃ tenían una puntuación más baja media del dolor que los pacientes que recibieron tratamiento simulado durante todo el período de observación. Una mejora significativa en la discapacidad relacionada con dolor lumbar en los pacientes del grupo de estudio en comparación con los pacientes del grupo control. El tratamiento con  fue seguido de un número significativamente menor de días en la toma de fármacos antiinflamatorios a los 30 dias y a las dos semanas y 3 meses  de finalizar el tratamiento. No se informaron eventos adversos.

Conclusión: El tratamiento del dolor lumbar y la ciática es una preocupación importante. Aunque la historia natural de la lumbalgia aguda suele ser autolimitada, terapias conservadoras no siempre son eficaces, en cuyo caso,  las inyecciones intramusculares paravertebrales lumbares con oxígeno-ozono, que son mínimamente invasivas, parece segura y efectiva para aliviar el dolor, así como reducir la discapacidad y la ingesta de medicación analgésica.

Ultima actualización (Viernes 20 de Abril de 2012 17:40)

Hernia Discal Ozonoterapia combinada

Centro de Investigaciones del Ozono

Ozonoterapia combinada en el tratamiento del paciente portador de hernia discal lumbar: estudio preliminar

Dr. José Luis Calunga Fernández, Dra. Thais L. Ramos Parra, Dr. Pablo Castillo, Dra. Silvia Menéndez, Lic. Ana Carballo y Dr. Javier Céspedes

Resumen

Se estudió el efecto de la ozonoterapia por vía rectal e intramuscular (paravertebral) sobre variables clínicas y hallazgos imagenológicos en pacientes portadores de hernia discal lumbar. Es conocido que la hernia discal lumbar es causa de sacrolumbalgia y en muchos de los casos llega a invalidar al paciente, constituyendo un problema de salud importante en el mundo actual. A pesar de que existen diferentes esquemas de tratamientos (conservadores y quirúrgicos) para abordar el paciente con hernia discal, muchas veces estos fracasan. Teniendo en cuenta, por otra parte, las propiedades de la ozonoterapia sobre el metabolismo del oxígeno y sobre mediadores de la inflamación, fue objetivo de este trabajo valorar el efecto de la ozonoterapia sobre la calidad de vida en pacientes con hernia discal lumbar. Para desarrollar este estudio se utilizó una muestra de 37 pacientes portadores de hernia discal lumbar, a estos se les midió por escala la fuerza muscular y el grado de reflectividad osteotendinosa, así como la intensidad del dolor antes y al finalizar el tratamiento con ozono, además se realizaron estudios imagenológicos antes y después de haber concluido el esquema terapéutico. Los resultados mostraron que la terapia con ozono reflejo un efecto beneficioso en las variables clínicas estudiadas en estos pacientes además de incidir significativamente en el mejoramiento desde el punto de vista imagenológico.

Palabras clave : Hernia discal, paravertebral, ozonoterapia, reflectividad osteotendinosa.

Hoy día la hernia discal lumbar se ha convertido en un trastorno patológico frecuente en nuestro medio, el cual causa gran invalidez en la población laboral entre 20 y 40 años, constituyendo de esta forma un problema de salud.¹

La hernia discal, como concepto, es la lesión del disco intervertebral que al prolapsarse a través del anillo fibroso produce protrusión del núcleo pulposo, dando lugar a un cuadro neurológico, compresivo de las raíces lumbares (síndrome compresivo radicular lumbosacro) caracterizado por sacro lumbalgia y dolor ciática, originado por causa fundamentalmente traumática; aunque también se plantean que existen causas metabólicas y anomalías congénitas que originan hernia discal lumbar.² De acuerdo con la patogenia, la hernia discal es de etiología fundamentalmente traumática (microtraumas repetitivos por esfuerzos excesivos de columna lumbar). Desde el punto de vista anatomofisiológico el disco intervertebral está compuesto por el anillo fibroso (compuesto por fibras colágenas concéntricas) que tiene la función de soportar las tensiones, y el núcleo pulposo (compuesto por proteoglicanos fundamentalmente), el cual tiene la función de resistir y distribuir la fuerza.

Las agresiones sobre la columna producen desgarro del anillo fibroso con fragmentación, deshidratación y herniación del núcleo pulposo. Existen esquemas de tratamientos para este trastorno patológico; está el tratamiento conservador, el cual consiste en el reposo del paciente, el uso de analgésicos y relajantes musculares, los bloqueos y la fisioterapia; también está el tratamiento quirúrgico, en el cual se destaca la disectomía percutánea y la quimionucleosis, 2 técnicas que entran en la cirugía cerrada y dentro de la cirugía abierta está la laminoectomía, la foraminectomía, la microcirugía (disectomía), entre otras.^“>3 A pesar de los avances en el manejo terapéutico de la hernia discal lumbar, muchas veces el paciente no responde ni a la terapia conservadora ni al tratamiento quirúrgico, apareciendo sobre todo en este último complicaciones como el síndrome doloroso posquirúrgico.⁴ Por lo antes expuesto, en la actualidad se hace necesario la búsqueda de algunas alternativas terapéuticas que ayuden a mejorar la calidad de vida de estos pacientes.^5-9 Atendiendo a este fenómeno, el tratamiento con ozono, el cual ha resultado útil en otras entidades nosológicas, a los niveles preclínico y clínico, ha mostrado propiedades beneficiosas como: la de mejorar el metabolismo del oxígeno, activar la actividad de enzimas antioxidantes, muestra un reconocido poder germicida y actualmente se viene reflejando el efecto de la ozonoterapia como moduladora del sistema inmunológico, así como la de actuar en el metabolismo de ciertas prostaglandinas.

Por todo lo expuesto, los autores de este trabajo piensan que la ozonoterapia podría ser una herramienta capaz de mejorar la calidad de vida del paciente con hernia discal lumbar; así fue el objetivo de este estudio, valorar el efecto de la ozonoterapia sobre parámetros clínicos e imagenológicos en el paciente portador de hernia discal lumbar.^10-13

Métodos

Para este estudio se tomó una muestra de 37 pacientes de los 2 sexos con diagnóstico de hernia discal lumbar, tomándose como criterio de inclusión, pacientes con hernia discal lumbar tipo prolapso central y lateral con compresión de la raíz, con un tiempo de diagnóstico clínico e imagenológico no mayor de 6 meses. Estos pacientes recibieron un ciclo de 20 sesiones (una sesión diaria) de ozonoterapia (mezcla gaseosa de oxígeno y ozono) por vía rectal a la dosis diaria de 6 mg, para obtener la dosis se calibró un equipo Ozomed 401, fabricado en el Centro de Investigaciones del Ozono a una concentración de 30 mg/L, aplicando un volumen de gas de 200 mL a través de una sonda rectal. Combinada con la ozonoterapia por vía rectal se empleó la vía intramuscular profunda, utilizando la musculatura paravertebral, cuya técnica de abordaje fue tomando como referencia el proceso espinoso de la vértebra superior lumbar del espacio en conflicto, trazando 10 cm hacia el lado izquierdo y derecho del punto de referencia, aplicándose 2 infiltraciones por 20 sesiones a razón de 2 veces por semana; el volumen del gas aplicado en cada punto fue de 10 mL a una concentración de 20 mg/L.^14,15

Para la evaluación de la evolución del dolor antes y después del tratamiento se utilizó la escala análoga visual del dolor,¹⁶ para evaluar la mejoría clínica se utilizó la escala de reflectividad teniendo en cuenta la evolución de reflejos osteotendinosos antes y después del tratamiento. Esta escala consta de 5 grados, grado 0 representa reflejos normales , el grado 1 hiperreflexia, grado 2 hiperreflexia que desplaza la articulación, el grado 3 representa hiperreflexia con aumento del área reflexógena y respuesta policinética y el grado 4 significa hiperreflexia con aumento del área reflexógena, acompañándose de reflejos patológicos como Babinsky, clonos, etc. Como medida de la fuerza muscular se utilizó el test de Daniels, que consta de 6 grados, el grado 0 significa ausencia de fuerza muscular, el grado 1 es cuando se aprecian vestigios de movimientos en el tejido muscular, el grado 2 es cuando se observa movimiento de la extremidad sin gravedad, el grado 3 es el movimiento de la extremidad con gravedad pero sin resistencia, el grado 4 es el movimiento de la extremidad en contra de la gravedad con moderada resistencia máxima y el grado 5 es el movimiento de la extremidad en contra de la gravedad, pero con extrema resistencia máxima; este grado se designó como normal.¹⁷ También todos los pacientes fueron evaluados antes y después del tratamiento desde el punto de vista imagenológico, utilizando para esto la tomografía axial computadorizada (TAC) y la resonancia magnética nuclear (RMN). Para el procesamiento estadístico de los resultados se confeccionó una base de datos aleatorizada, en soporte electrónico, utilizando el paquete estadístico NCSS; se calculó la media y la desviación estándar, utilizando la t de Student, para ver la diferencia entre 2 grupos y la significación estadística.¹⁸

Resultados

En cuanto a los resultados, estos muestran lo ya reportado con respecto a la evolución clínica e imagenológica de los pacientes portadores de hernias discales lumbares.¹⁹

En estos pacientes, en un gran porcentaje, se desarrolla un conflicto disco-radicular caracterizado clínicamente por la alteración del reflejos osteotendinosos y compromiso de la fuerza muscular, según la raíz nerviosa comprometida.²⁰

En la tabla, se aprecia la evolución de la fuerza muscular al inicio y al finalizar el estudio, de acuerdo con la escala utilizada se observa una disminución de la fuerza muscular en los pacientes estudiados. Si se analiza el comportamiento de esta variable neurológica se puede apreciar que mostró un incremento significativo después de haber concluido el tratamiento combinado de ozonoterapia. En la misma tabla se muestra, además, la evolución de los reflejos osteotendinosos al inicio y al finalizar el tratamiento, donde se refleja un aumento de la reflectividad en estos pacientes al comienzo del estudio, con tendencia a la normalidad al finalizar el tratamiento.

Ozono y Cáncer

Uses of Ozone Therapy in the Treatment of Cancer and Other Pathologies

…. In November of 1902, The Lancet published an article by Dr. George Stoker, a physician at the London Throat Hospital in which he described the benefits of treating tinnitus and chronic mid-ear deafness with ozone. Fourteen years later, on October 21 1916, The Lancet published another article by Stocker entitled “Ozone’s Surgical Applications”. In this article, Dr. Stoker described ozone’s efficacy to treat war wounds in tests performed with 21 patients at the Queen Alexander Military Hospital. In the article’s conclusions, Dr. Stoker noted: “Ozone greatly stimulates the flow of blood to the wounded area, its germicide effect destroys all the hostile microorganisms and it shows a great potential in aiding the formation of oxihemoglobin”. The articles goes on to state that ozone treatments represent a great benefit not only at the medical level but at the scientific, humanitarian and economic levels. A year later, Stoker presented another article with the same title where he discussed 78 more cases in which he demonstrated again the efficacy of ozone treatments.

(…) The therapeutic usage of ozone, administered via a mix of oxygen (O2) and ozone (O3), destroys a multitude of bacteria, viruses and fungus, augments the transport of oxygen to affected areas or organs and stimulates the enzymatic anti-oxidant systems, balances the immune system and has a potent anti-inflammatory and analgesic effect. To date, no secondary effects have been found during ozone treatments and, for this reason, its benefits should be put to use for patients that suffer oxidative, degenerative, ischemic, immune or tumor processes. Its efficacy has been proven as a complementary therapy in cancer patients. Dr. Pérez Olmedo, Founder of the first Intraperitoneal Ozone Therapy Unit in Spain, gave a presentation about the usefulness of ozone in cancer treatments at the 3^rd International Congress on Complementary and Alternative Cancer Treatments that took place on October 31-November 1^st 2009 in Madrid, sponsored by the World Association for Cancer Research (WACR) and by this magazine.

.-Dr. Pérez Olmedo, are you a conventional doctor? What are your qualifications?

I am a family doctor and I am also an orthopedic technician and a registered nurse. I practice conventional medicine, not alternative medicine. Unfortunately, ozone therapies are often practiced by individuals who are not doctors. In other countries, more advanced in their use of medicine, many physicians use ozone on a regular basis.

–What type of ozone research do you do?

At the moment I am focused on researching the usefulness of intraperitoneal ozone therapy in cancer patients and odontology. I also study the applications of ozonated oil in the development of skin care products. I carry out this research with a pharmacist, Mr. Manuel Carrascal. We use our proprietary blend of ozonated oils to manufacture creams, balms and toothpaste… we are very excited because these products maintain some of the regenerative properties of ozone and have proven to be effective in tumor-related radio dermatitis or herpes zoster.

.-How do you come to know about the benefits of ozone in different pathologies?

By pure necessity and by chance, I suffered from back pain for years and, being a doctor, I did a lot of research about treatments for back pain. After trying a few options, a neurosurgeon told me that the only solution for my vertebrae was to operate. I told him about ozone and that Dr. Verga, in Italy, was performing very successful para-vertebral treatments with ozone without secondary effects. He insisted that it wouldn’t work in my case but I decided to explore ozone treatment and did not do an operation, I tried the ozone treatments instead. The incredible thing was that, after years of living in pain, it went away after only one session! I thought that was such an extraordinary occurrence that it forced me to change radically my way of understanding, practicing and studying medicine. I think any doctor who knows a therapy that can help a patient has de duty of using it or recommending it, especially if he/she considers the therapy to be better and with less secondary effects that those conventionally used. It is sad that some of these therapies, particularly ozone, are not included in our public health systems. Dr. Eusebio Sala Planell, a vascular surgeon and pioneer of ozone therapies in Spain, often tells the story of an 80 year old woman who was already on the operating table, ready to have one of her legs amputated. At that moment, she decided to not get the operation and try ozone treatments (auto-hemotherapy and ozone bags). The patient had become acquainted with the possibility of ozone treatments a few days prior to the operation date. The 80 year old lady was able to save her leg and lived ten more years. At our clinic, OZONOTHERAPY&HEALTH we have had the chance to treat different cases but with equal success. In fact, as time goes by, we cannot but be surprised at the great help that ozone can bring to numerous pathologies.

I don’t know the answer to that question but I think it is probably because the vast majority of these courses are organized or financed by the pharmaceutical industry and it has no interest in seeing the benefits of ozone publicized. Nobody told me in medical school about the benefits of ozone. And my professors didn’t know about it either. This is still true in most medical schools. Because of this, most doctors finish their medical degrees thinking that ozone therapies are a secondary resource. This is a big mistake but fortunately the situation is not the same everywhere. In Germany, more than 15,000 MDs prescribe ozone treatments regularly. In Cuba, all hospitals, even pediatric hospitals, have ozone therapy units. In Turkey or Mexico, the medical practice of ozone therapy is growing tremendously. The successful results of these therapies will end up standing up for themselves.

 

–          .-The use of ozone as a medicine is authorized in Europe….

 

True. In fact, ozone is considered to be a drug by the European Medicines Agency. The truth is that ozone can be used as a therapeutic tool that works and has no side effects. Every doctor should be counting on it for his/her prescriptions. Because of its potent germicide and oxygenating action it is a perfect therapy for the treatment of wounds, burns or ulcers… and also for many other pathologies. The more I read, study and think about it the more I wonder how is it possible that not more doctors have taken an interest in ozone therapies. And the answer that comes to my mind when I ponder this question is that medical care has become first and foremost a big business and that curing people is of secondary interest. Nobel Prize winner Richard Roberts (1993) said “the drug that cures completely is not profitable”; it is more profitable to give patients drugs that alleviate but not cure for life. In the case of ozone, the issue is that it cannot be patented or bottled, where is the business there?

 

–        .-  In what pathologies does ozone provide an unquestionable benefit?

 

Ozone has an ample spectrum of applications. It is the strongest oxidizer after fluoride and radical hydroxyl. This property allows the body to generate other compounds able to stimulate a selective and potent antioxidant enzymatic response. In my opinion, ozone should be an obligatory therapy in any pathology in which there is oxidation: cardiovascular disease, degenerative disease, neurological diseases, arthritis… Diabetes is a great example of continuous and permanent oxidation as all the complications brought about by diabetes are due to oxidation. Diabetes is an illness that works as a manufacturing plant of free radicals 24/7. The antioxidant defenses of diabetics cannot keep so many free radicals at bay and other illnesses, secondary to diabetes, end up afflicting the patients. For this reason, diabetic patients have the highest rates of amputations, heart attacks, ictus, kidney failures, blindness and cancer. We know that it is critical to control rigorously blood sugar levels in diabetic patients and the diabetes treatment focuses on this aspect but we should also be taking measures to ensure that patients maintain a high level of antioxidant defenses. In this sense, ozone therapy is the perfect complement.

 

–       .-   If ozone is oxidizing, how can you explain that it improves the body’s defenses?

 

Ozone’s behavior is a paradox. It is indeed a potent oxidizing agent outside the body, for instance, in water, it is capable of killing any pathogenic microorganism 3,000 times faster than chlorine, but on the inside of the body it causes a series of reactions that creates antioxidant molecules, how? Ozone has a special affinity for any molecule that has a carbon double bond. This structure is very frequent in phospholipids and hence in all cell membranes. When ozone makes contact with this carbon double bond structures, for instance, in the blood, it reacts in nanoseconds causing the formation of aldehydes, peroxides, hydrogen peroxides and ozonides. These compounds bring about ozone’s therapeutic effects as they act as a signal molecule and activate different systems, amongst them the enzymatic antioxidant made out of three main enzymes: superoxide dismutase, catalase and the glutathione peroxidase system. These systems regulate the oxidative stress that takes place in our bodies every day. In addition, ozone activates the oxygenation of the tissues. Finally, it is anti-inflammatory, analgesic and balances the immune system.

 

–          .-What role can ozone therapies play in cancer treatment?

 

Just like the diabetic patient, cancer patients are also a manufacturing plant of free radicals. If we treat cancer patients conventionally, chemotherapies and radiotherapy are also highly oxidizing. Unfortunately, these patients’ normal cells suffer the oxidizing attacks of chemotherapy and radiotherapy, which can end up causing other types of cancer. It is clear that a chemotherapy agent can kill a cancer cell, but in order to kill all of them the doses have to be so high that most patients cannot stand the treatments, particularly when their cancer is already advanced. Conventional cancer therapies attack the bone marrow, which is where our defense cells are manufactured. This is the reason why patients are asked to “rest” between chemotherapy sessions, so that their bodies are given a chance to recover. If they overcome the first treatment and their defenses go up, they are given another oxidizing attack. This would be acceptable if our bodies could resist these attacks for a long time, but the truth is that in most cases the reality is different and the resting times allow the cancerous cells to become resistant to the treatment, which forces doctors to try new types of chemotherapy or to give more chemotherapy cycles. What is the reality of the treatment then? Cancer progresses and metastasis take place. Except in some cases, like some types of leukemia, some pediatric cancers, lymphomas, testicular cancer and a few others, the illness continues to progress. In the cases where the illness continues, patients are treated empirically, trying new and different treatments just in case it works.

.-When should ozone therapies be applied in cancer patients?

In my opinion, every cancer patient should receive at least one cycle of intra- peritoneal ozone therapy from the day of diagnosis. Ozone, in addition to being a potent germicide, increases the oxygenation of tissues, acts on the inflammatory-anti-inflammatory cascade regulating it, generates cytokines such as interferon gamma, the TNF (tumor necrosis factor) alpha and other “good” eicosanoids such as prostacyclin. All these compounds exhibit anti-tumor capabilities and are manufactured by the body instead of synthetically thanks to the ozone therapy. Ozone also activates enzymatic antioxidant systems (superoxide dismutase, catalase and the glutathione peroxidase system). The extra generation of prostacyclin as a result of intra peritoneal ozone therapies is possibly the key to the therapy’s anti-tumor effect.

In addition, an environment rich in ozone inhibits the growth of cancer cells. We blow intra peritoneal ozone in great quantities so that the tumor area experiences an increase in oxygen for several days. In addition, this inhibits neovascularization or neoangiogenesis, which stimulates the tumor area or causes lack of oxygen.

– Why are patients with advanced cancer the main oncology testing ground?

Terminal or “incurable” patients with advanced cancer processes are often offered experimental treatments or treatment combinations. The problem is that unfortunately they are also the ones who suffer the side effects of these sometimes unproven treatments. As of today, oncology researchers have not found one drug that attacks cancer cells without affecting the healthy ones. Most of these terminal patients think that the treatments they are being offered as a last resort might cure them, and doctors think the same, but the reality is different. While experimentation with humans is necessary, the drugs usually have great side effects that in many occasions precipitate the patient’s death faster than the illness itself.

In this sense, I always remember my father’s dramatic death. He suffered from Sezary Syndrome, a T cell skin cancer. He died in two months. His leucocytes fell down to zero and he could not overcome the treatment at any point. Without treatment he would have lived a lot longer but we accepted a new product that, according to the laboratory, allowed patients with this illness to live longer than those patients who did not have the treatment. The reality is that when you read the studies that support the sales permits for new and costly anti-tumor drugs you can see that the group of patients that tried the drug had an increased “life expectancy” of days or weeks, at most a couple of months. This is the case Sorafenib for advanced liver cancer or Riluzol for for lateral amyotrophic sclerosis, and the worst thing is that they don’t increase patients’ quality of life! On the contrary, chemotherapy agents offer a little longer life span at a high cost in terms of life quality. This is the case with all the products that are used to treat advanced, incurable cancer.

–-What are the results experienced by cancer patients who choose intraperitoneal ozone therapy?

We have treated more than 80 patients and we have performed more than 350 intra peritoneal ozone sessions. We have many data points that allow us to say that these patients experience unquestionable positive responses to the treatments, which can be measured both clinically and analytically. Ozone intraperitoneal therapies affect positively the patients’ quality of life, increase their life span and slow down the progression of metastasis. In addition, patients treated with intraperitoneal ozone respond better to chemotherapy and radiotherapy treatments. We have treated many types of cancer and ozone intra peritoneal therapy has always worked. Clearly, we would need to treat at least 50 patients with each cancer type in order to accelerate our research and lend it more weight. At any rate, there are publications about the effect of intra peritoneal ozone in cancer patients, such as the one published by Dr. Schulz, from the University of Marburg (Germany) in the Journal of Cancer.

-How do you apply intraperitoneal ozone?

We anaesthetize the patient and then introduce the ozone through a catheter. Initially there are at times side effects from the anesthesia and the procedure but at the end of the treatment the patient’s body improves. And when you apply ozone in an area where there is a tumor an adverse environment for the progression of the metastasis and the tumor growth is created. Patients show a clinical improvement and his/her life quality and expectancy improve. It also helps with the side effects of chemotherapy. In the same way, it helps when our patients are receiving radiotherapy because ozone improves   .- If  if this is the case, why don’t more oncologist use ozone as a complementary treatment?

I think it is because sometimes oncologists exclude all treatments other than the one they administer. Even patients end up thinking that their illness can only be treated by an oncologist. The most surprising fact is that some oncologists reject the visible improvements in some of their patients when they try other treatments. In some instances, oncologists are not interested in exploring whether other treatments have actually contributed to their patient’s improvement.

– what are the most important steps that your intra peritoneal ozone practice has experienced in the four years since we last interviewed you?

The most important step has been the consolidation of our medical team. Dr. Marques Magallanes de Regojo, has been an important addition to the five doctor team. He is an internist who today shares with us the conviction that ozone is an essential tool in treating different pathologies, especially in cancer patients. Four years ago we had treated 14 patients, now we have treated more than 50 and we have performed more than 350 sessions. This experience has allowed us to collect a great amount of information that will help us improve our treatment protocols and results. Some of this information will be published and our experiences described so that hopefully they will awaken the interest of those who dedicate their lives to treat and cure cancer. We know already how the liver, kidney, marrow and other organs respond to large doses of intraperitoneal ozone. We would be glad to share our information with other doctors who might be interested in the topic.

At the same time, we have also treated dogs afflicted with cancer with intraperitoneal ozone. Thanks to Mary-Lis Urueña, her Great Dane with bone cancer received several treatments and lived for seven months enjoying a great quality of life and no side effects. During the last intraperitoneal treatment, she was anesthetized with electro acupuncture because she had previously become temporarily blind as a reaction to anesthesia. The results with the electro acupuncture were fantastic.

– Where any of the patients you treated particularly successful?

Most of our patients use ozone as a complementary treatment, for most of them, the ozone is applied rectally or intravenously, few of them actually choose intraperitoneal ozone treatments, but all of them respond well to ozone. Clearly, the intraperitoneal application is much more effective than the other techniques in terms of treating symptoms as well as when measuring their biochemical parameters.

I especially remember David, a 33 year old man who came with his mother Susana, an admirable woman who fought for him like I have never seen. David had a melanoma with metastasis in the brain, peritoneum, bladder, pancreas and liver. At the point where they came to see me, he spent his life on a couch, waiting to die. We treated him with intraperitoneal ozone and soon after the treatment he was fishing, shopping, and leading quite a normal life. He went from waiting to die on a couch to living life. His condition improved clearly, some metastasis disappeared and others were reduced. We waited a few months and his mother brought him again from Seville to be treated a second time, with the same positive results. His mother was also trying other treatments and a few months after she called us to perform a third treatment but he was at the hospital by then and he passed away soon after. I wish David could have received the treatments today because we know a lot more now, but it is clear that he and his mother helped us get to where we are today. Each of our patients comes with a very different situation and each of them has benefited from ozone

– Given these results, how can you explain the indifference of oncologist?

For us it is incomprehensible. Multinational pharmaceutical companies have invested billions of euros in essays and research searching for anti-tumor drugs that increase the patients’ life span and, as it turns out, they are looking for something that already exists! And the most amazing fact is that they don’t want to research and perform “serious” essays with ozone. Why? Because it cannot be patented. Hence, they have chosen to send the message that there are no studies that demonstrate ozone’s efficacy… not saying that if there is not more research carried out is because they don’t want to invest the money.

The saddest part of all this is that the (Health) Administration doesn’t want to study what has been achieved with ozone up to now. They prefer to continue looking elsewhere and spending billions of euros in iatrogenic products and only increase the patients’ life span a few weeks at best. Perhaps this is one of the reasons why many high ranking officials from our health Administration end up holding very lucrative jobs in these multinationals. Of course, executives from the same multinationals populate the Administration’s top management. The same is true for the “opinion leaders” in the medical world.

– Are you so sure that ozone is more effective than chemotherapy in the treatment of cancer?

Clearly. As I have mentioned there are some tumors that can be cured with chemotherapy but in the case of patients with advanced cancer, those whose tumors continue to grow despite chemotherapy, I can assure you that if we divided the patients into two groups, one treated with ozone and another one with chemotherapy, we would find the best life expectancy and quality of life in the group treated with ozone. And I am not proposing that we treat ozone as an alternative to chemotherapy but as a complementary treatment.

It has been demonstrated that ozone has a potent germicide effect and that when it liberates oxygen in the tissues it increases the body’s enzymatic anti-oxidant capabilities without oxidative effects. It has also been shown that ozone has a strong analgesic and anti-inflammatory action and balances the immune system, being capable of liberating substances with anti-tumor powers, without secondary effects. Who can believe that a product that does all these things is not really indicated for cancer patients?

– Additionally, the treatment is a lot cheaper, which means that the state would save a lot of money.

True. The savings brought about by using ozone to treat a number of conditions would be tremendous, but that would collide with the interests of multinationals and its defenders within the Health Administration. This is the reason that explains why there are no initiatives to demonstrate through research that ozone and other natural products and treatments with no side effects, which cannot be patented, are beneficial to patients.

– But ozone is not a panacea in cancer treatments…

No it is not. Cancer must be treated in an integral manner. What is evident is that ozone therapy is very beneficial for cancer patients as well as for patients suffering from other illnesses.

– Has any Health Administration (within Spain) shown any interest in listening to the potential benefits of ozone therapies?

No, what’s more, until a short time back, it persecuted and sanctioned those who practiced ozone therapies. The MDs who practice ozone therapies have in fact lived in fear from the Health System inspections. It seems grotesque to me, but to many health inspectors, the fact of extracting blood from a patient, ozonating it and putting it back into their bodies seems like witchcraft. They are incapable of understanding and accepting that in many of the most advanced European countries this is a regular, daily medical practice.

– If the Health Administration behaves in this manner, can we say that it is impossible to carry out a rigorous study that describes the efficacy of ozone therapies in cancer or other illnesses?

That is correct, because no laboratory would finance it and no regional government would do it either. And individuals cannot afford it because it is too expensive. In fact, this is the reason that explains the fact that the studies about ozone that have been published in scientific journals are not taken seriously, because they are not large enough. Nobody would finance large studies if the product or treatment cannot be patented. Today, public health is a business and those who derive an economic benefit from it will undermine any treatment or product that has not been developed according to their norms… knowing that nobody is going to finance it. However, I have to say that Dr. Marques and I recently formed a research group on ozone, GIDO, whose funds have been donated by the Fundación Fabré that presides Juan Angel Regojo. In short, the fact that something has not been “scientifically demonstrated” following the multinationals’ standards does not mean that it doesn’t work.

– Has any of the oncologist associations, or the Spanish Association Against Cancer, or the National Center for Oncological Research ever requested any information about your research and work?

No. None of them. At some point in the past, a person from the Spanish Association Against Cancer from Pontevedra suggested that I give a talk about my work but the person could not get the association to approve his initiative.

– How about any oncologist?

 

Do you at least know what they think about ozone therapies? Probably some patients have asked them their opinion about whether or not ozone therapy may work in their case..

In our country, oncologists are very drastic with their patients in terms of them using parallel protocols. Patients are scared to tell them the truth because they don’t want to risk their doctors getting angry at them and stop the follow up tests. It is my understanding that a minority of patients has mentioned what we do to their oncologists and the general answer is along the lines of “it’s your money, but it will not work”. They criticize ozone therapy without knowing it and as if it was not a medical practice, as if those of us who use it were charlatans, not certified, professional MDs. What is more, some patients have received terribly angry responses from their oncologists, who stopped the chemotherapy on the patients when they confessed that they were doing ozone treatments at the same time. It is incredible, but many doctors think that the treatments consist on having the patient breath ozone! The level of ignorance about ozone therapies is incredible.

– In the face of these circumstances, do you really think that there is a future for Ozone Therapies?

Without a doubt. I have no doubt that its use will become prevalent sooner or later because ozone is a powerful medical tool that allows doctors to treat a number of pathologies, saving numerous surgical interventions and generating huge drug savings to patients, the state and the medical insurance companies. What is more, ozone helps humans age healthily and, at the least, to be able to have a better quality of life while suffering an illness.

I am persuaded of the fact that in the future, there will be ozone generators in every neighborhood. This would be feasible and cheap to implement already today.

With regards to cancer, ozone will become a necessary therapy in any stage of the illness and the use of intraperitoneal ozone will be viewed as a basic procedure. Our work now is to establish with as much accuracy as possible the treatment protocols. The Spanish government should bet on these therapies. Now is the moment to do it.

Antonio F. Muro Ultima actualización (Viernes 09 de Mayo de 2014 22:31)

OZONOTERAPIA EN LA MIGRAÑA

Qué es el ozono

El ozono es un gas cuya molécula está formada por tres átomos de oxígeno; el ozono médico es una mezcla del 5% de Ozono y 95% de oxígeno; su concentración está expresada en microgramos y el oxígeno en mililitros.

Por sus cualidades antisépticas en 1857, su precursor, el alemán Werner von Siemens, fue el primero en construir un tubo de inducción diseñado para tal fin (ozonizador) que aporta diferentes concentraciones de ozono según la patología a tratar.Que es la Migraña

La Migraña o Jaqueca, es un dolor de carácter pulsátil localizado en la frente, que algunas veces se irradia a los ojos y puede localizarse a un solo lado de la cabeza; puede ir acompañado de náuseas o vómitos; es un dolor que aumenta con la luz y el ruido; puede ser desencadenado por ansiedad, insomnio y estrés, así como por la ingesta de café, quesos o chocolate. Se presenta especialmente en la mujeres entre los 20-50 años. Puede ser precedida por un aviso previo (aura) con disminución de la agudeza visual, por una sensación de hormigueo o incluso disminución de fuerza en brazos y piernas.

Porqué se produce el dolor

En la migraña existe una primera fase con estrechamiento (vasoconstricción) de los vasos finos, en las membranas transparentes que cubren el cerebro (meninges). En la segunda fase hay un ensanchamiento (vasodilatación) de los vasos finos.

En la fase inicial se producen sustancias pro-inflamatorias (histamina y serotonina) que irritan las terminaciones nerviosas. A nivel de la masa cerebral en fases de dilatación, hay una disminución de la actividad de las células nerviosas (hiper-polarización), lo que produce el adormecimiento.

Region de color amarillo zona activa de la migraña.

Beneficios del ozono en el tratamiento de la Migraña

El ozono tiene facultades regeneradoras, antiinflamatorias y analgésicas.

En la Jaqueca o Migraña, en la fase de ensanchamiento de los vasos finos, al haber una disminución del riego, del oxígeno y de la glucosa, el ozono facilita el transporte y la utilización tanto del oxígeno como de la glucosa en la zona afectada.

Muchos estudios internacionales avalan el uso de la ozonoterapia en el tratamiento de la jaqueca, con una efectividad que supera el 93%.

La aplicación del ozono se realiza por insuflación rectal directa del gas, en forma de una sonda fina como si fuera un enema .

El Diagnóstico

Se realiza con la historia clínica, el examen neurológico, el examen psíquico, el Electroencefalograma y el Cateem-electroencefalograma.

Qué se debe descartar antes de iniciar el tratamiento

Con la analítica podemos descartar un hipertiroidismo descompensado, una intolerancia a las habas, un infarto reciente, un trastorno manifiesto de la coagulación, una anemia severa, así como un embarazo (gonadotrofina coriónica).

Dr. med. Jeremias Lozano Saavedra

Ex segundo Presidente de la Sociedad para el diagnóstico de las enfermedades cerebro-vasculares en Renania Westfalia-Alemania

La ozonoterapia es un tratamiento coadyuvante

Estoy de acuerdo con el tratamiento

Ultima actualización (Jueves 24 de Febrero de 2011 10:01)

Ozonoterapia en enfermedades cerebro-vasculares

Centro de tratamiento multidisciplinario de columna

 

Qué es el ozono

El ozono es un gas cuya molécula está formada por tres átomos de oxígeno; el ozono médico es una mezcla del 5% de Ozono y 95% de oxígeno; su concentración está expresada en microgramos y el oxígeno en mililitros.

Por sus cualidades antisépticas en 1857, su precursor, el alemán Werner von Siemens, fue el primero en construir un tubo de inducción diseñado para tal fin (ozonizador) que aporta diferentes concentraciones de ozono según la patología a tratar.

Ultima actualización (Jueves 24 de Febrero de 2011 10:05)

Beneficios del ozono en la enfermedad cerebro-vascular

El ozono tiene facultades regeneradoras, antiinflamatorias y analgésicas.

La enfermedad cerebro vascular por carencia de riego sanguíneo con trastornos selectivos de las regiones más vulnerables del cerebro, ya sea de una forma persistente o temporal, lleva consigo una disminución del riego sanguíneo causada bien por trombosis (taponamiento de una arteria por placas en la pared), embolia (coágulos que se desprenden ya sea por trastornos del ritmo cardiaco o por desprendimiento de una placa de las arterias), aumento de la tensión venosa por problemas de drenaje del flujo venoso o por arteriolopatía (endurecimiento de las paredes de las pequeñas arterias.

margin-bottom: 0cm” mce_style=”margin-bottom: 0cm”>El ozono resulta beneficioso al mejorar el riego sanguíneo aumentando el contenido de oxigeno en la sangre, con mejora de la circulación sanguínea capilar (arterias más finas), evitando de esta forma la falta de riego. Aumenta la flexibilidad de los glóbulos rojos facilitando así el paso de la sangre por los capilares; mejora el metabolismo del oxígeno a nivel de los glóbulos rojos lo cual induce a un aumento de la utilización de glucosa en el tejido cerebral. Combate la acidosis (restos del los deshechos donde ha habido la falta de sangre, por activación de encimas que inhiben los peróxidos y los radicales libres (ambas cosas son sustancias tóxicas que destruyen las células).

La aplicación del ozono de realiza por insuflación rectal directa del gas, en forma de una sonda fina como si fuera un enema .

Como percibe el paciente el trastorno vascular

La enfermedad cerebro vascular se manifiesta con trastornos de las facultades mentales, disminución de la memoria, concentración, cansancio intelectual y físico prematuro, inseguridad para caminar, mareos, ruidos en los oídos, disminución de la agudeza visual algunas veces con lentitud de los movimientos y trastornos de la sensibilidad.

Circulación cerebral normal. Infarto (amarillo), disminución circulatoria (rojo)

El diagnóstico se realiza con la historia clínica, el examen neurológico y psíquico; estudio vascular completo con ecografía de las arterias del cuello y del cerebro, el Electroencefalograma, Cateem EEG( con el que he trabajado varios años) así como el TAC (tomografía axial computarizada) y la Resonancia Magnética con angiografía.

Qué se debe descartar antes de iniciar el tratamiento

Con la analítica podemos descartar un hipertiroidismo descompensado, una intolerancia a las habas, un infarto cardiaco reciente, un trastorno manifiesto de la coagulación.

Dr. med. Jeremias Lozano Saavedra

Ex segundo Presidente de la Sociedad para el diagnóstico de las enfermedades

cerebro-vasculares en Renania Westfalia-AlemaniaLa ozonoterapia es un tratamiento coadyuvante.

Estoy de acuerdo con el tratamiento de Ozono

Ultima actualización (Jueves 24 de Febrero de 2011 10:05)